NanoHybrids – Coniugazione di anticorpi per nanoparticelle d’oro

Sonde di nanoparticelle d’oro coniugate con anticorpi permettono lo studio e la visualizzazione di processi cellulari e molecolari in vitro e in vivo; uno strumento critico sia per i ricercatori delle scienze di base che per i clinici.
Molti ricercatori spendono troppo tempo ed energia per sintetizzare questi coniugati da soli con vari gradi di successo e risultati incoerenti. La maggior parte scopre che, pur eseguendo coniugazioni per conto proprio, soffrono di un attaccamento anticorpo-particella incoerente e di un’efficienza di etichettatura delle cellule non riproducibile.
Solvere il primo problema dell’attaccamento incoerente anticorpo-particella richiede sia:
(1) la creazione di un legame stabile tra la particella e l’anticorpo e
(2) la corretta caratterizzazione dell’attaccamento dell’anticorpo.

Per creare un legame stabile, gli anticorpi dovrebbero essere legati covalentemente alla superficie. Lo schema qui sotto mostra diversi metodi di coniugazione degli anticorpi.

Il metodo di adsorbimento fisico è il meno stabile. Si basa sull’affinità di alcuni gruppi funzionali sulle proteine, come le ammine e i tioli, per essere attratti dalla superficie delle particelle tramite interazioni non covalenti. In un ambiente in vivo, o anche in mezzi cellulari, gli anticorpi che sono fisicamente adsorbiti possono essere facilmente spostati.
Quindi, il metodo di coniugazione covalente è il regime più utilizzato. Esso fornisce un legame stabile tra la nanoparticella d’oro e l’anticorpo e possono essere impiegati diversi prodotti chimici come la N-idrossisuccinimmide (NHS) accoppiata con 1-Ethyl-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimide (EDC). Tuttavia, mentre questo metodo produce un attacco stabile, deve ancora essere caratterizzato.

Coniugazione direzionale per una migliore efficienza

La caratterizzazione delle nanoparticelle d’oro coniugate con anticorpi di solito comporta la stima del rapporto anticorpo a particelle confrontando le misure di fluorescenza di particelle coniugate con anticorpi marcati con fluorofori a standard di anticorpi marcati con fluorofori noti. La misura stessa può essere complicata dal quenching del fluoroforo sulla superficie delle nanoparticelle metalliche. Inoltre, i ricercatori devono anche preparare l’anticorpo coniugato con il fluoroforo e i suoi standard.

NanoHybrids può impiegare un metodo di coniugazione direzionale che allevia molti di questi problemi.
Per consentire l’attacco direzionale, un’estremità di una molecola crosslinker eterobifunzionale è legata alla regione Fc dell’anticorpo. L’altra estremità del linker si lega direttamente alla superficie della nanoparticella d’oro, fornendo un collegamento direzionale tra l’anticorpo e la particella. Usando questo metodo, si realizza un legame stabile tra la particella e l’anticorpo, lasciando la regione variabile (Fv), o il sito di interazione dell’antigene, stericamente non ostacolato e disponibile per il legame.
La natura direzionale del collegamento rende la caratterizzazione del rapporto anticorpo-particella più coerente e migliora anche l’efficienza di etichettatura delle cellule e il targeting molecolare. L’efficienza di etichettatura può essere aumentata da 7 a 10 volte usando un metodo di attacco direzionale rispetto a quello non direzionale. L’uso di nanoparticelle d’oro coniugate direzionalmente può produrre risparmi significativi sui costi, migliorare la produttività e accelerare la scoperta scientifica.

Servizi personalizzati di coniugazione degli anticorpi

Possiamo coniugare le nostre nanoparticelle d’oro con anticorpi, proteine o qualsiasi altra entità di vostra scelta. Forniamo anche supporto tecnico per i ricercatori che desiderano acquistare le nostre nanoparticelle d’oro e lavorare sulle coniugazioni. Contattateci oggi stesso per le vostre esigenze di coniugazione personalizzata.