DETECCIÓN DE LOS ANTICUERPOS ANTI-NEUTROFILOS

Los anticuerpos contra los neutrófilos pueden causar una variedad de trastornos que incluyen la neutropenia inmune neonatal, la neutropenia autoinmune, la neutropenia inmune después del trasplante de médula ósea, la neutropenia inmune inducida por fármacos y la lesión pulmonar aguda relacionada con la transfusión. Actualmente no existe ninguna técnica que defina todos los anticuerpos de neutrófilos clínicamente relevantes. Una combinación de pruebas de aglutinación de granulocitos e inmunofluorescencia es actualmente el medio de detección más eficaz. Debido a la tendencia autolítica de los neutrófilos almacenados, deben utilizarse neutrófilos frescos cuidadosamente aislados como células de prueba. Los neutrófilos de prueba deben tipificarse para los antígenos neutrófilos NA1, NA2, NB1, SH y 5b. Si no es posible determinar la especificidad de los aloanticuerpos a partir del patrón de reacción con las células de prueba tipificadas, el suero debe analizarse en un ensayo de antígeno específico basado en la inmovilización de granulocitos con anticuerpos monoclonales (ensayo MAIGA). Para evitar el engorroso aislamiento celular para la identificación de aloanticuerpos, hemos establecido líneas celulares estables de mamíferos que expresan los antígenos neutrófilos NA1, NA2 y SH. Alrededor del 30% de los autoanticuerpos de neutrófilos muestran una unión preferente al antígeno NA1 y se detectan mejor utilizando neutrófilos de donantes homocigotos NA1 o células de mamífero que expresan NA1. Los autoanticuerpos sólo se detectan en el 74% de los sueros durante la primera ronda de detección de anticuerpos. Por otra parte, una prueba de anticuerpos directa positiva de los neutrófilos del paciente no puede considerarse una prueba de la presencia de autoanticuerpos, ya que los neutrófilos del paciente suelen estar activados con una mayor expresión de los receptores del complemento y de Fcyre, lo que da lugar a una unión inespecífica de IgG. Por lo tanto, el análisis del suero del paciente a intervalos para detectar anticuerpos de neutrófilos no unidos sigue siendo la mejor manera de detectar autoanticuerpos.