Emerging evidences for the opposite szerepéről az apolipoprotein C3 és az apolipoprotein A5 lipidanyagcserében és a koszorúér-betegségben

Az APOA1/C3/A3/A4/A5 génklaszterek kódolják az apolipoprotein C3 (apoC3) és az apolipoprotein A5 (apoA5) fehérjéket. Genetikai, epidemiológiai vizsgálatokból és alapkísérletekből származó bizonyítékok következetesen bizonyították, hogy az apoC3 és az apoA5 a plazma triglicerid (TG) metabolizmusának kritikus modulátorai . Az apoC3 vagy az apoA5 hiánya a plazma TG-szintjének jelentős csökkenéséhez vagy emelkedéséhez vezetett emberben és egerekben . Mélyreható mechanisztikus vizsgálatok kimutatták, hogy az apoC3 gátolta a plazma TG-hidrolízist, a maradék lipoprotein felvételét és elősegítette a máj TG-szekrécióját, míg az apoA5 teljesen ellentétes módon szabályozta a plazma TG-metabolizmust . A legújabb vizsgálatok feltárták továbbá az apoC3 és az apoA5 további szerepét a maradék koleszterin (RC), a nagy sűrűségű lipoprotein (HDL) és a máj TG-metabolizmusában . Ezenkívül nagyszabású populációgenetikai vizsgálatok azt mutatták, hogy az APOC3 és az APOA5 gén funkcióvesztéses mutációi a koszorúér-betegség (CAD) csökkent, illetve fokozott kockázatát okozzák. Így az apoC3 és az apoA5 a kardiovaszkuláris kockázat csökkentésének potenciális új célpontjai. Ez a kézirat elsősorban azokat a meglévő bizonyítékokat tekintette át, amelyek az apoC3 és az apoA5 ellentétes szerepére utalnak a lipidanyagcserében és a CAD kockázatában, és megvitatta e két apolipoprotein közötti lehetséges összefüggést.

Génszerkezet és expressziós szabályozás

A humán APOA1/C3/A4/A5 géncsoportok a 11q23 kromoszómán helyezkednek el, ahol az APOC3 gén körülbelül 35 kbp-ra van az APOA5 gén lókuszától felfelé . Szekvenciáik evolúciósan konzerváltak . A humán APOC3 gén szabályozási régiói négy elemet tartalmazó proximális promóter (- 283/+ 24) és hat elemet tartalmazó disztális enhancer (- 890/- 500) . Korábbi állat- és sejtkultúra-vizsgálatok megállapították, hogy az APOC3 enhancer közös szabályozó szekvenciaként irányítja a hepatikus és bélrendszeri APOA1, APOC3 és APOA4 gének expresszióját . Ugyanakkor in vivo elegendő májspecifikus APOA5 génexpressziót értek el egy 26 kb-os DNS XhoI-fragmentummal, amely csak az APOA5 gént tartalmazta, és így hiányzott belőle az APOC3 enhancer . Gao és munkatársai megerősítették továbbá, hogy az APOC3 enhancer nem befolyásolja az APOA5 expresszióját transzgenikus egerekben . Valójában az APOA5 promotor régiójában két elemet találtak kritikusnak az expresszió irányításához humán májsejtvonalakban .

A génexpresszió elindítása a transzkripciós faktorok génszabályozó elemekhez való specifikus kötődésével történik, és az ezt a folyamatot befolyásoló molekulák szabályozhatják a megfelelő génexpressziót. Az APOC3 és az APOA5 génexpresszió konkrét szerkezetét és szabályozási mechanizmusait máshol már áttekintettük , mi itt az APOC3 és az APOA5 által közösen használt regulátorokra koncentrálunk. Valóban, számos molekulát vontak be az APOC3 és az APOA5 expressziójának azonos irányú szabályozásába, beleértve a hepatocita nukleáris faktor 4-α (HNF4-α) és a glükóz felszabályozását, valamint az AMP-aktivált protein kináz, az inzulin és a tumor nekrózis faktor-α (TNF-α) leszabályozását. Figyelemre méltó, hogy ezek az anyagok, a TNF-α kivételével, mind fontos összetevők, amelyek közvetlenül részt vesznek a glükóz anyagcserében, ami arra utal, hogy az APOC3 és az APOA5 diszregulációja hozzájárulhat a diabéteszes dyslipidaemiához. Ellentétes irányú szabályozást találtak abban is, hogy a peroxiszóma proliferátor-aktivált receptor-α (PPAR-α) és a farnezoid X-aktivált receptor (FXR) elősegítette az APOA5, míg gátolta az APOC3 expresszióját . Az APOA5-tel ellentétben a humán APOC3 gén promótere nem tartalmaz PPAR-α és FXR pozitív válaszelemeket. Valójában ez a két nukleáris receptor közvetve hatott azáltal, hogy megzavarta más transzkripciós faktorok, például a HNF4-α kötődését az APOC3 specifikus elemeihez, ezáltal tovább gátolta az APOC3 gén transzkripcióját . Így a PPAR-α agonisták egyik típusának, a fibrátoknak a plazma TG-csökkentő hatását részben az apoA5 keringő koncentrációjának növelése és/vagy az apoC3 szintjének csökkentése közvetítheti. Valóban, a közelmúltban végzett vizsgálatok kimutatták, hogy mind a fenofibrátok, mind az omega-3 többszörösen telítetlen zsírsavak terápiája jelentősen csökkentette a plazma apoC3-szintjét emberekben .

Plazma lipidanyagcsere

Lipoprotein eloszlás

A keringő apoC3 és apoA5 elsősorban a trigliceridekben gazdag fehérjéhez (TRL) és a HDL-hez kapcsolódott . A vizsgálatok azt mutatták, hogy az apoC3 és az apoA5 bármelyike cserélhető volt a TRL és a HDL között . Emberi alanyok normolipidémiás állapotában a plazma apoC3 többsége a HDL-hez kötődött . Ezzel szemben a hipertrigliceridémiában (HTG) szenvedő alanyoknál az apoC3 többnyire a nagyon alacsony sűrűségű lipoproteinhez (VLDL) kötődött. A TG koncentrációjának növekedésével a mesterséges TG emulziókban az apoC3 nagyobb hányada tolódott el a natív plazma lipoproteinekről a mesterséges emulziókra . Glangeaud és munkatársai megállapították, hogy a VLDL lipoprotein lipáz (LPL) által közvetített hidrolízise során az apoC3 átrendeződött a VLDL-ből a HDL-be in vitro vizsgálatban, amelynek mennyisége arányos volt a VLDL TG-hidrolízisének nagyságával, és az apoC3 később visszakerült az újonnan szintetizált TG-vel dúsított VLDL-részecskékbe . Hasonlóképpen, Nelbach és munkatársai kimutatták, hogy az apoA5 túlnyomórészt a HDL-hez társult APOA5 transzgenikus egerekben, amelyek TG-ben szegény VLDL-t kaptak, de inkubáció után gyorsan és hatékonyan átrendeződött az APOA5 knockout egerekből izolált TG-ben gazdag VLDL-be. Shu és munkatársai arról is beszámoltak, hogy APOA5 knockout egerek apoA5-tartalmú rekonstituált HDL intravénás injekciója az apoA5 azonos cseremintázatát mutatta a rekonstituált HDL és a VLDL között, és az apoA5 továbbra is a TG-gazdag VLDL-hez társult a VLDL hidrolízisének megszakadása miatt.

Az eredmények arra utaltak, hogy az apoC3 és az apoA5 lipoproteineloszlása szoros kapcsolatban áll a TRL TG-tartalmával. Az apoC3 és az apoA5 többsége a HDL-ben volt, amikor a TRL-ben alacsony volt a TG-szint. Az apoC3 és az apoA5 nagy része átrendeződött a HDL-ből a TRL-részecskékbe, amikor a TRL-ben megnőtt a TG mennyisége, és a TRL hidrolízisének feldolgozásával fokozatosan visszaszálltak a HDL-be. A cserefolyamat biológiai funkciója és szabályozási mechanizmusa azonban még nem tisztázott.

Plazma TG

ApoC3 és apoA5 a plazma TG-koncentrációjának kritikus meghatározói, amint azt az emberben végzett genetikai megfigyelések bizonyítják. A humán APOC3 gén funkcióvesztéses mutációi alacsony plazma TG-profilt eredményeztek , míg az APOA5 hiánymutációban szenvedő betegeknek rendkívül magas plazma TG-szintjük volt . Az apoC3 és az apoA5 rendellenességeit a HTG különböző formáival, mint például a familiáris hyperchylomicronaemiával , a familiáris kombinált hyperlipidémiával és a familiáris dysbetalipoproteniemiával hozták összefüggésbe. Érdekes módon a közelmúltban végzett vizsgálatok kimutatták, hogy az apoC3 fehérje 74-es treoninjánál egyetlen glikozilációs hely létezik, ami négy fő proteoformát eredményez a plazmában. A vad típusú formát, amely nem tartalmaz glikánláncot, általában apoC30a néven emlegetik. A többi három másik formának mindegyike rendelkezik egy O-kötésű diszacharid galaktózból és N-acetilgalaktozaminból álló glikánlánccal. Az apoC30b az a proteoforma, amely csak a glikánmagot tartalmazza, míg az apoC31 és az apoC32 további egy, illetve két szialinsavmaradékot tartalmaz. Ezenkívül az apoC3 négy fő proteoformája differenciálisan korrelált az éhgyomri TG-szintekkel. Megállapították, hogy tömegspektrometrikus immunoassay méréssel a plazma apoC30a, apoC30b és apoC31 pozitív, míg az apoC32 negatív kapcsolatban állt az éhgyomri plazma TG-vel , ami arra utal, hogy az apoC3 egyes izoformáinak elemzése átfogóbb információt nyújthat, mint csak a teljes plazma apoC3 koncentráció.

Az APOC3 knockout egerek TG-koncentrációja csökkent (- 30%) a vadon élő alomtestvérekhez képest, míg az APOC3 transzgenikus egerek szérum TG-szintje emelkedett (+ 200% – 2000%) . Másrészt az APOA5 knockout egerek TG-szintje emelkedett (+ 400%), míg az APOA5 transzgenikus egereknél jelentősen csökkent (- 70%) ez a lipidparaméter .

A mélyreható mechanisztikus vizsgálatok kimutatták, hogy az apoC3 és az apoA5 több útvonalon keresztül szabályozza a plazma TG-szintjét. Az apoC3 gátolta az LPL által közvetített TRL-hidrolízist, a keringő TRL-maradványok clearance-jét és elősegítette a máj TG-szekrécióját. Érdekes módon az apoA5 teljesen ellentétes módon szabályozta a plazma TG-metabolizmust. Az apoA5 ugyanis gyorsította a TRL-hidrolízist, a TRL-maradékok májba történő felvételét, miközben gátolta a hepatikus TG-szekréciót (1. ábra).

A plazma RC

RC meghatározása: a TRL teljes koleszterintartalma, beleértve a VLDL-t és a közepes sűrűségű lipoproteineket (IDL) éhomi állapotban, valamint a VLDL, IDL és a chylomicronmaradványok nem éhomi állapotban. Egyre több bizonyíték utal arra, hogy az RC az ischaemiás szívbetegség független ok-okozati kockázati tényezője . Sőt, az emelkedett RC-szintek összefüggésbe hozhatók az ischaemiás szívbetegségben szenvedő betegek fokozott összhalálozásával .

Mivel az apoC3 és az apoA5 szabályozza a TRL anyagcseréjét, nem váratlan, hogy az APOC3 és az APOA5 génváltozatok összefüggésbe hozhatók az RC-szintekkel. Egy 137 895 egyént vizsgáló metaanalízisben az RC 43%-kal volt alacsonyabb az APOC3 funkcióvesztéses heterozigótáknál a nem hordozókhoz képest . Ezzel szemben az APOA5 gyakori variánsainak (c.-1131 T > C, S19 W és c.*31C > T) genotípus-kombinációi az RC akár 56%-os növekedésével jártak . Így az apoC3 vagy az apoA5 célzott kezelése potenciális megközelítésnek tűnik a plazma RC-szintjének csökkentésére, amit jövőbeli vizsgálatokban lehetne tesztelni.

HDL

AHDL különböző atero-protektív tulajdonságokat fejt ki, beleértve a koleszterin kiáramlás közvetítését, az érrendszeri endotél védelmét, gyulladáscsökkentő és anti-apoptotikus hatásokat . Az e tulajdonságokban hiányos HDL-t diszfunkcionális HDL-nek nevezik, ami viszont hozzájárul a CAD progressziójához. Humán megfigyelési vizsgálatok azt mutatták, hogy ezek a tulajdonságok kóros rendellenességek esetén hibásak. Például az urémiás betegek HDL-jénél csökkent koleszterin effluxkapacitást találtak . Riwanto és munkatársai megállapították, hogy a CAD betegekből származó HDL nem aktiválja az endotél anti-apoptotikus útvonalakat, hanem inkább stimulálja a potenciális endotél pro-apoptotikus útvonalakat. Spektrometriás és biokémiai elemzésekkel a vizsgálatok továbbá azt jelezték, hogy a HDL károsodott működése szorosan korrelált a proteom összetételének megváltozásával , amelyek közül az apoC3 és az apoA5 változásai sok figyelmet kaptak.

Riwanto és munkatársai megállapították, hogy a CAD betegek HDL részecskéiben szignifikánsan magasabb volt az apoC3 az egészséges kontrollokhoz képest. Emellett az apoC3-at semlegesítő antitest alkalmazása ezekben a HDL-ekben javította a HDL által közvetített antiendothelialis apoptózis funkciót . Cho KH kimutatta, hogy a mesterségesen rekonstruált HDL apoC3-tartalmának növelése csökkentette a lecitin-koleszterin-aciltranszferáz (LCAT) aktiváló képességét . Érdekes módon Luo M és munkatársai kimutatták, hogy a HDL ApoC3-tartalma negatívan kapcsolódik a HDL által közvetített koleszterin kiáramlási képességhez, azonban a mögöttes mechanizmus ismeretlen. Ezzel szemben az APOA5 adenovírus-mediált overexpressziója egerekben a HDL-ben megnövekedett apoA5-t eredményezett, ami fokozott koleszterin efflux kapacitással társult . A több apoA5-tel szintetizált rekonstituált HDL nagyobb részecskemérettel, több lipidtartalommal és jobb antioxidáns kapacitással rendelkezett az LDL-lel szemben in vitro .

Az apoC3 és az apoA5 HDL funkcióban betöltött határozott szerepét tovább kell vizsgálni. Arról számoltak be, hogy az apoC3 a HDL-ben képes kötődni a scavenger receptor B1 (SR-B1) , nem jellemzett szerkezetű doménnel. Az SR-B1 a koleszterin reverz transzportjának fontos elemeként ismert, részben azért, mert megkönnyíti a koleszterinészterek HDL-ből történő szelektív felvételét a májba . Hogy az apoC3 és az SR-B1 kölcsönhatása befolyásolná-e a koleszterin reverz transzportját, nem határozták meg.

Hepatikus VLDL-szekréció

A máj egyik fő funkciója a VLDL szintézise és szekréciója. A VLDL semleges lipidek, főként TG, és számos apolipoprotein magjából áll . Ezek közül az apolipoprotein B100 (apoB100) a legfontosabb, amely a VLDL-részecske szerkezeti stabilitását biztosítja. A VLDL biogenezisének két lépése van. Kezdetben a VLDL képződése az apoB100 szintézisével kezdődik az endoplazmatikus retikulumban (ER). A naszcens apoB100 ezután részben lapidálódik, hogy lipidszegény primordiális VLDL-részecskét képezzen, amit a mikroszomális triglicerid-transzferfehérje (MTP) segít elő. A VLDL-képződés második lépésében a primordiális VLDL-részecske trigliceridben gazdag részecskékkel fuzionál, hogy érett TG-gazdag VLDL-t képezzen. Egyre több bizonyíték utal arra, hogy az apoC3 és az apoA5 szabályozza a VLDL-lipidációt és befolyásolja a máj TG-tartalmát (1. ábra).

A sejtkultúrákból, állatkísérletekből és humán vizsgálatokból származó adatok megerősítették, hogy az apoA5 gátolja a VLDL-TG szekréciót és elősegíti a TG tárolását a citoszolikus lipidcseppekben. A humán APOA5-tel stabilan transzfektált McA-RH7777 sejtek kisebb VLDL-eket szekretáltak, mint a kontroll sejtek, de nagyobb volt a sejtek TG-szintje és nagyobbak voltak a lipidcseppek . Ezzel szemben Ress és munkatársai arról számoltak be, hogy az APOA5 knockdownja HepG2 sejtekben a sejtek TG-tartalmának csökkenéséhez vezetett. Az APOA5 transzgenikus egerek májában megnövekedett a máj TG-szintje a vadon élő alomtestvérekhez képest . Qin és munkatársai megállapították, hogy a nem alkoholos zsírmájbetegségben (NAFLD) szenvedő betegeknél az APOA5 expressziója emelkedett az egészséges kontrollokhoz képest. Azonban még mindig van néhány rejtély, amelyet tovább kell tisztázni. Elsősorban az, hogy az apoA5 egy része hogyan kerül ki a szekréciós útvonalból a vérbe, és hogyan társul a citoszolikus lipidcseppekhez? Továbbá, hogyan segíti elő az apoA5 a máj TG-tárolását a lipidcseppekben (LD) ahelyett, hogy VLDL formájában szekretálódna.

Megfordítva, in vivo és in vitro vizsgálatok kimutatták, hogy az apoC3 serkentő hatással van a VLDL lipidációjára. Az APOC3 knockout egerek két héten át tartó, magas zsírtartalmú étrenddel történő etetése nem serkentette a VLDL-TG termelést, míg az APOC3 expresszió helyreállítása humán apoC3-at kódoló adenovírus segítségével a VLDL-TG robusztus termelését eredményezte. A humán apoC3-nak a VLDL lipidálódását serkentő hatását McA-RH7777 sejtekben lipidekben gazdag körülmények között rekonstruálták . Továbbá az apoC3 lipidkötő doménjében lévő maradékok helyhez kötött mutációja (K58E) megszüntette ezt a stimuláló hatást . Ezeket az eredményeket emberekben alátámasztották azok a megfigyelések, hogy az APOC3 két SNP-je (C-482 T, T-455C), amelyek csökkent APOC3-expresszióhoz vezetnek, összefüggésbe hozható a máj TG-szintjének emelkedésével és a NAFLD magasabb prevalenciájával az ázsiai indiai populációban.

A VLDL lipidációját szabályozó apoA5 és apoC3 szubcelluláris helyét az ER kompartmentjének javasolják. Gao és munkatársai feltételezték, hogy az apoA5 elősegítheti az ER-luminális LD-k kifelé bimbózását, hogy citoszolikus LD-t képezzenek, és így csökkenthetik a VLDL-részecskékbe épített TG-t . Qin és munkatársai azt találták, hogy az apoC3 elősegítette az ER-luminális LD és a VLDL-részecskék összeolvadását a VLDL-lipidáció során . Az apoA5 és az apoC3 VLDL-lipidációra és LD-metabolizmusra gyakorolt hatásának hátterében álló molekuláris alapokra összpontosító mélyreható vizsgálatokra van szükség, amelyek a máj TG-homeosztázisának újszerű megértését fogják biztosítani.

A CAD-vel való összefüggés

A CAD világszerte a halálozás egyik fő okává vált. Az alacsony sűrűségű lipoprotein-koleszterin (LDL-C) köztudottan döntő szerepet játszik a CAD patogenezisében, és a plazma LDL-C-jének csökkentése a CAD morbiditásának és mortalitásának jelentős csökkenését eredményezi . Ugyanakkor arról számoltak be, hogy az LDL-C-szintek terápiás céljának elérése ellenére is sokan szenvedtek CAD-ben . Ezért erőfeszítéseket tesznek más módosítható kockázati tényezők azonosítására a CAD kockázatának további csökkentése érdekében. A populációgenetikai adatok mentesek a zavaró tényezőktől és a fordított ok-okozati összefüggésektől, és ezért a CAD új potenciális kockázati tényezőinek azonosításának fontos módjaként ismerik el.

Érdekes módon kimutatták, hogy a genetikailag csökkent plazma apoC3-szintek a CAD csökkent kockázatával járnak emberekben . Az APOC3 gén R19X nevű nonszensz mutációja a keringő apoC3 szint 50%-os csökkenésével járt együtt . Ennél is fontosabb, hogy a ritka R19X variáns hordozóinál alacsonyabb volt a koszorúér-meszesedés előfordulása és a Framingham-féle 10 éves CAD-kockázat . Az R19X és három másik ritka variáns, két splice site mutáció (IVS2 + 1G → A; IVS3 + 1G → T) és egy missense mutáció (A43T) kardioprotektív hatását az APOC3 génben nemrég két nagyszabású vizsgálatban is megerősítették . A National Heart, Lung, and Blood Institute Exome Sequencing Project részeként végzett vizsgálatban 150 résztvevőből körülbelül 1 volt heterozigóta hordozója e négy mutáció legalább egyikének, és az APOC3 keringő szintje a hordozókban 46%-kal alacsonyabb volt, mint a nem hordozókban. A CAD kockázata 498, bármely ritka APOC3-mutáció hordozója körében 40%-kal alacsonyabb volt, mint 110 472 nem hordozó esetében. Következésképpen egy 75 725 résztvevőből álló kohorszban az ischaemiás érbetegség és az ischaemiás szívbetegség kumulatív előfordulása csökkent az APOC3 funkcióvesztéses mutációira (R19X vagy A43T vagy IVS2 + 1G → A) heterozigóták esetében a nem hordozókhoz képest, a kockázat 41%-os és 36%-os csökkenése mellett. Figyelemre méltó, hogy arról is beszámoltak, hogy a magasabb apoC32 proteoformával rendelkező betegeknél tendenciaszerűen kevesebb súlyos káros kardiovaszkuláris betegségesemény fordult elő, míg a többi apoC3 proteoforma esetében nem mutatták ki ezeket az összefüggéseket, ami arra utal, hogy az apoC32 inkább egy funkcióvesztéses proteoforma .

Az APOA5 variánsok, amelyek csökkent apoA5 szinthez vezetnek, fokozott CAD kockázattal társultak . Az APOA5 gén -1131 T > C promóter-polimorfizmusa és a CAD kockázata közötti összefüggést egy nagy metaanalízisben kimutatták. A CAD esélyhányados 1,18 volt C vs. T allélonként . Továbbá számos független vizsgálat következetesen jelezte, hogy az APOA5 variánsok szignifikánsan összefüggésbe hozhatók a szívinfarktus (MI) kockázatával. Raffaele De Caterina és munkatársai erős összefüggést találtak az APOA5 -1131 T > C génváltozat és a korai akut MI között . Jorgensen AB és munkatársai kimutatták továbbá, hogy az APOA5 gén genetikai variációja (c.-1131 T. C, S19 W és c.*31C. T) az MI kockázatának 87%-os növekedésével jár együtt . Do R és munkatársai 6721 MI-ben szenvedő és 6711 kontrollszemélyben szekvenálták az APOA5 exonjait. 46 egyedi, nem szinonim vagy splice-site egynukleotid variánst vagy indel frameshiftet azonosítottak < 1% allélfrekvenciával. Ráadásul az APOA5 gén e ritka mutációinak hordozói (az esetek 1,4%-a a kontrollok 0,6%-ával szemben) a kontrollokhoz képest 2,2-szer nagyobb MI-kockázatnak voltak kitéve .

Az apoC3 és az apoA5 CAD-kockázatra gyakorolt hatását részben a plazma RC-szintjének változásai közvetítik. Wulff AB és munkatársai szerint az RC közvetítette az ischaemiás érbetegség megfigyelt 41%-kal alacsonyabb kockázatának 37%-át és az ischaemiás szívbetegség megfigyelt 36%-kal alacsonyabb kockázatának 54%-át az APOC3 funkcióvesztéses heterozigótáknál a nem hordozókkal szemben . Ugyanakkor az APOA5 génváltozatok (c.-1131 T. C, S19 W és c.*31C. T), amelyek genetikailag fokozott RC-hez vezetnek, az MI fokozott kockázatával társultak . Másrészt az APOA5 génváltozatok (c.-113131 T. C, S19 W és c.*31C. T) az RC akár 56%-os növekedésével és az MI 1,87-es megfelelő esélyhányadosával társultak .

Potenciális korreláció az apoC3 és az apoA5 között

Mivel az apoC3 és az apoA5 a lipidanyagcserét szabályozza és ellentétes módon társul a CAD-kockázattal, ésszerű a kérdés, hogy függetlenül vagy együttműködve működnek. A genetikai egerekből származó egyes eredmények szoros kapcsolatot sugalltak e két fehérje között, bár jelenleg nincs olyan bizonyíték, amely közvetlen kölcsönhatást mutatna ki közöttük. Pennacchio és munkatársai kimutatták, hogy az APOA5 transzgenikus és knockout egereknél a máj apoC3 fehérjeszintje nyilvánvalóan csökkent, illetve emelkedett, míg az apoC3 mRNS mennyiségében nem találtak jelentős változásokat. Valóban, a májban az apoC3 fehérje mennyisége 90%-kal nőtt az APOA5 knockout egerekben és 40%-kal csökkent az APOA5 transzgenikusokban a vad típusú alomtestvérekhez képest. Hasonlóképpen, csökkent szérum apoC3 szintet figyeltek meg a humán APOA5 adenovírus által közvetített overexpresszióját követően egerekben . Ezek az eredmények arra utaltak, hogy az apoC3 transzkripciós szinten befolyásolhatja az apoA5-öt, és fordítva. A mögöttes mechanizmusok azonban ismeretlenek.