A hagyományos kínai gyógyászat Xinkeshu antiatherogén és antiischaemiás tulajdonságai az endothel védő funkcióján keresztül
- Abstract
- 1. Bevezetés
- 2. Anyagok és módszerek
- 2.1. Az XXKS-tabletta hatása a koszorúerekre. Gyógyszerek és reagensek
- 2.2. Állatok és kísérlettervezés
- 2.3. Plazma-lipoprotein analízis
- 2.4. A plazma lipoprotein szintje. EKG-vizsgálat a VP által kiváltott myocardialis ischaemiás modellen
- 2.5. Az EDVR értékelése
- 2,6. Hisztomorfológiai vizsgálatok
- 2,7. Az eNOS és a VCAM-1 immunhisztokémiai vizsgálata a koszorúéren
- 2,8. Statisztikai elemzés
- 3. Eredmények
- 3.1. Eredmények 3. Plazma-lipoprotein analízis
- 3.2. táblázat. EKG-vizsgálat a VP által kiváltott myocardialis ischaemiás modellben
- 3.3. ábra. Az EDVR értékelése
- 3.4. ábra. Hisztomorfológiai vizsgálatok
- 3.5. Az eNOS és a VCAM-1 immunhisztokémiai vizsgálata a koszorúéren
- 4. Megbeszélés
- 5. Következtetés
- Köszönet
Abstract
A gyógynövénygyógyászatot is beleértve, a kiegészítő és alternatív gyógyászat (CAM) világszerte népszerű. A hagyományos kínai gyógyszert, a xinkeshut Kínában széles körben használják a szívkoszorúér-betegség kezelésére. Ezt a tanulmányt a xinkeshu tabletta védőhatásának és valószínűsíthető mechanizmusának vizsgálatára tervezték az ateroszklerotikus myocardialis ischaemiás nyúlra. A nyulakat négy csoportra osztották ( egyenként), és 12 héten keresztül különböző étrenddel etették őket: (standard étrend), modell (magas koleszterinszintű étrend), XKS (magas koleszterinszintű étrend 184,8 mg/kg/d xinkeshu-val) és atorvasztatin (magas koleszterinszintű étrend 5,0 mg/kg/d atorvasztatinnal). Értékelték a plazma lipoproteinszintjét, az EKG-t, az endotél-függő érrelaxációt, a szövettani vizsgálatot, valamint az eNOS és a VCAM-1 expresszióját a koszorúereken. Az eredmények azt mutatták, hogy az atorvasztatinhoz hasonlóan a xinkeshu jelentős hatást fejtett ki az endoteliumfüggő érrelaxáció megmentésére, az ateroszklerotikus progresszió gátlására, a myocardialis ischaemia megelőzésére, valamint az eNOS és VCAM-1 expressziójának megváltoztatására. A xinkeshu azonban nem mutatott lipoproteincsökkentő hatást a hiperkoleszterinémiás nyulakban. A jelen vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a xinkeshu erős antiatherogén és anti-ischaemiás tulajdonságokat fejtett ki az ateroszklerotikus myocardialis ischaemiás nyúlon. Az antihiperlipidémiás hatáson kívül endotélvédő hatás is szerepet játszhat a mechanizmusban.
1. Bevezetés
A koszorúér-betegséget (CHD) elsősorban az ateroszklerózis okozza, és a magas koleszterinszint fontos szerepet játszik a betegség kialakulásában . Úgy tűnik, hogy az ateroszklerózis okai a lipidek visszatartása, oxidációja és módosulása, amelyek krónikus gyulladást idéznek elő az összes nagy vezetékes artéria falának fogékony helyein . Bár sok előrelépés történt a CHD okozta halálozás csökkentése terén, ez a betegség továbbra is a vezető halálozási ok az egész világon . A sztatinok a leghatásosabb gyógyszerek ezen a területen. A vizsgálatok kimutatták, hogy a sztatinok nemcsak az alacsony sűrűségű lipoproteint (LDL) csökkenthetik, hanem a nagy sűrűségű lipoproteint (HDL) is növelhetik és fokozhatják az érrendszeri endothelfunkciót . A sztatinok mellékhatásaként jelentkező májműködési zavarok és myolízis azonban néhány beteget a kezelés elhagyására késztetett . A kiegészítő és alternatív gyógyászat (CAM), beleértve a gyógynövényes gyógymódokat is, világszerte népszerű a lakosság körében . Számos erős terápiás hatású gyógynövényt vagy növényt vizsgáltak antihiperlipidémiás, antioxidáns és antiatheroszklerotikus tulajdonságaik miatt . A gyógynövényterápia alkalmazása a különböző rendellenességek, köztük a szívbetegségek kezelésére hosszú és kiterjedt múltra tekint vissza.
Kínában az alacsony mellékhatásokkal rendelkező hagyományos kínai gyógynövénykészítmények nagy érdeklődésre tartanak számot, mint a CHD CAM terápiája . A hagyományos kínai gyógyászat (TCM) xinkeshu (XKS) tabletta formájában a TCM meridiánelméletének megfelelően megfogalmazott összetett recept, amelyet 2005-ben a Kínai Állami Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatal jóváhagyott a klinikán angina pectoris és aritmia betegek kezelésére. Itt tovább vizsgáltuk az XKS tablettával történő kezelés mechanizmusát ateroszklerotikus nyulaknál. Az eredmények a következőkben foglalhatók össze: vérplazma lipoproteinszint; EKG-vizsgálat, a szívizom iszkémia súlyosságának mutatója ; endotél-függő érrelaxáció (EDVR); szövettani vizsgálatok; az endoteliális nitrogén-oxid-szintáz (eNOS) és a vaszkuláris sejtadhéziós molekula 1 (VCAM-1) expressziója a koszorúereken, az endotélfunkció markerei .
2. Anyagok és módszerek
2.1. Az XXKS-tabletta hatása a koszorúerekre. Gyógyszerek és reagensek
XKS tabletták a Wo Hua Pharmaceutical Co, CHN-től származnak. A koleszterin a Tian Qi Chemical Engineering Co, CHN-tól származott. Az atorvastatin a Jia Lin Pharmaceutical Co, CHN-tól származott. A vazopresszin (VP), fenilefrin (PE) és acetilkolin (Ach) a Sigmától (USA) származott. A poliklonális immunhisztokémiai kecske anti-nyúl eNOS és VCAM-1 antitestek a Santa Cruz-tól, USA. A sztreptavidin/peroxidáz kit és a biotinilált egér anti-kecske IgG a Boster, Kínából származott.
2.2. Állatok és kísérlettervezés
Japán nagyfülű nyulakat ( kg, 3 hetes, hím) vásároltunk a Kínai Orvosi Tudományos Akadémia Laboratóriumi Állatok Intézetétől. Egyszemélyes elhelyezésben, 12 : 12 órás fény-sötét ciklusban, hőmérséklet- (°C) és páratartalom () szabályozott, specifikus kórokozómentes környezetben, ad libitum rendelkezésre álló vízzel tartották őket. Minden állatgondozási és kísérleti protokoll megfelelt a Kínai Egészségügyi Minisztérium Állatkezelési Szabályzatának, és a vizsgálatot a Kínai Orvosi Tudományos Akadémia állatetikai bizottsága jóváhagyta. A nyulaknak szánt, 2% koleszterintartalmú (240-280 g/nap) standard diétás pelleteket és magas koleszterinészter tartalmú (H-ChE) diétás pelleteket a Beijing Scientific Animal Feedstuff Company állította elő.
A nyulakat 4 csoportra osztottuk ( csoportonként), a kísérleti tervet az 1. ábra mutatja be.
A kísérleti terv. H-ChE, 2%-os koleszterinészter; XKS, Xinkeshu; VP, vazopresszin; EKG, elektrokardiogram; EDVR, endotélfüggő érrelaxáció; eNOS, endoteliális nitrogén-oxid-szintáz; VCAM-1, érsejt-adhéziós molekula 1.
Kontroll
A nyulakat 12 héten keresztül folyamatosan a standard pellettel etették. A nyulak intragasztrikusan normál sóoldatot (10 ml/kg/d) kaptak.
Modell
A nyulakat folyamatosan H-ChE diétás pellettel etették. A többi azonos volt a kontrollal.
XKS
A nyulaknak normál sóoldatban (10 ml/kg/d) 184,8 mg/kg/d XKS-t adtak intragasztrikusan (60 kg átlagsúlyú felnőttnek megfelelő dózis). A többi azonos volt a modellel.
Atorvastatin
A nyulaknak intragasztrikusan 5,0 mg/kg/d atorvastatint adtak normál sóoldatban (10 ml/kg/d). A többiek ugyanazok voltak, mint a modellben.
2.3. Plazma-lipoprotein analízis
A 12 hetes kísérletek előtt és után heparinban vénás vénából vettünk éhomi vénás vérmintákat. A plazmát elválasztottuk és -20°C-on tároltuk. A plazma lipoprotein szintjét, beleértve az összkoleszterint (TC), a triglicerideket (TG), az LDL-t és a HDL-t, automatikus biokémiai analizátorral (Dimension AR, DuPont, USA) mértük.
2.4. A plazma lipoprotein szintje. EKG-vizsgálat a VP által kiváltott myocardialis ischaemiás modellen
A 12 hetes kísérleti időszak végén, Serradeil-Le Gal és munkatársai módszere szerint, VP-vel kísérleti koszorúér-vazospasztikus myocardialis ischaemiát idéztünk elő. A VP (2,0 NE/kg, iv.) beadása előtt és után 25 perccel folyamatosan rögzítettük az EKG standard végtag II. elvezetését egy Powerlab 30 rendszerrel (AD Instruments, Castle Hill, Ausztrália).
2.5. Az EDVR értékelése
Egy héttel az EKG-vizsgálatok befejezése után a nyulakat ( csoportonként) 10%-os klorálhidráttal (25 mg/kg, ip) altatták. Lee et al. módszere szerint a friss szíveket azonnal kinyertük és hideg PBS-ben tároltuk. Ezután a hasi aortákat felboncolták és 3 mm-es gyűrűkre vágták. A gyűrűket 1,5 g feszültségre feszítettük, és 60 percig hagytuk, hogy egyensúlyba kerüljenek egy 10 ml-es szövetfürdőben (38,6 °C), amely Krebs-Henseleit-oldatot (összetétel mM-ben: 115 NaCl, 25 NaHCO3, 1,38 NaH2PO4, 2,51 KCl, 2,46 MgSO4, 1,91 CaCl2 és 5,56 dextróz) tartalmazott, és 95% O2 és 5% CO2 keverékével levegőztettük. Az erőkifejtést a Powerlab 30 rendszerhez csatlakoztatott izometrikus transzducer segítségével követtük nyomon. Az egyensúlyozás után 10-6 M PE-vel vazokonstrikciót indukáltunk. Miután a maximális összehúzódás elérte a platót, az EDVR-t a 10-9 és 10-4 M Ach közötti válaszként határoztuk meg. A százalékos relaxációt a PE által indukált maximális prekontrakciós értékhez viszonyított feszültségváltozások alapján számoltuk ki.
2,6. Hisztomorfológiai vizsgálatok
A többi nyulat ( csoportonként) 10%-os klorálhidráttal (25 mg/kg, ip) altattuk. Perfúziós rögzítést végeztünk minden nyúlnál a bal közös nyaki verőéren keresztül heparinizált normál sóoldattal (70 ml/kg) és 4%-os paraformaldehiddel (140 ml/kg) 0,1 M foszfát pufferben, aorta katéter segítségével (kb. 100 mmHg nyomáson), eközben a külső nyaki vénát átvágtuk a visszamaradt vér eltávolítása érdekében. Két órával később 4,0 °C-on a szíveket és az aortákat eltávolítottuk, és egy éjszakán át 10%-os pufferelt formalinba merítettük.
Az aortákat a hátsó oldal mentén hosszanti irányban felnyitottuk, majd az ateroszklerotikus plakkok láthatóvá tételéhez Sudan IV-vel festettük. A festés után az aortákat felnyitották, hogy ellapítsák őket, és lefényképezték. Az aorta teljes területét () és a plakkok területét () morfometrikusan elemeztük az Image-Pro Plus 7.0 morfometriai elemző rendszer (Media Cybernetics, USA) segítségével. Az ateroszklerotikus plakkok arányát a következőképpen számoltuk ki: .
A bal oldali circumflex koszorúeret (2 cm hosszú) a szomszédos szívizomszövetekkel együtt gondosan elvágtuk. A mintákat paraffinba ágyaztuk és mikrotómán 5 μm-es metszetekre vágtuk, majd a keresztmetszeteket hematoxilinnal és eozinnal (HE) festettük, és a NanoZoomer digitális patológiai képelemző rendszer (Hamamatus, Olympus, JAP) segítségével szkenneltük. A lumen területét () és a belső elasztikus lamina () által határolt területet morfometrikusan elemeztük az Image-Pro Plus 7.0 elemzőrendszer segítségével ×200-as nagyításban. A koszorúér-szűkület arányát a következőképpen számították ki: .
2,7. Az eNOS és a VCAM-1 immunhisztokémiai vizsgálata a koszorúéren
az eNOS és a VCAM-1 expresszióját immunhisztokémiai úton értékeltük a koszorúéren a gyártó utasításainak megfelelően sztreptavidin/peroxidáz kit segítségével. A metszeteket deparaffinizáltuk, rehidratáltuk, majd 3 percig 95°C-on antigén-visszanyerő pufferben (0,01 M Tris-bázis, 1,0 M EDTA, 0,05% Tween 20, pH 6,0) áztattuk. Az endogén peroxidáz aktivitást a metszetek 3%-os hidrogén-peroxid vizes oldatban történő 1 órás, szobahőmérsékleten történő inkubálásával blokkoltuk. A metszeteket háromszor öblítettük PBS-szel, majd 100 μL kecske anti-nyúl eNOS vagy VCAM-1 ellenanyaggal inkubáltuk. A metszeteket PBS-szel öblítettük, majd 100 μL biotinilált egér anti-kecske IgG-vel inkubáltuk (1 : 100 hígításban PBS-ben). A fehérjéket diaminobenzidin szubsztrátoldattal vizualizáltuk. A negatív kontrollokban az elsődleges antitestet PBS-szel helyettesítettük. Az eNOS vagy VCAM-1-festődést () és a megfigyelt területet () morfometrikusan elemeztük az Image-Pro Plus 7.0 elemzőrendszerrel ×400-as nagyítással. Az összes létező eNOS vagy VCAM-1 félkvantitatív módon a következőképpen lett kiszámítva: .
2,8. Statisztikai elemzés
A statisztikai elemzésekhez az SPSS, v13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) programot használtuk. A mennyiségi változókat átlag ± SEM-ben fejeztük ki. A folytonos változók több csoport közötti összehasonlítását ANOVA-val végzett varianciaanalízissel végeztük, a post hoc összehasonlításokat pedig LSD-teszttel végeztük.
3. Eredmények
3.1. Eredmények
3. Plazma-lipoprotein analízis
A 12 hetes kísérlet előtt a plazma-lipoproteinszintek (TC, TG, LDL és HDL) kiindulási értékei nem különböztek jelentősen a négy csoport között. A 12 hetes kísérlet után a modellcsoportba tartozó nyulaknál a TC (), LDL (), TG () szintje szignifikánsan emelkedett, a HDL () szintje pedig szignifikánsan csökkent a kontrollhoz képest. Az atorvasztatinkezelés 12 héten keresztül szignifikánsan csökkentette a TC (), LDL () és TG () szintjét, és szignifikánsan növelte a HDL () szintjét a Modell csoporthoz képest. Az XKS-kezelés azonban enyhe csökkenést () mutatott a TC, TG, LDL szintjében és enyhe növekedést () a HDL szintjében a Modellhez képest (1. táblázat).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Az adatok átlag ± SEM-ben vannak kifejezve, , a aa versus kontroll; b bb versus modell; cc cc versus XKS. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.2. táblázat. EKG-vizsgálat a VP által kiváltott myocardialis ischaemiás modellben
A VP (iv.) beadása tudatos nyulakba minden csoportban átmeneti ST-szakasz emelkedést idézett elő az EKG-ban. A maximális ST szegmensemelkedés 5-10 perccel a VP beadása után volt megfigyelhető a Kontrollban. A modellcsoportba tartozó nyulak szignifikánsan nagyobb () ST szegmensemelkedést mutattak, mint a Kontroll. Az XKS kezelés szignifikáns () anti-ischaemiás hatást mutatott (a VP által kiváltott ST szegmensemelkedés gátlása), mint a Modell. Az atorvasztatin szintén szignifikáns () anti-iszkémiás hatást mutatott; azonban az XKS hatékonyabb () volt, mint az atorvasztatin (2. táblázat és 2. ábra).
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Az adatok átlag ± SEM-ben vannak kifejezve, , a a aa versus kontroll; b bb versus modell; c versus XKS. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Max ST szegmensemelkedés az EKG-n a vazopresszin adagolása után.
Tranziens szívfrekvencia (HR) csökkenés következett be VP adagolása után minden csoportban. A hatás 10-15 perc után tetőzött a Kontrollban. A modellcsoportba tartozó nyulaknál a kontrollhoz képest szembetűnőbb HR-csökkenés () volt tapasztalható. Az XKS-kezelés jelentős () gátlást mutatott a HR-csökkenésre a Modell csoporthoz képest. Az atorvasztatinkezeléssel azonban nem volt szignifikáns gátló hatás () a Modellhez képest (3. ábra).
Szívfrekvencia görbék vasopresszin beadást követően.
3.3. ábra. Az EDVR értékelése
Ach (10-9-10-4 M) koncentrációfüggő relaxációt okozott a prekonstrikált hasi aorta gyűrűkben. A maximális EDVR szignifikánsan csökkent () a modellcsoportba tartozó nyulakban a kontrollhoz képest. Az XKS és az atorvasztatin kezelés szignifikánsan () mérsékelte a károsodást a Modellhez képest. Az Atorvastatin hatékonyabb volt (), mint az XKS (4. ábra).
A hasi aorta gyűrűk endotheliafüggő érrelaxációs görbéi.
3.4. ábra. Hisztomorfológiai vizsgálatok
A kontrollcsoportba tartozó nyulak egyike sem mutatott kóros szövettani elváltozást az aortában. Az aorta intimális felszínén jellegzetes makroszkópos ateroszklerotikus plakkok jól kivehetően és gyakran láthatók a Modell nyulakban. Az ateroszklerotikus plakkok a Sudan IV festéssel vörös színűvé váltak. Az XKS és az atorvasztatin kezelés jelentősen () csökkentette az ateroszklerotikus plakkok területét a Modellhez képest. A hatás hasonló () volt a két csoport között (5. ábra).
(a)
(b)
(a)
(b)
Atheroszklerotikus plakkok az aorta intimális felszínén Sudan IV festéssel.
A kontrollcsoportba tartozó nyulaknál nem mutatkoztak ateroszklerotikus elváltozások egyik artériafalon sem. A modellnyulakban azonban néhány intramyocardialis kis arteriola jelentős ateroszklerotikus elváltozásokat mutatott, többek között azt, hogy a simaizomsejtek körüli bazális lamellák szabálytalanul megvastagodtak és multilamináltak voltak. A kollagénfibrillumok jelentősen megnövekedtek a médiumban, és nagyszámú lipid szivárgott be a megvastagodott intimába. A koszorúér lumenekben szűkület alakult ki, amelyet lipidlerakódás kísért, amely habsejteket tartalmazott. A modellcsoportba tartozó nyulak jelentős () koszorúér-szűkületet mutattak, mint a kontrollcsoport. Az XKS és az atorvasztatin kezelés szignifikánsan () gátolta a koszorúér-szűkületet a Modellhez képest. A hatás hasonló () volt a két csoport között (6. ábra).
Koronária-szűkület HE-festéssel (fénymikroszkópos felvételek, középső 100×, bal felső 400×).
3.5. Az eNOS és a VCAM-1 immunhisztokémiai vizsgálata a koszorúéren
A kontrollcsoportban az eNOS pozitív festődés a koszorúér intimális rétegének területén a citoplazmában volt megfigyelhető. Az eNOS megléte szignifikánsan csökkent () a Modell csoportban a Kontrollhoz képest. Az XKS és az atorvasztatin kezelés szignifikánsan () növelte a meglévő eNOS-t a Modell csoporthoz képest. Az Atorvastatin hatékonyabb volt (), mint az XKS (7. ábra).
ENOS és VCAM-1 létezése a koszorúéren immunhisztokémiai festéssel (fénymikroszkópos felvételek, 400×).
A kontrollcsoportban a VCAM-1 pozitív festődés ritkán volt megfigyelhető a koszorúér teljes falán. A Modell csoportban azonban nagymértékben megfigyelhető volt az érfal kollagénfibrillumokban és habsejtekben gazdag területén, és a VCAM-1 megléte szignifikánsan () megnövekedett a Kontrollhoz képest. Az XKS és az atorvasztatin kezelés szignifikánsan () csökkentette a VCAM-1 jelenlétét a Modell csoporthoz képest. Az XKS hatékonyabb volt (), mint az Atorvastatin (7. ábra).
4. Megbeszélés
A CCAM, beleértve a növényi gyógyszereket is, az elmúlt 20 évben világszerte népszerűvé vált. Azt állítják, hogy a krónikus betegségben szenvedő betegek, beleértve a szív- és érrendszeri betegségeket is, valószínűleg használják a CAM . A gyógynövénygyógyászat a gyógynövények vagy gyógynövények felhasználásával végzett módszer a betegségek megelőzésére és kezelésére, és minden országban a hagyományos és népszerű gyógyszerektől a standardizált és titrált gyógynövénykivonatok használatáig terjed.
Az XKS tablettát széles körben használták a CHD kezelésére a hagyományos orvosok Kínában tíz év alatt . A klinikai kutatások kimutatták, hogy az XKS számos biológiai aktivitást hordoz, beleértve a szívfrekvencia-variabilitás javítását, az angina pectoris epizódjának csökkentését, az artériák rugalmasságának javítását . Eközben a farmakológiai alapkutatás feltárta, hogy az XKS beadása számos terápiás hatással rendelkezik, mint például a szívizom oxigénfogyasztásának csökkentése, a lipidek csökkentése és az antiapoptózis .
A jelen vizsgálatban az atorvasztatint választották pozitív kontrollterápiának. Az eredmények azt mutatták, hogy az atorvastatinkezelés 12 héten keresztül nagyon hatékony volt a plazma TC- és LDL-szintjének csökkentésében, a HDL-szint növelésében, a kísérleti myocardialis ischaemia mérséklésében, az EDVR megmentésében és az ateroszklerotikus progresszió gátlásában. A 12 hetes XKS-kezelés hasonló hatást gyakorolt az EDVR megmentésére és az ateroszklerotikus progresszió gátlására, mint az atorvastatin. Az XKS még a myocardialis ischaemia megelőzésében és a szívritmus fenntartásában is hatékonyabb volt, mint az atorvastatin. Talán ezek a tulajdonságok voltak az XKS fő mechanizmusai a klinikai angina pectoris és az aritmia terápiájában . Másrészt a jelen vizsgálat egyik fontos megállapítása az volt, hogy az XKS-szel kezelt nyulakban nem következett be jelentős változás a lipidprofilokban. Más szóval, az XKS nem mutatott lipoproteincsökkentő hatást a H-ChE diéta által kiváltott hiperkoleszterinémiára.
Tudott, hogy az endotélkárosodás kulcsfontosságú esemény az ateroszklerózis patogenezisében. Az ateroszklerózis kiváltható az endotélbélés egyszerű diszfunkciójából, ahogyan az a hiperkoleszterinémia esetén előfordul . Az endotélsejtek homeosztázisát nagyrészt a nitrogén-oxid (NO) szintézise tartja fenn, amely az eNOS által szintetizált erős értágító. Az NO fontos funkciókat tölt be, beleértve az érrendszeri tónus és a regionális véráramlás szabályozását, valamint az érrendszeri simaizomsejtek proliferációjának elnyomását. Az eNOS-t különböző ingerek befolyásolják, beleértve a hipoxiát, a nyírási stresszt, az LDL-t, valamint az ateroszklerózis kialakulását és progresszióját . Az eNOS csökkenő expresszióját vagy inaktiválódását az endotheldiszfunkció kialakulásának döntő tényezőjeként ismerik el . Felfedezték a vaszkuláris adhéziós molekulák fontos szerepét az ateroszklerózisban, és ezek a molekulák fontos szerepet játszanak a keringő leukociták endotélhez való tapadásában, ami az ateroszklerózis beindulásának első lépése . Transzmembrán glikoproteinként a VCAM-1 az ateroszklerózisra hajlamos helyeken már a makroszkópos betegség megjelenése előtt felszabályozódik és kifejeződik, és tartósan kifejeződik az előrehaladottabb ateroszklerotikus elváltozásokban. Az aterogén diéta gyorsan indukálhatja a VCAM-1 expresszióját az aorta endotheliumában aorta szervkultúrákban .
A nem antihiperlipidémiás útvonalon keresztüli antiatherogén és antiischaemiás új tulajdonsága szerint az XKS valóban mechanizmusának vizsgálatához az endotélvédelemre, mint célpontra összpontosítottunk. eNOS és VCAM-1-et választottuk antiatherogén és atherogén tényezőként. Az eredmények azt mutatták, hogy a 12 hetes H-ChE diéta az eNOS expressziójának csökkenését, valamint a VCAM-1 expressziójának növekedését okozta az ateroszklerózis folyamata során. Az atorvasztatin és az XKS kezelés egyaránt érvédő tulajdonságot mutatott az eNOS és a VCAM-1 expressziójának megváltoztatásával. Ezért az érrendszer jelentős endotélvédelme valószínűleg az XKS kardioprotektív tulajdonságaiban szerepet játszó egyik fontos mechanizmus volt.
Az XKS 5 gyógynövénykomponenst tartalmaz, ezek a Salvia miltiorrhiza Bunge, a Panax notoginseng (PN), a Fructus Crataegi, a Radix Puerariae és a Radix Aucklandiae (3. táblázat). Az anyagokat eredetileg mikronizálóval finom porrá őrölték és tablettaként állították elő, amelyeket a Kínai Gyógyszerkönyv 2010-ben szereplő marker vegyületek alapján hitelesítettek és standardizáltak. Minden egyes komponensből több, különleges biológiai aktivitással rendelkező monomercsoportot vontak ki, például a PN-kivonat tüdőfibrózisának enyhítését, a galagonyakivonat plazma-koleszterinszintjének csökkentését, a Puerarin-kivonat inzulinrezisztenciájának javítását és a radix Aucklandiae kivonat idiopátiás ödémájának enyhítését. A TCM elmélete szerint a Salvia miltiorrhiza Bunge egyfajta “fő drogként”, a Panax notoginseng “miniszteri drogként”, a másik 3 komponens pedig “kiegészítő drogként” szolgált az XKS összetevői között. A Tanshinone IIA a Salvia miltiorrhiza Bunge kivonat egyik legfontosabb monomer összetevője volt. A Tanshinone IIA biológiai aktivitásai a szívizom oxigénfogyasztásának csökkentéséről , a koszorúerek tágításáról és az idegsejtek regenerációjának javításáról, a magas vérnyomásról és az antioxidánsról szóltak.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||
A jelen vizsgálatban az XKS-t egyetlen “gyógyszerként” tekintettük, és az összes komponens farmakológiai hatását együttesen vizsgáltuk. Bár a jelen vizsgálat eredményei lendületet adtak az XKS terápiás hatásának további vizsgálataihoz, az összetevők és kölcsönhatásaik kapcsolata még tisztázásra vár. Ezek voltak a jelen tanulmány fő korlátai. Ezért az XKS részletes molekuláris mechanizmusát és a hatóanyagok és metabolitok farmakológiai hatásának további, állatokon végzett vizsgálatát meg kell vizsgálni.
5. Következtetés
Végeredményben kifejezetten kimutatták, hogy a TCM XKS erős antiatherogén és anti-ischaemiás tulajdonságokat fejtett ki az ateroszklerotikus myocardialis ischaemiás nyúl modellben. A mechanizmusban az antihiperlipidémiás hatáson kívül endotélvédő hatás is szerepet játszhat. Úgy véltük, hogy az XKS endotélvédő mechanizmusainak és a hatóanyagok kölcsönhatásainak jobb megértése új farmakológiai CAM beavatkozásokhoz vezethet a CHD betegek számára.
Köszönet
Ezt a tanulmányt a kínai Major State Basic Research Development Program (G2000056905), a National Natural Science Foundation (No. 81073021) és az Education Ministry Science Foundation (108019) támogatta. Xu Tao és Peng Jing-bo egyformán hozzájárult ehhez a munkához.