オートラジオグラフ

生物学において、この技術は、代謝経路に導入、受容体や酵素に結合、または核酸にハイブリダイズした放射性物質の組織（または細胞）局在を決定するために使用されます。

Receptor autoradiographyEdit

受容体の組織分布を決定するための放射性標識リガンドの使用は、リガンドが循環投与（その後の組織除去および切片化）または組織切片に適用されている場合、それぞれ in vivo または in vitro 受容体オートラジオグラフィーと呼ばれています。 受容体密度がわかれば、in vitro オートラジオグラフィーは、放射性標識薬剤の受容体に対する解剖学的分布と親和性を決定するためにも用いることができる。 in vitro オートラジオグラフィーでは、放射性薬剤を被験者に投与することなく、凍結した組織切片に直接塗布します。 そのため、生体内での分布、代謝、分解の状況を完全に追跡することはできません。 しかし、凍結切片中の標的は広く露出し、放射性リガンドと直接接触することができるため、in vitro オートラジオグラフィーは、薬剤候補やPET、SPECTリガンドのスクリーニングに迅速かつ簡便な方法であることに変わりはない。 リガンドは一般に3H（トリチウム）、18F（フルオリン）、11C（炭素）、125I（放射性ヨウ素）などで標識されています。 in vitroと比較して、ex vivoオートラジオグラフィーは放射性リガンドを体内に投与した後に行われるため、アーチファクトが少なく、内部環境に近い。

放射性標識した相補的オリゴ核酸またはリボ核酸（「リボプローブ」）を用いて組織中のRNA転写物の分布を調べることはin situ hybridization histochemistryと呼ばれています。 DNAとRNAの放射性前駆体、それぞれ-チミジンと-ウリジンを生きた細胞に導入して、細胞周期のいくつかの段階のタイミングを決定することができる。 RNAやDNAのウイルス配列もこの方法で見つけることができる。 これらのプローブは通常32P、33P、または35Sで標識されている。 行動内分泌学の領域では、オートラジオグラフィーは、ホルモンの取り込みを決定し、受容体の位置を示すために使用することができる；動物に放射性標識したホルモンを注射することができ、研究はin vitroで実施することができる。 また、ファージ感染大腸菌のファージT4 DNA伸長速度も、37℃での指数関数的なDNA増加の期間中、オートラジオグラフィーで749 nucleotides/secと測定された。

タンパク質リン酸化の検出編集

リン酸化とはタンパク質の特定のアミノ酸に翻訳後にリン酸基を付加することを指し、このような修飾によって細胞内のタンパク質の安定性や機能は劇的に変化するとされている。 タンパク質のリン酸化は、タンパク質を適切なキナーゼとγ-32P-ATPでインキュベートした後、オートラジオグラフ上で検出することができる。 後者の放射性標識リン酸はタンパク質に取り込まれ、SDS-PAGEで分離され、ゲルのオートラジオグラフで可視化される。 (CREB結合タンパク質がHIPK2によってリン酸化されることを示した最近の研究の図3参照)

植物組織における糖の移動の検出編集

植物生理学において、オートラジオグラフィーは葉組織における糖蓄積を測定するために使用されることがある。 オートラジオグラフィーに関連する糖の蓄積は、植物で使用される葉茎負荷戦略を説明することができます。 例えば、葉の小脈に糖が蓄積している場合、その葉には形質膜の接続がほとんどないことが予想され、これはアポプラズム運動、または活発な葉茎負荷戦略を示している。 スクロース、フルクトース、マンニトールなどの糖類を, で放射性標識し、単純な拡散によって葉の組織に吸収させる。 その後、葉の組織をオートラジオグラフィーのフィルム（または乳剤）に露光し、画像を作成する。 葉脈に集中して糖が蓄積している場合（アポプラスティック運動）、画像ははっきりとした葉脈パターンを示し、葉全体に均一に糖が蓄積している場合（シンプラスティック運動）、画像は静止したようなパターンを示す。

その他の技術編集

このオートラジオグラフィーのアプローチは、同時計数、ガンマカウンターおよびその他の装置を慎重に使用することにより、放射線源の正確な3次元局在が得られるPETおよびSPECTなどの技術とは対照的である。 クリプトン-85は小さな亀裂に浸透させ、その存在をオートラジオグラフィーで検出する。 この方法は「クリプトンガス浸透探傷法」と呼ばれています。 このガスは、染色浸透探傷検査や蛍光浸透探傷検査で使用される液体よりも小さな開口部に浸透します

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