Kansas State University

Március 2019

Rheumatoid faktor (RF) és antinukleáris antitest (ANA)az állatgyógyászati betegek autoimmun betegségeinek diagnosztikájában

By Drs. Brandy Kastl és Nora Springer

Az autoimmun betegségek diagnózisa az állatorvoslásban kihívást jelenthet. Autoimmun betegség gyanúja esetén gyakran alkalmaznak szérum autoantitest-titereket, különösen a reumafaktor (RF) és/vagy az antinukleáris antitest (ANA) esetében. Mindkét tesztnek azonban akkor van a legnagyobb diagnosztikai haszna, ha a teljes klinikai kép összefüggésében értelmezik. Az autoantitest-kimutatás erősségeinek és buktatóinak megértése javítja a pozitív eredmények pontos értelmezését. Ebben a cikkben a poliartritisz diagnosztikai feldolgozását használjuk példaként mind az RF, mind az ANA klinikai hasznosságára.

A szérum RF és ANA titereket gyakran használják a kutyák immunmediált poliartritisz gyanújának diagnosztikai feldolgozásában (lásd 1. táblázat – A kutya poliartritisz diagnosztikai megközelítése). A poliartritisz diagnosztikai értékelését – fajra való tekintet nélkül – először az érintett ízület(ek) röntgenfelvételével és az ezzel párhuzamosan végzett synovialis folyadékvizsgálattal kell kezdeni. A röntgenfelvételek meghatározzák, hogy az ízületi elváltozások erozívak (azaz csontérintettség) vagy nem erozívak (azaz nincs csontérintettség). Eközben az ízületi folyadék vizsgálata azonosítja a gyulladást és esetenként a fertőző organizmusokat. A mikroszkóposan látható organizmusok hiánya a szinoviális folyadékban nem zárja ki a fertőző etiológiát; ezért megfelelő fertőzéses vizsgálatra van szükség. Végső soron a radiológiai elváltozás jellemzőinek, az ízületi folyadék leleteinek és a kiegészítő fertőző betegségek vizsgálati eredményeinek kombinációja szűkíti a differenciállistát (lásd az 1. táblázatot) a caninepolyarthritisben. Ha az elváltozás jellemzői megfelelnek és a fertőző betegségeket kizárták, mind az RF, mind az ANA-titerek további támogatást nyújtanak a rheumatoid arthritis (RA), illetve a szisztémás lupus erythematosus (SLE) diagnózisához.

1. ábra: Reumatoid faktor sémája

Eróziós, neutrofil poliartritisz esetén, azonosítható fertőző etiológia nélkül, reumatoid artritiszre kell gondolni. Az RA diagnózisára vonatkozó további információk a www.rheumatology.org oldalon találhatók az ACR-EULAR 2010-es reumatoid artritisz osztályozási kritériumai között, amely az állatfajokra is alkalmazhatónak tekinthető. RA-ban az IgG antitestek kristályosítható fragmentum (Fc) régiója ellen irányuló autoantitestek halmozódnak fel (1. ábra). Ezeket az IgM, IgA vagy IgG autoantitesteket együttesen reumatoid faktornak (RF) nevezik. Normális körülmények között az RF megkönnyíti az antitest-antigén komplexek eltávolítását az immunológiai választ követően. E normális immunológiai funkció miatt a megnövekedett szérum RF-titer nem patognomikus az RA-ra, és a normális egyének kis százalékában vagy más krónikus gyulladásos állapotokban szenvedőkben is előfordulhat. RA-ban szenvedő betegeknél a túlzott RF-termelés az ízületi gyulladás kezdeti kialakulása után következik be, és ezt követően az ízületi szövetekben történő immunkomplex lerakódás révén fokozza az artritisz kialakulását. Az RF-felhalmozódás e késleltetése miatt az RA-s betegek kis százalékának negatív RF-titerei lesznek. Ettől függetlenül a szérum RF-titerek meghatározása továbbra is az RA diagnózisának egyik alapköve.

A RA-val ellentétben a szitémás lupusz eritematózusz (SLE) nem erozív, gyulladásos poliartritiszt okoz. Kutyákban az SLE diagnózisa gyakran ≥ 2 autoimmunitással összefüggő klinikai tünet jelenlétén alapul (2. táblázat: A kutya SLE javasolt diagnosztikai kritériumai), > 1:160 szérum ANA-titerrel kombinálva. Az antinukleáris antitest (ANA) a különböző nukleáris antigének, például hisztonok és DNS ellen irányuló autoantitestek gyűjtőfogalma. Az RF-hez hasonlóan a pozitív szérum ANA-titer nem patognomikus az SLE diagnózisára. Pozitív ANA-titer megfigyelhető egészséges egyéneknél vagy krónikus gyulladással (pl. atópiás dermatitis, dobermann hepatitis), fertőző betegségekkel (pl. Ehrlichiosis, Leishmaniasis), daganatos betegségekkel vagy gyógyszerekkel (pl. szulfonamidok, penicillin, tetraciklinek) összefüggésben. Ezért a szérum ANA kimutatását olyan klinikai esetekre kell fenntartani, amelyekben erős az SLE gyanúja. Mivel a nukleáris antigének jól konzerválódnak az emlősfajok között, a kutya ANA-titereket a KSVDL-nél indirekt fluoreszcens antitest-kimutatással határozzák meg, patkányhepatocitákat használva szubsztrátként (2. ábra). A beteg szérumának többszörös sorozatos hígításait patkánymájsejtek vékony preparátumával inkubálják. A szérumban lévő ANA a patkányhepatociták sejtmagjához kötődik. Ezután másodlagos fluoreszcens jelölésű ellenanyagot adunk hozzá, hogy a beteg antitestjeinek (azaz az ANA-nak) a nukleáris antigénekkel való komplexképződését kiemeljük (2. ábra).

2A. ábra. A kutyák szérum ANA-titerének közvetett fluoreszcens antitest kimutatásának vázlata (nem méretarányos).	2B. ábra. Pozitív teszteredmény a sejtmagokra lokalizált immunfluoreszcenciával.

Végeredményben a szérum RF és ANA-titerek hasznosak lehetnek az autoimmun betegségek diagnózisában. Fontos, hogy mind a szérum RF-, mind az ANA-titereket olyan betegek számára kell fenntartani, akiknél a klinikai tünetek összeegyeztethetők a rheumatoid arthritisszel, illetve a szisztémás lupus erythematosussal. E vizsgálatok elvégzése és különösen a pozitív eredmények értelmezése előtt hatékonyan ki kell zárni a fertőző betegségeket, más autoimmun betegségeket és daganatos betegségeket. A KSVDL Klinikai Immunológiai Laboratóriuma jelenleg a szérum RF és ANA titerek validált kereskedelmi kimutatását kínálja kutyák számára. A vizsgálathoz körülbelül 1-3 ml szérumot kérnek a vérrögtől elválasztva és egy friss, piros tetejű csőben elhelyezve. Az elválasztás után a szérumot hűtőszekrényben kell tárolni, és a gyűjtéstől számított 1-2 napon belül hűtőcsomaggal együtt kell szállítani. Ha további kérdései vannak bármelyik vizsgálattal kapcsolatban, kérjük, forduljon a KSVDL ügyfélszolgálatához az 1-866-512-5650-es vagy a 785-532-5650-es telefonszámon.

1. táblázat. A kutya poliartritisz diagnosztikai megközelítése	2. táblázat: A kutya SLE javasolt diagnosztikai kritériumai

.