Amfotropní a VSV-G-pseudotypové retrovirové vektory transdukují lidské hematopoetické progenitorové buňky s podobnou účinností

Jedním z omezení retrovirového přenosu genů do hematopoetických kmenových buněk je nízká hladina receptoru amfotropního viru. V této studii jsme zkoumali, zda retrovirové vektory pseudotypizované G-proteinem viru vezikulární stomatitidy (VSV) mohou toto omezení překonat. Lidské progenitorové buňky purifikované pomocí magnetických kuliček a třídění buněk byly transdukovány amfotropním nebo VSV-G pseudotypizovaným retrovirovým vektorem obsahujícím zkrácený receptor lidského nervového růstového faktoru jako markerový gen. Buňky byly předem stimulovány ligandem flt-3, faktorem kmenových buněk a interleukinem-3 a transdukovány na fibronektin. Exprese markerových genů byla analyzována průtokovou cytometrií. Účinnost transdukce amfotropního a VSV-G pseudotypu viru pro CD34+ buňky se významně nelišila. Přenos genů do CD34+CD38- buněk, které jsou obohaceny o nezralejší progenitory, nebyl omezen a účinnost přenosu pro tuto podskupinu byla u obou pseudotypů rovněž podobná. Přidání fibronektinu výrazně zlepšilo přenos genu pomocí amfotropního vektoru (5- až 19,3krát, průměr 12,6krát), zatímco účinek na VSV-G pseudotyp byl mnohem méně výrazný (1- až 3,9krát, průměr 2,1krát, P = 0,04). Závěrem lze říci, že pomocí optimalizovaného transdukčního protokolu bylo dosaženo vysokých úrovní přenosu genů do lidských hematopoetických progenitorů a účinnost transdukce nebylo možné dále zvýšit použitím VSV-G-pseudotypů. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.