Comparaison de l’effet antifongique du gel d’Aloevera et du Triphala : Une étude in vitro Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A

ORIGINAL ARTICLE

Année : 2017 | Volume : 29 | Issue : 2 | Page : 90-94

Comparaison de l’effet antifongique du gel d’Aloevera et du Triphala : Une étude in vitro
Supreet Jain1, Sheetal Mujoo2, Minal Daga3, Salona Kalra4, Ravleen Nagi1, Afshan Laheji5
1 Département de médecine orale et de radiologie, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, Inde
2 Département de médecine orale et de radiologie, College of Dentistry, Jazan University, Arabie Saoudite
3 Département de dentisterie conservatrice et d’endodontie, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, Inde
4 Département de médecine buccale et de radiologie, Triveni Institute of Dental Sciences Hospital and Research Centre, Bilaspur, Chhattisgarh, Inde
5 Département de pathologie orale et maxillo-faciale, Daswani Dental College, Kota, Rajasthan, Inde

Adresse de correspondance :
Supreet Jain
Département de médecine orale et de radiologie, New Horizon Dental College and Research Institute, Sakri, Bilaspur, Chhattisgarh
India

Source de soutien : Aucun, Conflit d’intérêt : Aucun

Check

DOI : 10.4103/jiaomr.JIAOMR_167_16

Résumé

Abjectif : Le but de la présente étude était de déterminer et de comparer les activités antifongiques et inhibitrices de diverses concentrations de gel d’Aloevera et de Triphala contre le Candiada albicans oral. Matériaux et méthodes : Les champignons (C. albicans) ont été isolés à partir de 10 patients atteints de candidose pseudomembraneuse et de patients atteints de stomatite dentaire et transférés dans un bouillon de Sabouraud, qui a ensuite été incubé dans une gélose au dextrose de Sabouraud (SDA). L’activité antifongique du gel d’Aloevera et de Triphala a été testée par la méthode de diffusion en disques, et la concentration minimale inhibitrice a été déterminée par la méthode de microdilution en bouillon. Résultats : La valeur moyenne de la zone d’inhibition pour Aloevera était de 3,35 ± 0,59 mm et de 1,06 ± 0,41 mm à 100% et 50%, respectivement. Pour Triphala, elle était de 4,19 ± 0,57 mm et de 1,79 ± 0,43 mm à 100 % et 50 %, respectivement (valeur P < 0,001). La zone d’inhibition de Triphala à 100% a montré une valeur plus élevée que celle d’Aloevera à la même concentration (P = 0,004). Des résultats similaires ont été obtenus à la concentration de 50 % de Triphala et d’Aloevera (P = 0,004). La concentration minimale inhibitrice du gel d’Aloevera et du Triphala contre C. albicans était de 25% et 12,5%, respectivement. Conclusion : Le gel d’Aloevera et le Triphala ont tous deux montré une propriété antifongique à des concentrations plus élevées et peuvent être utilisés comme un adjuvant prometteur pour les agents antifongiques.

Mots-clés : Antifongique, culture, naturel

Comment citer cet article :
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Comparaison de l’effet antifongique du gel d’Aloevera et du Triphala : une étude in vitro. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017;29:90-4

Comment citer cette URL:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Comparaison de l’effet antifongique du gel d’Aloevera et du Triphala : une étude in vitro. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017 ;29:90-4. Disponible à partir de : https://www.jiaomr.in/text.asp?2017/29/2/90/217911

Introduction

Candida est un genre de levures et est la cause la plus commune d’infection fongique orale. La plupart des espèces de Candida sont des commensaux ou des endosymbiontes inoffensifs des hôtes, y compris les humains ; cependant, lorsque le système immunitaire est compromis ou que les barrières muqueuses sont perturbées, ils peuvent envahir et causer des maladies. Candida albicans est l’espèce la plus fréquemment isolée et est responsable du muguet buccal, de la candidose pseudomembraneuse.
Le coût, les effets secondaires et la résistance accrue aux médicaments antifongiques disponibles dans le commerce ont conduit les chercheurs à explorer les remèdes naturels à base de plantes contre les infections fongiques.
Les plantes médicinales utilisées traditionnellement sont une source riche d’agents antimicrobiens et sont facilement disponibles dans les zones rurales. Elles sont relativement moins chères que la médecine moderne. Les produits de métabolites secondaires, produits par les plantes médicinales, sont une source importante de nombreux médicaments pharmaceutiques.
L’Aloevera est une plante ressemblant à un cactus qui appartient à la famille des Liliacea. Le gel d’Aloevera est un gel mucilagineux incolore, sécrété par les cellules parenchymateuses des feuilles fraîches d’Aloevera. Il contient 98-99% d’eau et 1-2% de composés actifs tels que l’aloïne, l’aloe-emodine, l’aloemannan, les flavonoïdes, l’aloesine, les stérols, les acides aminés et les vitamines. Triphala, qui signifie trois fruits, est une formulation ayurvédique indienne comprenant Terminali chebula, T. Belerica et Phyllantus embelica dans une proportion de 1:1:1. Ses composants phytochimiques sont le tanin, l’acide gallique, l’acide ellagique, le phénol et les glycosides. L’Aloevera et le Triphala ont tous deux des propriétés antibactériennes, antioxydantes, antifongiques, anti-inflammatoires et immunomodulatrices… Les effets des extraits d’Aloevera et de Triphala sur l’infection orale à Candida ont été étudiés par très peu de chercheurs en Inde. Le but de l’étude était de déterminer les activités antifongiques et inhibitrices de diverses concentrations de gel d’Aloevera et de Triphala contre C. albicans.

Matériaux et méthodes

L’étude a été menée dans le département de microbiologie, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur. L’autorisation éthique a été prise par le comité d’éthique institutionnel. Le consentement éclairé a été obtenu de tous les patients. Un écouvillon de Candida a été prélevé sur les patients souffrant de candidose pseudo-membraneuse par stomatite dentaire et transféré dans un bouillon de Sabouraud. Tous les isolats de Candida ont été confirmés par le test du tube de germination et le test de germination des spores. Cet échantillon de Candida isolé a été incubé dans la gélose dextrose de Sabouraud SDA (laboratoires HIMEDIA, Mumbai) à 4°C.

Figure 1 : Croissance de Candida dans le bouillon de Sabouraud Cliquez ici pour voir

Préparation de l’extrait d’Aloevera
L’épiderme épais de la feuille fraîche d’Aloevera a été enlevé et le gel mucilagineux solide a été recueilli dans un récipient stérile . Dix millimètres de ce gel ont été mélangés dans 100 ml de diméthylsulfoxyde (DMSO) à 1% et conservés à 4°C. Le DMSO (≤1%) a un effet insignifiant sur la croissance des champignons et a donc été utilisé comme solvant.

Figure 2 : Extraction du gel d’Aloevera à partir de feuilles fraîches dans une plaque stérile Cliquez ici pour voir

Préparation de l’extrait de Triphala
Une centaine de grammes de Triphala churna (Dabur Triphala churna) a été mélangée dans 100 ml d’eau pour obtenir une solution aqueuse . Ensuite, cette solution a été bouillie pendant 45 min. Ensuite, elle a été refroidie et filtrée. Ce filtrat a été utilisé pour vérifier son effet antifongique. La propriété antifongique du gel d’Aloevera et de Triphala a été détectée en utilisant la méthode de diffusion de disque.

Figure 3 : Triphala churna Cliquez ici pour voir

Activation de Candida albicans
Des spores fongiquesoopful ont été étalées sur une plaque de potato dextrose agar (PDA) et incubées à 37°C pendant 24 h avant le test. Toutes les plaques (n = 10) ont été conservées à 4°C pour une utilisation ultérieure.
Méthode de diffusion par disque
Des puits de huit millimètres ont été percés dans chaque plaque (n = 10 pour Candida) ayant activé C. albicans, avec un alésoir de 8 mm dans de la gélose ensemencée dans laquelle ont été versés 100%, 50%, 25% et 12,5% d’extrait de gel d’Aloevera. De même, pour le Triphala, des puits de 8 mm ont été percés dans différentes plaques (n = 10 pour le Triphala) ayant activé C. albicans, avec un foret de 8 mm dans de la gélose ensemencée dans laquelle 100%, 50%, 25%, 12,5% d’extrait de Triphala ont été versés. Après avoir été normalisées à la température ambiante, les plaques ont été incubées à 37°C pendant 24 heures. La zone d’inhibition a été mesurée et enregistrée .

Figure 4 : (a) Zone d’inhibition à la concentration de 100% de Triphala. (b) Zone d’inhibition à 50% de concentration de Triphala. (c) Zone d’inhibition à 100% de concentration d’Aloevera. (d) Zone d’inhibition à 50% de concentration d’Aloevera Cliquez ici pour voir

Concentration minimale inhibitrice
La concentration minimale inhibitrice (CMI) a été réalisée par la méthode de dilution des microbilles. La dilution la plus élevée qui n’a donné aucune colonie fongique unique a été prise comme la CMI. Les extraits d’Aloevera ont été mélangés avec du DMSO à 1% pour obtenir différentes concentrations du stock, à savoir 100%, 50%, 25%, 12,5% et 6,25%. De même, différentes concentrations de Triphala ont été obtenues en mélangeant l’extrait avec de l’eau distillée. Des volumes égaux des différentes concentrations de chaque extrait ont été mélangés dans des microtubes (bouillon dextrose Sabouraud) pour obtenir 0,5 ml de solution. Les tubes ont été incubés à 37°C pendant 24 heures. Plus tard, la dilution d’essai a été subculturée sur SDA et incubée pendant 24 h pour vérifier la croissance fongique .

Figure 5 : Concentration minimale inhibitrice pour Triphala et Aloevera Cliquez ici pour voir

Analyse statistique
Les données ont été compilées dans MS Office Excel. L’analyse statistique a été réalisée à l’aide du progiciel SPSS version 21 (SPSS Statistics for Windows, version 21.0. Chicago : SPSS Inc.). Le test d’analyse de la variance (ANOVA) a été effectué pour les comparaisons intra et intergroupes. Un test post hoc (Tukey HSD) a également été effectué pour comparer les différentes concentrations d’Aloevera, de Triphala et des deux. Les résultats ont été mesurés en moyenne ± SD. La valeur P inférieure à <0,05 a été considérée comme statistiquement significative et <0,001 comme hautement significative.

Résultat

Les échantillons de Candida collectés ont été analysés par coloration de Gram, qui a montré la présence de grappes de pseudohyphes suggérant l’espèce C. albicans. La valeur moyenne de la zone d’inhibition pour Aloevera était de 3,35 ± 0,59 mm et de 1,06 ± 0,41 mm à 100% et 50%, respectivement. Pour le Triphala, elle était de 4,19 ± 0,57 mm et de 1,79 ± 0,43 mm à 100 % et 50 %, respectivement. Triphala et le gel d’Aloevera ont tous deux montré une propriété antifongique à des concentrations plus élevées (concentration de 100% et 50%, valeur P < 0,001).

Tableau 1 : Valeur moyenne de la zone d’inhibition de l’Aloevera et du Triphala à différentes concentrations Cliquez ici pour afficher

On a observé une différence hautement significative entre l’Aloevera à 100% et à 50% (P< 0,001, t = 19,17). Des résultats similaires ont été observés pour le Triphala 100% et 50% (P< 0,001, t = 31,58) . Lorsque l’ANOVA a été réalisée, le degré de liberté entre l’Aloevera et le Triphala était de 3 et au sein des groupes (100% v/s 50%) il était de 36 . Lors du test post hoc, la zone d’inhibition de Triphala à 100% a montré une valeur plus élevée que celle d’Aloevera à la même concentration (P = 0,004). Des résultats similaires ont été obtenus à la concentration de 50 % de Triphala et d’Aloevera (P = 0,000). A des concentrations plus faibles (25% et 12,5%), il n’y a pas eu d’effet contre Candida. La CMI du gel d’Aloevera et de Triphala contre C. albicans était de 25% et 12,5%, respectivement.

Tableau 2 : Test t de Student pour montrer la comparaison au sein du groupe Cliquez ici pour voir

Tableau 3 : Test ANOVA montrant le degré de liberté entre les groupes et au sein du groupe Cliquez ici pour afficher

Tableau 4 : Test post hoc (Tukey HSD) montrant la comparaison au sein des groupes Cliquez ici pour afficher

.

Discussion

L’émergence de bactéries et de champignons multirésistants (MDR) et le coût élevé des médicaments pharmaceutiques ont nécessité le développement de médicaments alternatifs à partir de sources naturelles et autres. Les plantes médicinales, qui sont utilisées depuis des temps anciens dans l’Ayurveda, pourraient être l’une de ces alternatives car elles sont bon marché, sûres et efficaces contre de nombreux microbes. De nombreux chercheurs ont vérifié l’effet antibactérien de l’Aloevera et du Triphala.,,, Très peu d’études ont été menées pour vérifier l’effet antifongique de ces plantes contre l’infection candidale orale.,,,,,, La présente étude a été menée pour déterminer les activités antifongiques et inhibitrices de diverses concentrations de gel d’Aloevera et de Triphala contre C. albicans. Dans la présente étude, le Triphala et l’Aloevera ont tous deux montré une propriété anticandidale à des concentrations de 100% et 50%. Aucun changement significatif n’a été observé à des concentrations plus faibles (25% et 12,5%).
Sheta et al. ont utilisé 0,5% de DMSO et de l’eau distillée comme solvant et ont mélangé Triphala (suspension) pour obtenir une concentration finale de 100 mg/ml. Ils ont constaté que la zone d’inhibition de Triphala contre Candida était de 12 mm lorsque l’eau était utilisée comme solvant et de 20 mm lorsque le DMSO était utilisé comme solvant. Les auteurs ont également vérifié les propriétés antifongiques du DMSO et ont constaté qu’il n’avait aucun effet antifongique. Ils n’ont pas fait bouillir la suspension aqueuse, ce qui pourrait être la cause de meilleurs résultats que notre étude. Randhawa a suggéré que le DMSO augmente la perméabilité des cellules en se liant à la membrane cellulaire, provoquant ainsi un effet synergique avec les médicaments anticandidaux. Dans le cas présenté, l’eau a été utilisée comme solvant pour Triphala. El-Mekkawey et al. ont découvert que T. chebula peut inhiber les espèces de Candida (y compris C. albicans résistant au clotrimazole). Malhotra et al. dans leur étude in vitro ont constaté que les unités formant des colonies (UFC) de C. albicans ont chuté à zéro après 10 min par l’utilisation d’un bain de bouche à 6% de Triphala.

Khaing a constaté que l’extrait éthanolique d’Aloevera n’a aucun effet anticandidien. Une étude similaire menée par Kaur et al. a montré que l’Aloevera était efficace contre C. albicans. Ils ont suggéré qu’un résultat positif dans leur étude pourrait être dû à un changement dans la procédure d’extraction du gel, c’est-à-dire qu’ils ont extrait le gel à température ambiante alors qu’une étude antérieure l’avait extrait à 90°C. Par conséquent, le composant actif pourrait avoir été éliminé. Par conséquent, le composant actif pourrait avoir été perdu dans l’extrait éthanolique si l’extraction a été faite à une température plus élevée.
Une étude de Stanley et al. a trouvé que la zone d’inhibition de l’Aloevera contre C. albicans était de 4 mm et que la CMI était de 50%, ce qui était similaire à la présente étude. Shireen et al. ont trouvé que la propriété antifongique de l’Aloevera est dépendante de la dose. Ils ont pris le jus d’Aloevera (1000, 500, 250, 100 μg) des feuilles fraîches et l’ont mélangé avec 10 ml d’éthanol. La zone d’inhibition était de 14 mm contre C. albicans à la concentration de 1000 μg, ce qui était comparable à l’amphotéricine B. Chainani et al. ont utilisé l’extrait éthanolique de Triphala et ont trouvé qu’il montrait un effet anticandidien à la concentration de 5% et plus. Triphala a montré de meilleurs résultats par rapport à l’Aloevera, avec une plus grande zone d’inhibition à la fois à la concentration de 100% et de 50%. De plus, Triphala inhibe la croissance de Candida à une concentration plus faible (12,5 %) par rapport à l’Aloevera (50 %).
L’effet antimicrobien de l’Aloevera est attribué au composant naturel appelé anthraquinones (émodine, acide aloétique, aloïne, anthracène, anthranol, barbaloin, acide chrysophanique, huile éthérée, ester de l’acide cinnamique, isobarbaloin, et resistannol).La protéine d’aloès purifiée de 14 kDa provenant du gel de la feuille d’Aloevera a montré une puissante activité antifongique contre C. albicans. L’effet antifongique de Triphala est dû à ses deux composants.
Nous avons constaté que Triphala et Aloevera ont montré une activité antifongique contre C. albicans. Cependant, le mécanisme d’action de ces agents à base de plantes sur les microbes n’est pas encore compris. En outre, d’autres études sont nécessaires sur diverses charges fongiques et diverses concentrations de Triphala et d’Aloevera pour vérifier leur puissance contre diverses espèces de Candida.

Conclusion

L’augmentation des pathogènes fongiques, les options thérapeutiques limitées, les effets secondaires des médicaments thérapeutiques et l’émergence des MDR constituent ensemble un fardeau pour les patients dont l’immunité est compromise. C. albicans est l’infection opportuniste la plus courante de la cavité buccale, fréquemment isolée à partir d’échantillons de tissus de patients atteints. La médecine traditionnelle utilise des produits végétaux depuis des siècles. En raison de leur facilité d’accès et de leur moindre toxicité, des efforts ont été faits pour développer des options thérapeutiques utilisant des molécules d’origine végétale. Cette étude est également un effort similaire pour vérifier les effets antifongiques de Triphala et Aloevera. Dans cette étude, Aloevera et Triphala ont été trouvés pour montrer une activité antifongique.

Limitations
La présente étude a été menée inin vitro et a impliqué un petit échantillon. À l’avenir, d’autres essais devraient être réalisés sur une plus grande population (in vivo) pour prouver l’efficacité antifongique de l’Aloevera et du Triphala contre C. albicans afin de caractériser le mécanisme d’action pour une traduction ultérieure en utilisation clinique et pour surmonter les défis de la thérapeutique fongique.
Soutien financier et parrainage
Nul.
Conflits d’intérêts
Il n’y a pas de conflits d’intérêts.

	Rathod M, Das N, Dhale D. Activité antifongique de deux plantes médicinales contre le champignon Candida albicans. Int J Pharma Bio Science 2015;6:701-6.
	Martins C, Silva D, Neres A, Magalha T, Watanabe G, Modolo L, et al. La curcumine comme un antifongique prometteur d’intérêt clinique. J Antimicrob Chemother 2009;63:337-9.
	Fani M, Kohanteb J. Activité inhibitrice du gel d’Aloe vera sur certaines bactéries cariogènes et parodontopathes isolées cliniquement. J Oral Sci 2012;54:15-21.
	Vogler BK, Ernst E. Aloe vera : Une revue systématique de son efficacité clinique. Br J Gen Pract 1994;9:823-8.
	Ahmad I, Mehmood Z, Mohammad F. Screening of some Indian medicinal plants for their antimicrobial properties. J Ethnopharmacol 1998;62:183-93.
	Wadhwan R, Sharma S, Solanki G, Solanki R. Rôle du triphala en dentisterie : A review. Int J Preclinical Pharmaceutical Res 2014;2:95-9.
	Kammoun M, Miladi S, Ali YB, Damak M, Gargouri Y, Bezzine S.Étude in vitro de l’inhibition de PLA2 et des activités antioxydantes des extraits de peau de feuilles d’Aloe vera. Lipids Health Dis 2011;10:30.
	Shetty PJ, Hegde V, Gomes L. Efficacité anticandidale d’un comprimé de nettoyage de prothèse dentaire, de Triphala, d’Aloe vera et de feuilles de cajou sur des prothèses complètes de personnes âgées institutionnalisées. J Ayurveda Integr Med 2014;5:11-4.
	Randhawa MA, Aljabre SHM. Le diméthyl sulfoxyde (DMSO) a un effet additif et modifie les concentrations minimales inhibitrices des médicaments antifongiques. J Rawalpindi Med College 2007;11:54-60.
	Harringtom A, McCourtney K, Nowowiejski D, Limaye A. Differentiation of Candida albicans yeast directly from blood cultures by gram stain morphology. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2007;26:325-9.
	El-Mekkawey M, Merelhy M. Effets inhibiteurs de la médecine populaire égyptienne sur la transcriptase inverse du virus de l’immunodéficience humaine (VIH). Chem Pharm Bull 1995;43:641-8.
	Sheta MM, Kikani KM, Kavithia P, Thakkar J, Rangnani T. Étude de l’activité antimicrobienne de Triphala et de ses composants individuels. Int J Herb Med 2016;4:41-3.
	Malhotra A, Malhotra I, Solanki R, Khangwal M, Kumar D. Évaluation des propriétés antibactériennes et antifongiques des bains de bouche à base de plantes- Une étude prospective. Int J Enhanced Res Med Dent Care 2015;2:33-7.
	Khaing TA. Évaluation des activités antifongiques et antioxydantes de l’extrait de feuilles d’Aloe vera (Aloe barbadensis Miller). World Acad Sci Engineer Tech 2011;5:3-23.
	Kaur H, Goyal RR, Bhattacharya A, Gupta R, Lal NK, Arora B, et al. Activité antifongique des phyto-extraits de Piper Longum, Aloevera, et Withania somnifera contre l’agent pathogène fongique opportuniste humain Candida albicans. DU J Undergrad Res Innov 2015;1:107-15.
	Stanley MC, Ifeanyi OE, Eziokwu OG. Effets antimicribiens de l’Aloevera sur certains agents pathogènes humains. Int J Curr Microbiol App Sci 2014;3:1022-8.
	Shireen F, Manipal S, Prabhu D. Activité antifongique de l’aloevera:étude in vitro. SRM J Res Dent Sci 2015;6:92-5.
	Chainani S, Siddana S, Reddy CV, Thippeswamy M, Maurya M, Rudraswami S. Activité antimicrobienne de Triphala sur les Lactobacilles et les candida albicans : Une étude in vitro. J Orofac Sci 2015;7:104-7.
	Pandey R, Mishra A. Activités antibactériennes de l’extrait brut d’Aloe barbedensis aux pathogènes bactériens isolés cliniquement. Appl Biochem Biotechnol 2010;160:1356-61.

Figures

, , , ,
.