Az Anoplocephala perfoliata által okozott kóros elváltozások a ló ileocecális átmenetében

Harmincegy, 15 hónapos és 13 éves kor közötti, rendszeresen vágóhídra kerülő vegyes fajtájú lovat választottunk ki véletlenszerűen a vizsgálathoz. Ezek között volt 11 parazitamentes állat (kontrollcsoport) és 20 spontán A. perfoliata-fertőzésben érintett ló. Valamennyi ló esetében az ileocecális átmenetet az elhullást követő 30 percen belül gyűjtötték be. Ezt követően a bélmintákat folyó vízben leöblítettük, és azonnal 10%-os semleges pufferelt formalinba helyeztük. Eközben az ileocecális csomóponthoz tapadt kifejlett galandférgeket közvetlenül megszámoltuk, feljegyeztük, folyóvízben leöblítettük, és 10%-os formalinoldatban tartósítottuk. Az összegyűjtött galandférgeket laktofenolos oldatba helyeztük, majd tárgylemezre montíroztuk, hogy morfológiai paraméterek alapján azonosíthassuk őket (Euzeby 1981). A rögzített galandférgek száma alapján a kiválasztott 31 lovat négy csoportra osztottuk: “N” csoport, 0 galandférggyel; “A” csoport, 1-20 galandférggyel; “B” csoport, 20 és 100 közötti galandférgekkel; és “C” csoport, 100-nál több galandférggyel.

Minden mintából 5 µm vastag paraffinba ágyazott metszeteket festettünk hematoxilin-eozinnal és cresyl violettel. A szövettani vizsgálatot a következő paraméterek értékelésére végeztük: lymphomonocytás és eozinofil gyulladásos infiltráció a nyálkahártyában/szubmucosában, a bélnyálkahártyák atrófiája/fúziója, erozív/ulceratív elváltozások, a goblet sejtek degeneratív elváltozásai és a bél nyirokcsomók hiperpláziája. Minden egyes kiválasztott paraméterhez külön-külön pontszámot rendeltek: 0, elváltozások hiánya; 1, enyhe elváltozások; 2, mérsékelt elváltozások; és 3, kifejezett elváltozások. Következésképpen a rögzített pontszámok összege alapján a nyálkahártya és a nyálkahártya alatti károsodást a következőképpen osztályozták: 0 (nincs változás) 0-2 ponttal; I (enyhe változás) 3-7 ponttal, II (mérsékelt változás) 8-12 ponttal, és III (kifejezett változás) 13-15 ponttal.

Az ileocecális átmenetnél a körkörös és hosszanti izomrétegek vastagságát képelemzéssel (NIS-Elements Br-2) számszerűsítették a hipertrófiás állapotok azonosítása érdekében. Minden egyes minta esetében az ENS szövettani vizsgálatát morfometriai kiértékeléssel értékeltük a myentericus ganglionok átlagos vonalas sűrűségét, a neuronális sejtek számát és a kromatolitikus/necrotikus neuronális sejtek átlagos százalékos arányát három 3 cm-es sorozatmetszetben.

Az általános lineáris modell (GLM) segítségével igazoltuk a parazitás terhelés és a nyálkahártya és a nyálkahártya alatti elváltozások szövettani osztályozása közötti szignifikáns korrelációt. A myentericus ganglionok száma, a neuronális sejtek száma, a kromatolitikus/necrotikus neuronok százalékos aránya, az izomrétegek vastagsága és a rögzített galandférgek száma alapján azonosított csoport közötti szignifikáns különbségek kimutatására egyirányú varianciaanalízist (ANOVA), majd Tukey-féle többszörös összehasonlító tesztet alkalmaztunk. Öt százalék volt a feltételezett szignifikancia szint. A statisztikai elemzést az R 2.7 verziójú szoftverrel végeztük (GNU GENERAL PUBLIC LICENSE, Free Software Foundation, Inc., Boston, USA).