Patologiske ændringer forårsaget af Anoplocephala perfoliata i ileocecal junction hos heste

Der blev tilfældigt udvalgt 31 blandede heste, der var mellem 15 måneder og 13 år gamle og regelmæssigt blev sendt til slagterier, til denne undersøgelse. De omfattede 11 parasitfrie dyr (kontrolgruppe) og 20 heste, der var ramt af spontan A. perfoliata-infektion. Hos alle hestene blev ileocecal junction indsamlet inden for 30 minutter efter døden. Derefter blev tarmprøverne skyllet i rindende vand og straks anbragt i 10 % neutralt bufferet formalin. I mellemtiden blev voksne bændelorme, der var fastgjort til ileocecal junction, direkte talt, registreret, skyllet i rindende vand og konserveret i en 10 % formalinopløsning. De indsamlede bændelorme blev lagt i lactophenolopløsning og derefter monteret på objektglas for at blive identificeret ved hjælp af morfologiske parametre (Euzeby 1981). Baseret på antallet af registrerede bændelorme blev de udvalgte 31 heste inddelt i fire grupper: gruppe “N” med 0 bændelorme; gruppe “A” med 1 til 20 bændelorme; gruppe “B” med bændelorme mellem 20 og 100; og gruppe “C” med mere end 100 bændelorme.

Fra hver prøve blev 5 µm tykke paraffinindlejrede snit farvet med hæmatoxylin-eosin og cresylviolet. Histologisk undersøgelse blev udført for at evaluere følgende parametre: lymfonocytær og eosinofil inflammatorisk infiltration i mucosa/submucosa, atrofi/fusion af tarmvilli, erosive/ulcerative læsioner, degenerative forandringer af gobletceller og tarmlymfatisk follikelhyperplasi. Der blev tildelt en individuel score til hver enkelt parameter: 0: ingen læsioner, 1: lette læsioner, 2: moderate læsioner og 3: udtalte læsioner. På grundlag af den samlede sum af de registrerede scorer blev de mucosale og submucosale skader derfor klassificeret som følger: 0 (ingen ændringer) med 0-2 point; I (milde ændringer) med 3-7 point, II (moderate ændringer) med 8-12 point og III (markante ændringer) med 13-15 point.

På den ileocecal overgang blev tykkelsen af de cirkulære og longitudinale muskellag kvantificeret ved billedanalyse (NIS-Elements Br-2) for at identificere hypertrofiske tilstande. For hver prøve blev ENS histopatologisk undersøgelse vurderet ved morfometrisk evaluering for at vurdere den gennemsnitlige lineære tæthed for myenteriske ganglier, antallet af neuronale celler og den gennemsnitlige procentdel af kromatolytiske/nekrotiske neuronale celler i tre 3 cm serielle snit.

En generel lineær model (GLM) blev anvendt til at verificere en signifikant korrelation mellem den parasitære byrde og den histopatologiske klassificering af de mucosale og submucosale læsioner. En envejs variansanalyse (ANOVA) efterfulgt af Tukeys multiple sammenligningstest blev anvendt til at påvise signifikante forskelle mellem antallet af myenteriske ganglier, antallet af neuronale celler, procentdelen af kromatolytiske/nekrotiske neuroner, tykkelserne af muskellagene og den gruppe, der blev identificeret på grundlag af antallet af registrerede bændelorme. Signifikansniveauet blev anset til 5 %. Statistisk analyse blev udført ved hjælp af R 2.7 version software (GNU GENERAL PUBLIC LIC LICENSE, Free Software Foundation, Inc., Boston, USA).