Validation of ADCC assay using human primary natural killer cells to evaluate an biotherapeutic products bearing an Fc region

バイオ医薬品の開発は、その品質特性を評価するための分析手法の継続的改善を必要としている。 バイオ医薬品の一部は、標的細胞の膜上に露出している、あるいは可溶性で循環している特定の抗原と相互作用するように設計されており、抗体依存性細胞傷害性（ADCC）などのメカニズムを誘導するエフェクター細胞がそのFc領域を認識することによってエフェクター機能が達成される。 したがって、ADCC誘導は、バイオ医薬品の有効性を保証するために評価されなければならない重要な品質特性（CQA）である。 ADCCの誘導は、末梢血単核細胞（PBMC）や遺伝子改変細胞株（トランスフェクションしたNKやJurkat細胞など）といった異なるソースのエフェクター細胞を用いることで評価でき、検出や結果の解釈も、用いるエフェクター細胞の種類によって異なるアプローチをとることが可能である。 この点で、アッセイのバリデーションは、意図された目的に応じて結果の信頼性を確保するために関連するものである。 ここでは、エフェクター細胞として新鮮な血液から得た初代NK細胞を用い、フローサイトメトリーにより細胞死を検出することで、3つのバイオ治療用タンパク質の効力を調べるADCCアッセイの標準化とバリデーションを紹介する。 修飾細胞ではなくプライマリーNKを用いる利点は、細胞毒性を直接的に評価できるため、生体内で起こる反応に近いということである。 その結果、すべてのケースにおいて、アッセイは正確で精密かつ特異的なパラメータに従った特徴的なシグモイド線量／反応曲線を示しました。 このように、ADCCアッセイは、この種のバイオ医薬品の生物学的活性を評価するための適切な代替法であると言えます。