Apokrinní duktální adenom potní žlázy se sebaceózní diferenciací u psa
Abstrakt
Sedmiletému psovi plemene border kolie se v kůži levé tváře objevil pevný útvar o průměru přibližně 1 cm. Histologicky se útvar skládal z duktálních struktur vystlaných dvouvrstevnými luminálními epiteliálními a bazaloidními nádorovými buňkami spolu s několika hnízdy mazových buněk. Imunohistochemické barvení ukázalo, že luminální epiteliální nádorové buňky byly pozitivní na cytokeratin (CK, CAM5.2) a CK19, ale ne na CK14 nebo p63. Naproti tomu bazaloidní nádorové buňky byly pozitivní pro CK14, p63 a αSMA, ale ne pro CK19 nebo CAM5.2. Exprese CK8 byla pozorována jak v luminálních epiteliálních, tak v bazaloidních nádorových buňkách. Nádorové buňky se sebaceózní diferenciací byly pozitivní pro CK14, ale ne pro ostatní markery. Jedná se o první případ duktálního adenomu apokrinní potní žlázy se sebaceózní diferenciací, který se vyskytl v bukální kůži psa.
1. Úvod
Nádory apokrinních potních žláz jsou u psů poměrně časté a vyskytují se spíše na hlavě, krku a končetinách. Přibližně 70 % apokrinních nádorů potních žláz u psů je benigní povahy . Benigní nádory apokrinní potní žlázy se klasifikují jako apokrinní adenomy, komplexní a smíšené apokrinní adenomy nebo apokrinní duktální adenomy . Apokrinní duktální adenomy u psů jsou vzácné benigní nádory a v rozsáhlém průzkumu tvořily pouze 0,3 % kožních nádorů u psů . U psů byla sebaceózní diferenciace popsána v pěti případech nádorů mléčné žlázy . Pokud je však autorům známo, nebyl dosud popsán nemamární apokrinní nádor se sebaceózní diferenciací u psa.
2. Popis případu
U sedmiletého psa plemene border kolie se objevil pevný útvar v kůži levé tváře, který byl chirurgicky odstraněn a předán na oddělení veterinární patologie Nippon Veterinary and Life Science University (Tokio, Japonsko) k histopatologickému vyšetření. Hrubý vzhled útvaru byl přibližně 1 cm v průměru a řezná plocha útvaru měla homogenní šedobílou barvu. Fyzikální vyšetření včetně kompletního krevního obrazu a běžného biochemického profilu séra neodhalilo žádné další abnormality. Podrobné rentgenové a radiologické vyšetření neodhalilo žádný útvar svědčící pro nádor v hrudní a břišní dutině. Po 9 měsících od chirurgické excize nebyla zaznamenána žádná recidiva nádoru ani metastázy. Další léčba nebyla provedena.
Excidovaný útvar byl fixován v 10% neutrálním pufrovaném formalínu, zalit do parafinu, rozřezán na 4 μm řezy a obarven hematoxylinem a eozinem (HE), periodickou kyselinou Schiffovou (PAS), alciánovou modří a olejovou červení O. V případě, že byl nádor vyjmut, bylo provedeno další barvení. Sériové řezy byly podrobeny imunohistochemickému barvení (IHC) pomocí techniky značené streptavidin-biotin peroxidázy s myšími monoklonálními protilátkami proti nízkomolekulárnímu cytokeratinu (CK; klon CAM5.2, předředěný, BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA), CK8 (klon Ks 8.7, 1 : 50, Progen Biotechnik GmbH, Heidelberg, Německo), CK14 (klon LC002, 1 : 50, BioGenex Laboratories Inc., San Ramon, CA, USA), -smooth muscle actin (SMA; klon 1A4, 1 : 400, DAKO, Glostrup, Dánsko), CK19 (klon 170.2.14, 1 : 100, Boehringer Mannheim, Německo) a p63 (klon 4A4, 1 : 400, NeoMarkers Inc., Fremont, CA, USA). Všechny tkáňové řezy byly předem ošetřeny citrátovým pufrem (pH 6,0) a inkubovány při 121 °C po dobu 15 min. Reakce na každý antigen byla vizualizována přidáním chromogenu 3,3′-diaminobenzidin tetrahydrochloridu a protibarvena hematoxylinem.
Histologicky byla hmota dobře ohraničená a zapouzdřená. Skládala se z různých nodulů a proliferujících hnízd složených převážně z dvouvrstvých duktálních struktur s vnitřní vrstvou kuboidních až sloupcovitých luminálních epiteliálních nádorových buněk a vnější vrstvou bazaloidních nádorových buněk oddělených tenkým fibrózním stromatem (obr. 1). Vnitřní vrstva luminálních epiteliálních buněk měla jasnou cytoplazmu a malá hyperchromatická jádra. Vnější vrstva bazaloidních nádorových buněk měla řídkou eozinofilní cytoplazmu a o něco větší euchromatická jádra. Mitotická aktivita byla mírná. Uvnitř nádoru se nacházelo několik hnízd velkých pěnovitých buněk podobných mazovým buňkám obklopených bazaloidními buňkami (obrázek 2). Jádra těchto buněk byla centrálně umístěná s jemně vakuolizovanou cytoplazmou a byla negativní na barvení PAS a alciánovou modří, ale pozitivní na lipidy barvením olejovou červení O (vložený obrázek 2). V nádoru nebyla pozorována žádná skvamózní diferenciace ani keratinizace. Dále nebyla pozorována žádná nekróza, invaze ani embolie nádorových buněk.
Histopatologický vzhled bukální masy. Masa je tvořena duktálními strukturami vystlanými dvouvrstevnými luminálními epiteliálními a bazaloidními nádorovými buňkami. Hematoxylin a eosin (HE). Bar = 100 m.
Sebaceózní diferenciace pozorovaná v rámci apokrinního duktálního adenomu. Sebaceózní buňky se vyznačují hojnou, čirou a vakuolizovanou cytoplazmou a centrálně umístěným jádrem obklopeným bazaloidními buňkami v apokrinním duktálním adenomu. HE. Bar = 50 m. Vložka: zmražený řez obarvený olejovou červení O odhalující kapičky lipidů v cytoplazmě sebaceózních buněk.
Jak ukazuje tabulka 1, imunohistochemické barvení ukázalo, že luminální epiteliální nádorové buňky byly pozitivní na CK19 (obrázek 3) a CAM5.2, ale ne na CK14, SMA a p63. Naproti tomu bazaloidní nádorové buňky byly pozitivní pro CK14 (obrázek 4), p63 (obrázek 5) a SMA, ale ne pro CK19 a CAM5.2. Exprese CK8 byla pozorována jak v luminálních epiteliálních, tak v bazaloidních nádorových buňkách (obrázek 6). Nádorové buňky vykazující sebaceózní diferenciaci byly pozitivní pro CK14, ale ne pro ostatní markery.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Luminální nádorové buňky jsou pozitivní na CK19. Imunohistochemické vyšetření CK19 s hematoxylinovou protibarvou. Bar = 50 m.
Bazaloidní nádorové buňky a buňky vykazující mazovou diferenciaci jsou pozitivní na CK14. Imunohistochemie pro CK14 s hematoxylinovým protibarvením. Bar = 50 m.
Bazaloidní nádorové buňky jsou pozitivní na p63. Imunohistochemie na p63 s hematoxylinovým protibarvením. Bar = 50 m.
Luminální i bazaloidní nádorové buňky jsou pozitivní na CK8. Imunohistochemické vyšetření CK8 s hematoxylinovou protibarvou. Bar = 50 m.
3. Diskuse
Na základě histologických a imunohistochemických nálezů byl nádor diagnostikován jako apokrinní duktální adenom potní žlázy se sebaceózní diferenciací. Podle klasifikace Světové zdravotnické organizace pro epiteliální a melanocytární nádory kůže domácích zvířat se benigní nádory apokrinní potní žlázy klasifikují jako apokrinní adenomy, komplexní a smíšené apokrinní adenomy nebo apokrinní duktální adenomy . U psů byla sebaceózní diferenciace popsána ve čtyřech případech nádorů mléčné žlázy: dva komplexní adenomy a dva karcinomy a jeden případ nádoru slinné žlázy , zatímco u apokrinních potních žláz nebyla dosud popsána. Tato zpráva popisuje případ duktálního adenomu apokrinní potní žlázy se sebaceózní diferenciací, který se vyskytl v kůži bukální oblasti border kolie.
CK19 a CAM5.2 jsou užitečné markery luminálních buněk, zatímco CK14, p63 a SMA jsou markery bazálních/myoepiteliálních buněk u psů . Exprese CK8 byla pozorována u luminálních i bazaloidních buněk v nádorech apokrinních žláz u psů . Naproti tomu CK14 byl exprimován v normálních mazových žlázách a myoepiteliálních buňkách apokrinních a mléčných žláz . Exprese SMA byla pozorována v myoepiteliálních buňkách, ale ne v bazaloidních buňkách v nádorech apokrinních žláz . U psího apokrinního karcinomu byly v myoepiteliálních, bazaloidních a luminálních buňkách identifikovány buňky p63+SMA+, p63+SMA- a CK8+p63- . Kromě toho se tento nádor ve shodě s předchozími studiemi skládal především ze dvou typů nádorových buněk, luminálních buněk a bazaloidních buněk, se sebaceózní diferenciací.
Tento nádor se zdál být diferencovaný od sebaceózního adenomu a trichoblastomu kůže. Charakteristika nádoru v tomto případě zahrnovala buněčnou proliferaci s dvouvrstevnými duktálními strukturami se sebaceózní diferenciací, což není znakem sebaceózního nádoru ani trichoblastomu. Nádory mléčné žlázy psů jsou často pozorovány ve skvamózní diferenciaci . Některé apokrinní duktální adenomy potních žláz psů mají ložiska skvamózní diferenciace s malými keratinovými depozity v infundibulární části apokrinního vývodu . V tomto případě však nebyla skvamózní diferenciace pozorována.
Původ mazové složky v tomto nádoru byl nejasný. Předchozí studie však naznačovaly, že nádorové bazaloidní buňky se mohou diferencovat v sebaceózní epiteliální buňky a že kožní kmenové buňky mohou dát vzniknout sebocytům v nádorech mléčné žlázy psů . Proto navrhujeme, že sebaceózní diferenciace v tomto nádoru mohla být odvozena z bazaloidních buněk nebo lokálních pluripotentních kmenových buněk, podobně jako u psích nádorů mléčné žlázy.
Konflikt zájmů
Autoři prohlašují, že nedošlo ke konfliktu zájmů.
Poděkování
Autoři by rádi poděkovali Dr. Hidemi Kitagawovi za poskytnutí informací o sledování a vzorku nádoru pro tuto studii a doktorům Yoko Matsudovi, Toshiyukimu Ishiwatovi a Zenya Naitovi z oddělení patologie a integrativní onkologické patologie na Nippon Medical School za užitečné diskuse.