Validation d’un test ADCC utilisant des cellules tueuses naturelles primaires humaines pour évaluer les produits biothérapeutiques portant une région Fc

Le développement de produits biothérapeutiques nécessite une amélioration continue des méthodologies analytiques pour l’évaluation de leurs attributs de qualité. Un sous-ensemble de produits biothérapeutiques est conçu pour interagir avec des antigènes spécifiques qui sont exposés sur les membranes des cellules cibles ou qui circulent sous une forme soluble, et les fonctions effectrices sont réalisées via la reconnaissance de leur région Fc par des cellules effectrices qui induisent des mécanismes tels que la cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps (ADCC). Ainsi, l’induction de l’ADCC est un attribut de qualité critique (AQC) qui doit être évalué pour garantir l’efficacité biothérapeutique. L’induction de l’ADCC peut être évaluée en utilisant des cellules effectrices de différentes sources, telles que les cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) et les lignées cellulaires génétiquement modifiées (par exemple, les cellules NK transfectées ou les cellules Jurkat), et différentes approches peuvent être utilisées pour la détection et l’interprétation des résultats selon le type de cellules effectrices utilisées. À cet égard, la validation des tests est pertinente pour assurer la fiabilité des résultats en fonction de l’objectif visé. Dans cet article, nous montrons la normalisation et la validation des tests ADCC pour tester la puissance de trois protéines biothérapeutiques en utilisant des cellules NK primaires obtenues à partir de sang frais comme cellules effectrices et en détectant la mort cellulaire par cytométrie de flux. L’avantage d’utiliser des cellules NK primaires au lieu de cellules modifiées est que la réponse est plus proche de celle qui se produit in vivo puisque la cytotoxicité est évaluée de manière directe. Nos résultats indiquent que dans tous les cas, les tests ont présenté une courbe dose/réponse sigmoïdale caractéristique, conforme à des paramètres exacts, précis et spécifiques. Ainsi, le test ADCC validé est une alternative appropriée pour évaluer les activités biologiques de ce type de biothérapies.