Albino Rabbit

Primary Irritation-Skin

化学物質の刺激性の検出に広く用いられている動物は、アルビノラビット、アルビノモルモット、白ネズミなどである。 化学物質を経皮的に反復塗布する場合、必ず局所的作用と全身的作用の両方を検出することが試験の目的である。 皮膚からの吸収が大きい場合は、LD50を測定することができる。 ウサギを使用する場合、試験の期間は、1回の薬剤塗布で最低3日間から最長2年間までと様々です。 試験が長期にわたる場合は常に、先に述べた一般的な長期試験と同様の方法で動物を追跡する、つまり、動物に血液学的検査、臨床化学的検査、尿検査を行う。 発がん性を評価する場合は、皮膚試験を2年間延長し、その間、少なくとも週に2回、薬剤を皮膚に塗布する

急性経皮試験は、通常3日間の試験である。 この試験は、2つの等しいグループに分けられた限られた数のアルビノウサギで実施されます。 首の付け根から後ろ足にかけての背中の部分を剃るか脱毛する。 一方のグループでは、約2インチ2の面積の素肌を、細胞の表層に小さな切り込みを入れることによって擦過する。 被験物質が液体の場合、0.5ml以下の被験物質を1×1インチのガーゼパッドの下に置き、擦過動物および非擦過動物の皮膚の削った部分の上に固定する。 固体の場合は、植物油や水などの適当な溶媒に溶かし、0.5gをガーゼパッドの下に導入する。 溶媒を使用する場合は、溶媒にのみ暴露された動物の対照群も試験に含める。 その後、一般に動物を拘束ストックで固定し、体幹全体を非吸収性のバインダーで包んで24時間経過させる。 24時間後にバインダーとパッドを取り除き、曝露部位を評価し、48時間後に再評価する。

皮膚への影響の評価には、ガーゼパッド適用部位の発赤の程度と浮腫の程度に関するスコアリングシステムを使用する。 使用される採点システムは、米国連邦危険物法の第191.11条で連邦官報に掲載されたものが一般的です。 採点では、紅斑の程度と浮腫の形成の程度について、以下のように別々の番号を相対的に割り当てる。 紅斑なし、0；軽微でほとんど感じられない紅斑、1；明瞭な紅斑、2；中程度から重度の紅斑、3；および深部の損傷を伴う重度の赤色の紅斑、4；浮腫なし、0；端が盛り上がっている軽微でほとんど感じられない浮腫、2；表面が約1mm盛り上がっている中程度の浮腫、3；以前より盛り上がっており曝露領域より広がっている重度の浮腫、4；です。 各採点期間、擦過面および無傷の皮膚について、紅斑と浮腫の両方について得られたスコアをリストアップし、各グループおよび効果の種類ごとの平均を計算する。 各効果（紅斑と浮腫）の平均値は4つであるため、8つの平均値を合計して4で割り、最終的な数値が一次刺激性スコアとなる。 3504＞＜7765＞3ヵ月間の長期反復投与試験において、雌雄の若いアルビノウサギを無作為に3～6匹ずつ3群に分け、同数の対照動物を加えた後、各群の平均値を算出する。 各群の少なくとも2匹の動物の皮膚の露出部を擦過する。 試験物質を週5日、合計60回、皮膚に直接塗布する。 各動物の胴体全体を前回の試験と同様に包み、粘着テープで固定する。 被験物質の摂取を防ぐため、動物に首輪を装着する。 試験中、観察された局所作用のスコアリングを一定時間ごとに行い、動物の全身的な影響を観察する。 曝露シーケンスの最後に、動物を殺し、完全な剖検を行う。

化学物質の反復局所投与による発がん性の影響を調べるには、3カ月から2年までの様々な期間の試験がある。 一般に使用される動物は白ネズミで、試験には陽性対照群と陰性対照群に加え、薬剤の高用量濃度と低用量濃度に割り当てられた最低2つの試験群を含む。 各群の動物数は、25～50匹の雄と同数の雌で、すべて個別に収容される。 各動物の皮膚は首の付け根の後ろ側と肩甲骨の間が剃られる。 薬剤を塗布するか、ピペットから滴下して、皮膚に付着させる。 1回の塗布量は0.1mlで、実験期間中、週2回処理する。 実験期間中に生存した動物および実験中に発病した動物を剖検する。 病理組織学的検査は、従来の慢性毒性試験と同様に全組織について行う。 特に、試験期間中の動物の皮膚腫瘍の出現と性質について評価することに注意が払われる。 これらの試験は一般的に、試験対象の化学物質が腫瘍の発生を開始または促進することによって作用するかどうかを検出するための手順を含むように修正される

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