NACHWEIS VON ANTI-NEUTROPHIL-ANTIKÖRPERN

Neutrophile Antikörper können eine Vielzahl von Störungen verursachen, darunter neonatale Immunneutropenie, Autoimmunneutropenie, Immunneutropenie nach Knochenmarktransplantation, medikamentös bedingte Immunneutropenie und transfusionsbedingte akute Lungenverletzungen. Derzeit gibt es kein einziges Verfahren, das alle klinisch relevanten neutrophilen Antikörper aufspürt. Eine Kombination aus Granulozyten-Agglutination und Immunfluoreszenztests ist derzeit das wirksamste Mittel zum Nachweis. Aufgrund der autolytischen Tendenz von gelagerten Neutrophilen müssen frische, sorgfältig isolierte Neutrophile als Testzellen verwendet werden. Die Testneutrophilen sollten auf die neutrophilen Antigene NA1, NA2, NB1, SH und 5b typisiert werden. Wenn es nicht möglich ist, die Spezifität der Alloantikörper anhand des Reaktionsmusters mit typisierten Testzellen zu bestimmen, sollte das Serum in einem antigenspezifischen Assay getestet werden, der auf der monoklonalen Antikörper-spezifischen Immobilisierung von Granulozyten basiert (MAIGA-Assay). Um eine umständliche Zellisolierung zur Identifizierung von Alloantikörpern zu vermeiden, haben wir stabile Säugetierzelllinien etabliert, die die neutrophilen Antigene NA1, NA2 und SH exprimieren. Etwa 30 % der neutrophilen Autoantikörper binden bevorzugt an das NA1-Antigen und lassen sich am besten mit Neutrophilen von NA1-homozygoten Spendern oder NA1-exprimierenden Säugetierzellen nachweisen. Autoantikörper werden in der ersten Runde des Antikörperscreenings nur in 74 % der Seren nachgewiesen. Andererseits kann ein positiver direkter Antikörpertest der neutrophilen Granulozyten des Patienten nicht als Beweis für das Vorhandensein von Autoantikörpern angesehen werden, da die neutrophilen Granulozyten des Patienten in der Regel durch eine erhöhte Expression von Komplement- und Fcy-Rezeptoren aktiviert sind, was zu einer unspezifischen IgG-Bindung führt. Daher bleibt die Untersuchung der Patientenseren in Intervallen auf ungebundene neutrophile Antikörper die beste Methode zum Nachweis von Autoantikörpern.