Les vecteurs rétroviraux amphotropes et VSV-G-pseudotypés transduisent les cellules progénitrices hématopoïétiques humaines avec une efficacité similaire

Une restriction du transfert de gènes rétroviral dans les cellules souches hématopoïétiques est le faible niveau de récepteur du virus amphotrope. Dans la présente étude, nous avons examiné si les vecteurs rétroviraux pseudotypés avec la protéine G du virus de la stomatite vésiculaire (VSV) peuvent surmonter cette restriction. Des cellules progénitrices humaines purifiées par billes magnétiques et tri cellulaire ont été transduites avec un vecteur rétroviral amphotrope ou pseudotypé par le VSV-G contenant le récepteur tronqué du facteur de croissance des nerfs humains comme gène marqueur. Les cellules ont été préstimulées avec du ligand flt-3, du facteur de cellules souches et de l’interleukine-3 et transduites sur de la fibronectine. L’expression du gène marqueur a été analysée par cytométrie de flux. Les efficacités de transduction du virus amphotrope et du virus pseudo-type VSV-G pour les cellules CD34+ n’étaient pas significativement différentes. Le transfert de gènes dans les cellules CD34+CD38-, qui sont enrichies en progéniteurs plus immatures, n’était pas limité et les efficacités de transfert pour ce sous-ensemble étaient également similaires pour les deux pseudotypes. L’ajout de fibronectine a considérablement amélioré le transfert de gènes avec le vecteur amphotrope (5 à 19,3 fois, moyenne 12,6), alors que l’effet sur le pseudotype VSV-G était beaucoup moins prononcé (1 à 3,9 fois, moyenne 2,1, P = 0,04). En conclusion, des niveaux élevés de transfert de gènes aux progéniteurs hématopoïétiques humains ont été atteints avec un protocole de transduction optimisé, et les efficacités de transduction n’ont pas pu être améliorées davantage par l’utilisation des pseudotypes VSV-G. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.