Cambios patológicos causados por Anoplocephala perfoliata en la unión ileocecal equina
Para este estudio se seleccionaron al azar 31 caballos de raza mixta, con edades comprendidas entre los 15 meses y los 13 años y enviados regularmente a los mataderos. Entre ellos había 11 animales libres de parásitos (grupo de control) y 20 caballos afectados por una infección espontánea por A. perfoliata. En todos los caballos se recogió la unión ileocecal a los 30 minutos de la muerte. Posteriormente, las muestras intestinales se enjuagaron en agua corriente y se colocaron inmediatamente en formol neutro al 10%. Mientras tanto, las tenias adultas adheridas a la unión ileocecal se contaron directamente, se registraron, se enjuagaron en agua corriente y se conservaron en una solución de formol al 10%. Las tenias recogidas se pusieron en solución de lactofenol y luego se montaron en portaobjetos para ser identificadas mediante parámetros morfológicos (Euzeby 1981). Según el número de tenias registradas, los 31 caballos seleccionados se dividieron en cuatro grupos: grupo «N», con 0 tenias; grupo «A», con 1 a 20 tenias; grupo «B», con tenias entre 20 y 100; y grupo «C», con más de 100 tenias.
De cada muestra, se tiñeron secciones de 5 µm de grosor incrustadas en parafina con hematoxilina-eosina y cresil violeta. Se realizó una investigación histológica para evaluar los siguientes parámetros: infiltración inflamatoria linfomonocitaria y eosinofílica en la mucosa/submucosa, atrofia/fusión de las vellosidades intestinales, lesiones erosivas/ulcerosas, cambios degenerativos de las células caliciformes e hiperplasia de los folículos linfáticos intestinales. Se atribuyó una puntuación individual a cada parámetro seleccionado: 0, ausencia de lesiones; 1, lesiones leves; 2, lesiones moderadas; y 3, lesiones marcadas. Por consiguiente, basándose en la suma total de las puntuaciones registradas, el daño de la mucosa y la submucosa se calificó de la siguiente manera 0 (sin cambios) con 0-2 puntos; I (cambios leves) con 3-7 puntos, II (cambios moderados) con 8-12 puntos, y III (cambios marcados) con 13-15 puntos.
En la unión ileocecal, los espesores de las capas musculares circulares y longitudinales se cuantificaron mediante análisis de imagen (NIS-Elements Br-2) para identificar condiciones hipertróficas. Para cada muestra, la investigación histopatológica del SNE se evaluó mediante una evaluación morfométrica para valorar la densidad lineal media de los ganglios mientéricos, el número de células neuronales y el porcentaje medio de células neuronales cromatolíticas/necróticas en tres secciones seriadas de 3 cm.
Se utilizó un modelo lineal general (GLM) para verificar una correlación significativa entre la carga parasitaria y la clasificación histopatológica de las lesiones de la mucosa y la submucosa. Se utilizó un análisis de varianza de una vía (ANOVA) seguido de la prueba de comparación múltiple de Tukey para detectar diferencias significativas entre el número de ganglios mientéricos, el número de células neuronales, el porcentaje de neuronas cromatolíticas/necróticas, los espesores de las capas musculares y el grupo identificado en función del número de tenias registradas. El 5% fue el nivel de significación asumido. El análisis estadístico se llevó a cabo utilizando el software R 2.7 (GNU GENERAL PUBLIC LICENSE, Free Software Foundation, Inc., Boston, USA).