Antineoplásicos

7.2.3 Fármacos mAb-Enediyne

Los antibióticos enediyne con actividades antitumorales muy potentes son producidos por una variedad de microorganismos.43 Los antibióticos enedíticos se han dividido en dos subfamilias, que incluyen los enedíinos cíclicos de nueve miembros, como la kedarcidina, la LDM y la maduropeptina, y los enedíinos cíclicos de diez miembros, como las calicheamicinas, las esperamicinas y las dinemicinas. Las enediinas cíclicas de nueve miembros están compuestas por el cromóforo y la apoproteína con unión no covalente. Estos antibióticos enediínicos son uno de los agentes antitumorales más potentes y tienen una arquitectura molecular única, mecanismos de acción intrincados y actividades biológicas notables, produciendo roturas de cadena simple y doble en el ADN.44 La mayoría de los antibióticos enediínicos tienen actividades rápidas y fuertes contra las células cancerosas y exhiben una actividad antitumoral mucho mayor (de 100 a 1000 veces) en relación con los fármacos de quimioterapia ampliamente utilizados, como la adriamicina. El uso directo de los antibióticos enediyne como fármacos antitumorales está generalmente limitado debido a la falta de especificidad de las células tumorales.45 Es muy deseable generar compuestos enediyne modificados con una especificidad y propiedades farmacológicas mejoradas. Los mAb llevan específicamente el agente citotóxico a las células tumorales y maximizan su efecto antitumoral y minimizan su exposición a los tejidos normales, lo que resulta en un índice terapéutico mejorado. Varios conjugados mAb-enediína han demostrado ser prometedores y exitosos desde el punto de vista clínico en la quimioterapia dirigida contra el cáncer.46

GO (Mylotarg) consiste en un anticuerpo humanizado anti-CD33 (hP67.6) unido a dicloruro de N-acetil-gamma calicheamicina 1,2-dimetil hidracina. Una vez que el anticuerpo se une al antígeno de superficie, se internaliza rápidamente. La calicheamicina, una potente enedina, se libera posteriormente y actúa como agente antitumoral citotóxico. Mylotarg fue aprobado por la FDA de EE.UU. en 2000 para su uso como monoterapia en pacientes de 60 años o más con LMA en recaída. En los estudios clínicos, Mylotarg ha demostrado su eficacia contra la LMA, a pesar de que tanto el fármaco como el enlazador utilizado para unirlo al mAb son relativamente inestables en condiciones fisiológicas, y de que la preparación es muy heterogénea, ya que sólo el ~50% del mAb existe realmente en la forma conjugada.47 En la LMA se han explorado ampliamente el GO como agente único y las combinaciones con quimioterapéuticos estándar. La hepatotoxicidad y la mielosupresión retardada son limitantes de la dosis. Su perfil de toxicidad se reduce con dosis reducidas de GO e incluso administrando una sola infusión. La inmunoterapia dirigida con GO para el tratamiento de la LMA ha producido remisiones. El GO tiene una toxicidad aceptable y produce tasas de respuesta cercanas al 30%. La eficacia del GO en monoterapia y en terapia combinada para el tratamiento de la LMA de novo y en recaída sigue siendo objeto de investigación. Con el fin de reducir la toxicidad y mejorar la eficacia, es necesario definir la dosis y el esquema óptimos y el emparejamiento con otros agentes quimioterapéuticos estándar en ensayos clínicos a gran escala.

Hasta el momento, se están explorando varios conjugados de calicheamicina unidos a mAb contra diversas dianas tumorales para sus aplicaciones terapéuticas. CMC-544 es un inmunoconjugado de calicheamicina y mAb específico para CD22 que se une a CD22 humano con alta afinidad y provoca una potente actividad citotóxica contra las células B malignas CD22-positivas. CMC-544 impide el establecimiento de xenoinjertos de linfoma humano de células B subcutáneo y también provoca la regresión de xenoinjertos de linfoma de células B pequeñas y grandes establecidos en ratones desnudos. CMC-544 consigue la supervivencia a largo plazo de los ratones con linfoma de células B diseminado sistémicamente. Estos resultados apoyan la aplicación clínica de CMC-544 como agente terapéutico dirigido en el tratamiento de las neoplasias linfoides B CD22-positivas. El CMC-544 se evaluó en ensayos clínicos en pacientes con LNH de células B.48 El efecto del CMC-544, un mAb anti-CD22 conjugado con calicheamicina, se analizó en relación con el CD22 y la glicoproteína P (P-gp) en la leucemia linfocítica crónica (LLC) de células B y el LNH in vitro. Las líneas celulares utilizadas fueron las parentales CD22-positivas Daudi y Raji, y sus sublíneas P-gp positivas, Daudi/MDR y Raji/MDR. También se utilizaron células obtenidas de 19 pacientes con LLC o LNH de células B. El CMC-544 no fue eficaz en las células Daudi/MDR y Raji/MDR en comparación con sus células parentales. Los modificadores MDR, PSC833 y Ms209, restauraron el efecto citotóxico de CMC-544 en las sublíneas que expresan P-gp. En las muestras clínicas, el efecto citotóxico de CMC-544 estaba inversamente relacionado con la cantidad de P-gp (P=0,003) y con la acumulación intracelular de rodamina-123 (P<0,001). Por otra parte, el efecto se correlacionó positivamente con la cantidad de CD22 (P=0,010). El efecto de CMC-544 depende de los niveles de CD22 y P-gp. Estos hallazgos ayudarán a predecir la eficacia clínica de este fármaco en estas neoplasias de células B, sugiriendo un efecto beneficioso con el uso combinado de CMC-544 y modificadores de MDR.

El compuesto CMB-401 es un inmunoconjugado que consiste en el mAb hCTM01 dirigido contra la mucina epitelial polimórfica unido covalentemente al antibiótico citotóxico calicheamicina por un enlazador amida.26 El CMB-401 demostró la eliminación selectiva de las células que expresan MUC1 in vitro y produjo pronunciados efectos antitumorales relacionados con la dosis en un rango de dosis de ocho veces contra un xenoinjerto de carcinoma de ovario que expresa MUC1 (OvCar-3). El CMB-401 fue muy activo en los modelos con regímenes de dosis única o múltiple y causó regresiones completas en las dosis más altas. En un ensayo clínico, el CMB-401 se evaluó como monoterapia para el tratamiento del carcinoma epitelial de ovario (EOC) recurrente sensible al platino.25 Después de una dosis inicial IV de hCTM01 (sin calicheamicina), se administró el CMB-401 ligado a la calicheamicina (16 mg/m2 IV) durante 60 minutos durante un máximo de siete ciclos, con 4 semanas entre ciclos. Diecinueve pacientes fueron evaluables. Los cambios medibles observados tras la administración de CMB-401 no cumplían los criterios de RP. El CMB-401 no fue eficaz como monoterapia para este tipo de EOC. La DMT se alcanzó con 16 mg/m2. El CMB-401 parece tener un perfil de toxicidad aceptable con una actividad demostrable contra el COE.49 Los acontecimientos adversos experimentados por los pacientes en el estudio incluyeron náuseas, astenia, dolor abdominal, cefalea, anorexia y diarrea, en su mayoría con un grado de toxicidad de 1 o 2. Basándose en los datos publicados sobre la eficacia de los conjugados que administran calicheamicina a través de enlazadores híbridos (bifuncionales), se sugiere que el enlazador amida utilizado en el CMB-401 puede haber contribuido a que no induzca la RP en los pacientes. El uso de enlazadores híbridos para dirigir la hCTM01 a la EOC puede justificar una mayor investigación.

El antibiótico antitumoral LDM, originalmente denominado C1027, que se aísla del filtrado del caldo del Streptomyces globisporus C1027 muestra una citotoxicidad extremadamente potente contra las células cancerosas humanas cultivadas y una marcada inhibición de los tumores trasplantables en modelos animales.50,51,52 El LDM está compuesto por una apoproteína y un cromóforo,53 y el peso molecular de la primera es de 10.500 Da. Basándose en la estructura de la holoproteína, los mecanismos putativos para la estabilización y la liberación del cromóforo son ejecutados por la apoproteína.54 La fracción de beta-tirosina del cromóforo podría desempeñar un papel importante para la estabilización del sistema de enedición y la disociación del cromóforo de la apoproteína funcionaría como el desencadenante. El LDM, con una arquitectura molecular única, sería un prometedor candidato a fármaco «ojiva». En términos de valores IC50, la citotoxicidad del LDM para las células de carcinoma de colon humano HT-29 fue 10.000 veces más potente que la de la mitomicina C y la adriamicina. Utilizando varios métodos para vincular el LDM a los mAb contra las células de hepatoma, se preparan dos tipos de inmunoconjugados (1) un conjugado directo mediante la vinculación de LDM a mAb; (2) un conjugado ensamblado mediante dos pasos, vinculación y reconstitución, en el que la apoproteína se conjuga con mAb y luego se añade el cromóforo al conjugado mAb-apoproteína. El ensayo clonogénico muestra que la citotoxicidad del conjugado ensamblado es mucho mayor que la del conjugado directo.55 El experimento in vivo muestra que el inmunoconjugado ensamblado inhibe selectivamente y en gran medida el crecimiento del tumor en comparación con el LDM libre.56

El conjugado 3G11-LDM se preparó enlazando el mAb 3G11 modificado con 2-imotiolano contra la colagenasa de tipo IV a la fracción de lisina-69 de la apoproteína LDM mediante SPDP o SMBS como enlazador intermedio del fármaco.57 El 3G11 mostró inmunorreactividad positiva en el carcinoma de colon, el fibrosarcoma y el hepatoma, e inmunorreactividad negativa en los tejidos adyacentes no malignos.58 El 3G11-LDM conservó la inmunorreactividad del 3G11 contra la colagenasa de tipo IV, inhibió la actividad de secreción de la colagenasa de tipo IV y mostró una citotoxicidad extremadamente potente en comparación con el LDM libre. En el modelo animal, el 3G11-LDM suprimió notablemente el crecimiento del hepatoma 22 y del fibrosarcoma HT-1080, y aumentó el tiempo de supervivencia de los ratones portadores de tumores. Además, la eficacia antitumoral y el tiempo de supervivencia del conjugado fueron superiores a los de LDM y/o 3G11 libres. El conjugado 3G11-LDM muestra efectos antitumorales mucho más fuertes que una dosis equivalente de LDM libre y puede tener un potencial terapéutico prometedor en el tratamiento del cáncer.