Los vectores retrovirales anfotrópicos y pseudotipados con el VSV transducen células progenitoras hematopoyéticas humanas con una eficacia similar

Una restricción de la transferencia de genes retrovirales a las células madre hematopoyéticas es el bajo nivel del receptor del virus anfotrópico. En el presente estudio, examinamos si los vectores retrovirales pseudotipados con la proteína G del virus de la estomatitis vesicular (VSV) pueden superar esta restricción. Células progenitoras humanas purificadas mediante perlas magnéticas y clasificación celular fueron transducidas con un vector retroviral anfotrópico o pseudotipado con VSV que contenía el receptor del factor de crecimiento nervioso humano truncado como gen marcador. Las células se preestimularon con el ligando flt-3, el factor de células madre y la interleucina-3 y se transdujeron sobre fibronectina. La expresión del gen marcador se analizó mediante citometría de flujo. Las eficiencias de transducción del virus anfotrópico y del VSV-G-pseudotipado para las células CD34+ no difirieron significativamente. La transferencia de genes a las células CD34+CD38-, que están enriquecidas en progenitores más inmaduros, no estuvo restringida y las eficiencias de transferencia para este subconjunto también fueron similares para ambos pseudotipos. La adición de fibronectina mejoró considerablemente la transferencia génica con el vector anfotrópico (de 5 a 19,3 veces, con una media de 12,6), mientras que el efecto sobre el seudotipo VSV-G fue mucho menos pronunciado (de 1 a 3,9 veces, con una media de 2,1, P = 0,04). En conclusión, se lograron altos niveles de transferencia de genes a progenitores hematopoyéticos humanos con un protocolo de transducción optimizado, y las eficiencias de transducción no pudieron mejorarse aún más con el uso de los seudotipos VSV-G. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.