Kansas State University

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2019年3月

Rheumatoid Factor (RF) and Anti-nuclear Antibody (ANA) in Diagnosis of Autoimmune Disorders in Veterinary Patients

博士によるもの。 Brandy Kastl and Nora Springer

獣医療における自己免疫疾患の診断は、困難な場合があります。 自己免疫疾患が疑われる場合、血清自己抗体価、特にリウマトイド因子（RF）および／または抗核抗体（ANA）がしばしば採用されます。 しかし、これらの検査は、完全な臨床像との関連で解釈される場合に、最大の診断的有用性を発揮する。 自己抗体の検出の長所と短所を理解することは、陽性結果の正確な解釈を可能にする。 この記事では、RFとANAの両方の臨床的有用性を示す例として、多発性関節炎の診断ワークアップを使用する。

血清RFおよびANA力価は、犬の免疫介在性多発性関節炎を疑う診断ワークアップでよく利用される（表1-犬の多発性関節炎の診断アプローチ参照）。 多発性関節炎の診断には、動物種を問わず、まず患部関節のX線写真と滑液の分析が必要である。 X線写真は、関節炎病変が侵食性（すなわち骨病変）か非侵食性（すなわち骨病変がない）かを決定するものである。 一方、滑液の分析では、炎症と、時には感染性の有機体を同定します。 滑液中に顕微鏡で見える微生物がいないからといって、感染性の病因を除外することはできないので、適切な感染症検査が必要である。 最終的には、X線写真の病変の特徴、滑液の所見、および付随する感染症検査の結果を組み合わせることで、犬多関節炎の鑑別リスト（表1参照）を絞り込むことができる。 病変の特徴が合致し、感染症が除外された場合、RFとANAの両力価は、それぞれ関節リウマチ（RA）と全身性エリテマトーデス（SLE）の診断にさらなる裏付けを与える。

Figure 1: Rheumatoid Factor Schematic

Rheumatoid arthritisは、特定できる感染性の病因がない侵食性、好中球性の多関節炎例で検討されるべきものです。 RA の診断に関する追加情報は、2010 ACR-EULAR Classification Criteria for Rheumatoid Arthritis の中の www.rheumatology.org で見つけることができ、これは動物種に適用できると考えられている。 RAでは、IgG抗体のフラグメント結晶化可能領域（Fc）に対する自己抗体が蓄積される（図1）。 これらのIgM、IgA、IgG自己抗体は、総称してリウマトイド因子（RF）と呼ばれる。 正常な状態では、RFは免疫反応に伴う抗体-抗原複合体の除去を促進する。 この正常な免疫機能のため、血清RF価の上昇はRAを予知するものではなく、ごく一部の健常人や他の慢性炎症疾患を持つ人に認められることがある。 RA患者では、関節の炎症が始まった後に過剰なRFが産生され、その後、関節組織内に免疫複合体が沈着することによって関節炎を形成する。 このようなRFの蓄積の遅れのために、RA患者のごく一部はRFの力価が陰性となる。 RAとは対照的に、全身性エリテマトーデス（SLE）は、非びらん性炎症性多発性関節炎を引き起こす。 犬では、SLEの診断は自己免疫に関連した2つ以上の臨床症状（表2：犬のSLEの診断基準案）と血清ANA力価>1：160の組み合わせで行われることが多い。 抗核抗体（ANA）とは、ヒストンやDNAなどの様々な核内抗原に対する自己抗体の総称である。 RFと同様に、血清ANA抗体陽性はSLEの診断の決め手にはなりません。 ANA陽性は健康な人にもみられますし、慢性炎症（例：アトピー性皮膚炎、ドーベルマン肝炎）、感染症（例：エーリキア症、リーシュマニア症）、新生物、薬剤（例：スルホンアミド、ペニシリン、テトラサイクリン）にも関連していることがあ ります。 したがって、血清ANAの検出は、SLEが強く疑われる臨床例のみにとどめておくべきです。 核抗原は哺乳類間でよく保存されているので、イヌのKSVDLにおけるANA力価は、ラット肝細胞を基質とした間接蛍光抗体法によって測定される（図2）。 患者の血清を連続的に複数回希釈し、ラット肝細胞の薄い調製液とインキュベートする。 血清中に含まれるANAはラット肝細胞の核に結合する。 次に、蛍光標識した二次抗体を加え、患者の抗体（すなわちANA）が核抗原と複合体化した状態を強調する（図2）。

Figure 2A.に示す。 イヌ血清ANA力価の間接蛍光抗体検出の模式図（縮尺なし）

図2B.イヌ血清ANA力価の間接蛍光抗体検出の模式図（縮尺なし）

図3.イヌ血清ANA力価の間接蛍光抗体検出の模式図（縮尺なし 免疫蛍光が核に局在する陽性試験結果。

結論として、血清RFおよびANA力価は、自己免疫疾患の診断に有用である可能性がある。 重要なことは、血清RFとANAの両力価は、それぞれ関節リウマチと全身性エリテマトーデスに適合する臨床症状を持つ患者に限って行うべきであるということである。 感染症、他の自己免疫疾患、腫瘍性疾患は、これらの検査を行う前に、また特に陽性結果を解釈する前に、効果的に除外されるべきです。 KSVDL臨床免疫学研究所は現在、イヌの血清RFおよびANA力価の有効な商業的検出を提供している。 血餅から分離された約1-3mLの血清を新鮮なレッドトップチューブに入れ、検査に使用する。 分離後の血清は冷蔵庫で保管し、採取後1-2日以内に保冷剤を入れて発送してください。 これらの検査に関するその他のご質問は、KSVDLクライアントケア（1-866-512-5650または785-532-5650）までお問い合わせください。 犬の多発性関節炎の診断アプローチ

表2：犬のSLEの診断基準案