Adenoma duttale delle ghiandole sudoripare apocrine con differenziazione sebacea in un cane
Abstract
Un maschio di 7 anni, Border Collie, ha sviluppato una massa solida, di circa 1 cm di diametro, nella pelle buccale sinistra. Istologicamente, la massa era composta da strutture duttali rivestite da cellule epiteliali luminali e basaloidi tumorali bilayered insieme ad alcuni nidi di cellule sebacee. La colorazione immunoistochimica ha rivelato che le cellule tumorali epiteliali luminali erano positive per la citocheratina (CK, CAM5.2) e CK19 ma non per CK14 o p63. Al contrario, le cellule tumorali basaloidi erano positive per CK14, p63 e αSMA ma non per CK19 o CAM5.2. L’espressione di CK8 è stata osservata in entrambe le cellule tumorali epiteliali luminali e basaloidi. Le cellule tumorali con differenziazione sebacea erano positive per CK14 ma non per gli altri marcatori. Questo è il primo caso di un adenoma duttale delle ghiandole sudoripare apocrine con differenziazione sebacea che si verifica nella pelle buccale di un cane.
1. Introduzione
I tumori delle ghiandole sudoripare apocrine sono piuttosto comuni nei cani e tendono a verificarsi su testa, collo e arti. Circa il 70% dei tumori delle ghiandole sudoripare apocrine canine sono di natura benigna. I tumori benigni della ghiandola sudoripara apocrina sono classificati come adenomi apocrini, adenomi apocrini complessi e misti, o adenomi duttali apocrini. Gli adenomi duttali apocrini nei cani sono neoplasie benigne non comuni e rappresentavano solo lo 0,3% dei tumori della pelle canina in una grande indagine. Nei cani, la differenziazione sebacea è stata descritta in cinque casi di tumori delle ghiandole mammarie. Tuttavia, a conoscenza degli autori, un tumore apocrino non mammario con differenziazione sebacea nel cane non è stato precedentemente riportato.
2. Case Report
Un maschio di 7 anni, Border Collie, ha sviluppato una massa solida nella pelle buccale sinistra, che è stata rimossa chirurgicamente e presentata al Dipartimento di Patologia Veterinaria, Nippon Veterinary and Life Science University (Tokyo, Giappone), per l’esame istopatologico. Grossolanamente, la massa aveva un diametro di circa 1 cm e la superficie di taglio della massa appariva di colore bianco-grigiastro omogeneo. Un esame fisico che includeva l’emocromo completo e un profilo biochimico sierico di routine non ha rivelato altre anomalie. Gli esami radiografici e radiologici dettagliati non hanno rivelato alcuna massa suggestiva di un tumore nelle cavità toracica e addominale. Nessuna recidiva o metastasi del tumore è stata notata dopo 9 mesi di escissione chirurgica. La massa asportata è stata fissata in formalina neutra tamponata al 10%, inserita in cera di paraffina, tagliata in sezioni da 4 μm e colorata con ematossilina ed eosina (HE), acido periodico-Schiff (PAS), alcian blu e macchie rosso olio O. Sezioni seriali sono state sottoposte a colorazione immunoistochimica (IHC) usando una tecnica di streptavidina-biotina perossidasi etichettata con anticorpi monoclonali di topo contro la citocheratina a basso peso molecolare (CK; clone CAM5.2, prediluito, BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA), CK8 (clone Ks 8.7, 1 : 50, Progen Biotechnik GmbH, Heidelberg, Germania), CK14 (clone LC002, 1 : 50, BioGenex Laboratories Inc, San Ramon, CA, USA), l’actina muscolare liscia (SMA; clone 1A4, 1 : 400, DAKO, Glostrup, Danimarca), CK19 (clone 170.2.14, 1 : 100, Boehringer Mannheim, Germania), e p63 (clone 4A4, 1 : 400, NeoMarkers Inc., Fremont, CA, USA). Tutte le sezioni di tessuto sono state pretrattate con tampone citrato (pH 6.0) e incubate a 121°C per 15 minuti. La reazione ad ogni antigene è stata visualizzata con l’aggiunta di cromogeno 3,3′-diaminobenzidina tetracloruro e controcolorata con ematossilina.
Istologicamente, la massa era ben delimitata e incapsulata. Era composta da vari noduli e nidi proliferanti composti principalmente da strutture duttali a due strati con uno strato interno di cellule tumorali epiteliali luminali da cuboidali a colonnari e uno strato esterno di cellule tumorali basaloidi separate da un sottile stroma fibroso (Figura 1). Lo strato interno di cellule epiteliali luminali aveva un citoplasma chiaro e piccoli nuclei ipercromatici. Lo strato esterno delle cellule tumorali basaloidi aveva uno scarso citoplasma eosinofilo e nuclei eucromatici leggermente più grandi. L’attività mitotica era moderata. All’interno del tumore, c’erano alcuni nidi di grandi cellule schiumose simili alle cellule sebacee circondate da cellule basaloidi (Figura 2). I nuclei di queste cellule erano localizzati centralmente con citoplasma finemente vacuolato ed erano negativi alla colorazione PAS e alcian blue, ma positivi per i lipidi alla colorazione oil red O (Figura 2 inset). Nessuna differenziazione squamosa o cheratinizzazione è stata osservata all’interno del tumore. Inoltre, non è stata osservata necrosi, invasione o emboli delle cellule tumorali.
Apparenza istopatologica della massa buccale. La massa è composta da strutture duttali rivestite da cellule tumorali epiteliali e basaloidi a due strati. Ematossilina ed eosina (HE). Bar = 100 m.
Differenziazione sebacea osservata nell’adenoma duttale apocrino. Le cellule sebacee sono caratterizzate da un citoplasma abbondante, chiaro e vacuolato e da un nucleo centrale circondato da cellule basaloidi nell’adenoma duttale apocrino. HE. Bar = 50 m. Inserto: una sezione congelata colorata con olio rosso O che rivela le goccioline di lipidi nel citoplasma delle cellule sebacee.
Come mostrato nella tabella 1, la colorazione immunoistochimica ha rivelato che le cellule tumorali epiteliali luminali erano positive per CK19 (Figura 3) e CAM5.2 ma non per CK14, SMA e p63. Al contrario, le cellule tumorali basaloidi erano positive per CK14 (Figura 4), p63 (Figura 5), e SMA ma non per CK19 e CAM5.2. L’espressione di CK8 è stata osservata in entrambe le cellule tumorali epiteliali luminali e basaloidi (Figura 6). Le cellule tumorali che mostravano una differenziazione sebacea erano positive per CK14 ma non per gli altri marcatori.
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Le cellule tumorali alluminali sono positive per CK19. Immunoistochimica per CK19 con controcolorazione di ematossilina. Bar = 50 m.
Cellule tumorali basali e cellule che mostrano differenziazione sebacea sono positive per CK14. Immunoistochimica per CK14 con controcolorazione di ematossilina. Bar = 50 m.
Le cellule tumorali basali sono positive per p63. Immunoistochimica per p63 con controcolorazione di ematossilina. Bar = 50 m.
Le cellule tumorali sia luminali che basaloidi sono positive per CK8. Immunoistochimica per CK8 con controcolorazione di ematossilina. Bar = 50 m.
3. Discussione
Sulla base dei risultati istologici e immunoistochimici, il tumore è stato diagnosticato come un adenoma apocrino duttale delle ghiandole sudoripare con differenziazione sebacea. Secondo la classificazione dell’Organizzazione Mondiale della Sanità dei tumori epiteliali e melanocitari della pelle degli animali domestici, i tumori benigni della ghiandola sudoripara apocrina sono classificati come adenomi apocrini, adenomi apocrini complessi e misti, o adenomi duttali apocrini. Nei cani, la differenziazione sebacea è stata descritta in quattro casi di tumori delle ghiandole mammarie: due adenomi complessi e due carcinomi e un caso di tumore delle ghiandole salivari, mentre non è stato precedentemente descritto nelle ghiandole sudoripare apocrine. La presente relazione descrive un caso di adenoma duttale delle ghiandole sudoripare apocrine con differenziazione sebacea che si verifica nella pelle buccale del Border Collie.
CK19 e CAM5.2 sono utili marcatori di cellule luminali, mentre CK14, p63, e SMA sono marcatori di cellule basali/mioepiteliali nei cani. L’espressione di CK8 è stata osservata in entrambe le cellule luminali e basaloidi nei tumori delle ghiandole apocrine canine. Al contrario, CK14 è stato espresso nella ghiandola sebacea normale e nelle cellule mioepiteliali delle ghiandole apocrine e mammarie. L’espressione di SMA è stata osservata nelle cellule mioepiteliali ma non nelle cellule basaloidi nei tumori delle ghiandole apocrine. Nel carcinoma apocrino canino, le cellule p63+SMA+, p63+SMA- e CK8+p63- sono state identificate rispettivamente nelle cellule mioepiteliali, basaloidi e luminali. Inoltre, in accordo con gli studi precedenti, questo tumore consisteva principalmente di due tipi di cellule tumorali, cellule luminali e cellule basaloidi, con differenziazione sebacea.
Questo tumore sembrava essere differenziato da un adenoma sebaceo e un tricoblastoma della pelle. Le caratteristiche del tumore in questo caso includevano la proliferazione cellulare con strutture duttali a due strati con differenziazione sebacea, che non è una caratteristica di un tumore sebaceo o tricoblastoma. I tumori delle ghiandole mammarie canine sono spesso osservati in differenziazione squamosa. Alcuni adenomi duttali delle ghiandole sudoripare apocrine canine hanno focolai di differenziazione squamosa con piccoli depositi di cheratina nella porzione infundibolare del dotto apocrino. Tuttavia, la differenziazione squamosa non è stata osservata in questo caso.
L’origine della componente sebacea in questo tumore non era chiara. Tuttavia, studi precedenti hanno suggerito che le cellule basaloidi tumorali possono differenziarsi in cellule epiteliali sebacee e che le cellule staminali cutanee potrebbero dare origine ai sebociti nei tumori mammari canini. Pertanto, proponiamo che la differenziazione sebacea in questo tumore possa essere derivata da cellule basaloidi o da cellule staminali pluripotenti locali, simili ai tumori della ghiandola mammaria canina.
Conflitto di interessi
Gli autori dichiarano che non c’è conflitto di interessi.
Riconoscimenti
Gli autori desiderano ringraziare la dottoressa Hidemi Kitagawa per aver fornito le informazioni di follow-up e il campione di tumore per questo studio e i dottori Yoko Matsuda, Toshiyuki Ishiwata e Zenya Naito del Dipartimento di Patologia e Patologia Oncologica Integrativa, Nippon Medical School, per le loro utili discussioni.