Cambiamenti patologici causati da Anoplocephala perfoliata nella giunzione ileocecale equina
Trentuno cavalli di razza mista, di età compresa tra i 15 mesi e i 13 anni e regolarmente inviati al macello, sono stati selezionati a caso per questo studio. Essi comprendevano 11 animali senza parassiti (gruppo di controllo) e 20 cavalli affetti da infezione spontanea da A. perfoliata. In tutti i cavalli, la giunzione ileocecale è stata raccolta entro 30 minuti dalla morte. Successivamente, i campioni intestinali sono stati risciacquati in acqua corrente e posti immediatamente in formalina tamponata neutra al 10%. Nel frattempo, le tenie adulte attaccate alla giunzione ileocecale sono state contate direttamente, registrate, sciacquate in acqua corrente e conservate in una soluzione di formalina al 10%. Le tenie raccolte sono state messe in soluzione di lattofenolo e poi montate su vetrini per essere identificate usando parametri morfologici (Euzeby 1981). In base al numero di tenie registrate, i 31 cavalli selezionati sono stati divisi in quattro gruppi: gruppo “N”, con 0 tenie; gruppo “A”, con tenie da 1 a 20; gruppo “B”, con tenie da 20 a 100; e gruppo “C”, con più di 100 tenie.
Da ogni campione, sono state colorate sezioni in paraffina spesse 5 µm con ematossilina-eosina e violetto di cresile. L’indagine istologica è stata eseguita per valutare i seguenti parametri: infiltrazione infiammatoria linfomonocitaria ed eosinofila nella mucosa/sottomucosa, atrofia/fusione dei villi intestinali, lesioni erosive/ulcerative, cambiamenti degenerativi delle cellule del calice e iperplasia dei follicoli linfatici intestinali. Un punteggio è stato attribuito individualmente ad ogni parametro selezionato: 0, assenza di lesioni; 1, lesioni lievi; 2, lesioni moderate; e 3, lesioni marcate. Di conseguenza, in base alla somma totale dei punteggi registrati, il danno mucoso e sottomucoso è stato classificato come segue: 0 (nessun cambiamento) con 0-2 punti; I (cambiamenti lievi) con 3-7 punti, II (cambiamenti moderati) con 8-12 punti, e III (cambiamenti marcati) con 13-15 punti.
Alla giunzione ileocecale, gli spessori degli strati muscolari circolari e longitudinali sono stati quantificati mediante analisi di immagine (NIS-Elements Br-2) per identificare le condizioni ipertrofiche. Per ogni campione, l’indagine istopatologica dell’ENS è stata valutata mediante valutazione morfometrica per valutare la densità lineare media dei gangli mienterici, il numero di cellule neuronali e la percentuale media di cellule neuronali cromatolitiche/necrotiche in tre sezioni seriali di 3 cm.
È stato utilizzato un modello lineare generale (GLM) per verificare una correlazione significativa tra il carico parassitario e la classificazione istopatologica delle lesioni mucose e sottomucose. Un’analisi unidirezionale della varianza (ANOVA) seguita dal test di confronto multiplo di Tukey è stata utilizzata per rilevare differenze significative tra il numero di gangli mienterici, il numero di cellule neuronali, la percentuale di neuroni cromatolitici/necrotici, lo spessore degli strati muscolari e il gruppo identificato in base al numero di tenie registrato. Il cinque per cento era il livello di significatività presunto. L’analisi statistica è stata effettuata utilizzando il software versione R 2.7 (GNU GENERAL PUBLIC LICENSE, Free Software Foundation, Inc., Boston, USA).