Az amfotróp és VSV-G-pszeudotípusú retrovírus vektorok hasonló hatékonysággal transzdukálják a humán hematopoetikus progenitor sejteket

A retrovírus génátvitel egyik korlátja a hematopoetikus őssejtekbe az amfotróp vírusreceptor alacsony szintje. Jelen tanulmányban azt vizsgáltuk, hogy a vesicularis stomatitis vírus (VSV) G-proteinjével pszeudotipizált retrovírus vektorok képesek-e legyőzni ezt a korlátozást. A mágneses gyöngyökkel és sejtválogatással tisztított humán progenitor sejteket amfotróp vagy VSV-G pszeudotipizált retrovírus vektorral transzdukáltuk, amely markergénként a csonka humán idegnövekedési faktor receptort tartalmazta. A sejteket flt-3 liganddal, őssejtfaktorral és interleukin-3-mal előstimuláltuk és fibronectinre transzdukáltuk. A markergén expresszióját áramlási citometriával elemeztük. Az amfotróp és a VSV-G-pszeudotípusú vírus transzdukciós hatékonysága a CD34+ sejtek esetében nem különbözött jelentősen. A CD34+CD38- sejtekbe történő géntranszfer, amelyek az éretlenebb progenitorokban gazdagodtak, nem volt korlátozott, és a transzfer hatékonysága erre az alcsoportra szintén hasonló volt mindkét pszeudotípus esetében. A fibronectin hozzáadása jelentősen javította a géntranszfert az amfotróp vektorral (5- 19,3-szoros, átlag 12,6), míg a VSV-G-pszeudotípusra gyakorolt hatás sokkal kevésbé volt kifejezett (1- 3,9-szeres, átlag 2,1, P = 0,04). Összefoglalva, egy optimalizált transzdukciós protokollal magas szintű géntranszfert sikerült elérni a humán vérképzőszervi progenitorokba, és a VSV-G-pszeudotípusok használatával a transzdukciós hatékonyságot nem lehetett tovább javítani. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.