DETECTION OF ANTI-NEUTROPHIL ANTIBODIES
Gli anticorpi contro i neutrofili possono causare una varietà di disturbi tra cui neutropenia immunitaria neonatale, neutropenia autoimmune, neutropenia immunitaria dopo trapianto di midollo osseo, neutropenia immunitaria indotta da farmaci e lesioni polmonari acute legate alla trasfusione. Non è attualmente disponibile una singola tecnica che difetti tutti gli anticorpi neutrofili clinicamente rilevanti. Una combinazione di test di agglutinazione dei granulociti e di immunofluorescenza è attualmente il mezzo di rilevamento più efficace. A causa della tendenza autolitica dei neutrofili conservati, i neutrofili freschi accuratamente isolati devono essere usati come cellule test. I neutrofili in esame devono essere tipizzati per gli antigeni neutrofili NA1, NA2, NB1, SH e 5b. Se non è possibile determinare la specificità dell’alloanticorpo dal pattern di reazione con le cellule test tipizzate, il siero dovrebbe essere testato in un test antigene-specifico basato sull’immobilizzazione monoclonale anticorpo-specifica dei granulociti (MAIGA assay). Per evitare il complicato isolamento delle cellule per l’identificazione degli alloanticorpi, abbiamo stabilito linee cellulari stabili di mammiferi che esprimono gli antigeni neutrofili NA1, NA2 e SH. Circa il 30% degli autoanticorpi dei neutrofili mostrano un legame preferenziale all’antigene NA1 e sono meglio rilevati usando neutrofili da donatori omozigoti NA1 o cellule di mammifero che esprimono NA1. Gli autoanticorpi sono rilevati solo nel 74% dei sieri durante il primo round di screening degli anticorpi. D’altra parte, un test anticorpale diretto positivo dei neutrofili del paziente non può essere considerato come prova della presenza di autoanticorpi perché i neutrofili del paziente sono di solito attivati con una maggiore espressione del complemento e dei recettori Fcyreceptors con conseguente legame IgG aspecifico. Pertanto, l’analisi dei sieri del paziente a intervalli per gli anticorpi neutrofili non legati rimane il modo migliore per la rilevazione degli autoanticorpi.