Amphotrope og VSV-G-pseudotypede retrovirale vektorer transducerer humane hæmatopoietiske stamceller med samme effektivitet

En begrænsning ved retroviral genoverførsel til hæmatopoietiske stamceller er det lave niveau af amphotropisk virusreceptor. I den foreliggende undersøgelse undersøgte vi, om retrovirale vektorer pseudotypet med G-proteinet fra vesikulær stomatitisvirus (VSV) kan overvinde denne begrænsning. Humane progenitorceller oprenses ved hjælp af magnetiske perler og cellesortering og blev transduceret med en amfotropisk eller VSV-G-pseudotypet retroviral vektor, der indeholder den afkortede humane nervevækstfaktorreceptor som et markørgen. Cellerne blev præstimuleret med flt-3-ligand, stamcellefaktor og interleukin-3 og transduceret på fibronectin. Markergenekspression blev analyseret ved flowcytometri. Transduktionseffektiviteten af amfotropisk og VSV-G-pseudotypet virus for CD34+-celler var ikke signifikant forskellig. Genoverførsel til CD34+CD38-celler, som er beriget med mere umodne progenitorer, var ikke begrænset, og overførselseffektiviteten for denne delmængde var også ens for begge pseudotyper. Tilføjelsen af fibronectin forbedrede genoverførslen med den amfotropiske vektor betydeligt (5- til 19,3-fold, gennemsnit 12,6), mens effekten på VSV-G-pseudotypen var langt mindre udtalt (1- til 3,9-fold, gennemsnit 2,1, P = 0,04). Det kan konkluderes, at der blev opnået et højt niveau af genoverførsel til humane hæmatopoietiske progenitors med en optimeret transduktionsprotokol, og at transduktionseffektiviteten ikke kunne forbedres yderligere ved brug af VSV-G-pseudotyper. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.