Antiatherogene en Anti-Ischemische Eigenschappen van Traditionele Chinese Geneeskunde Xinkeshu via Endotheel Beschermende Functie

3.5. Immunohistochemische studies van eNOS en VCAM-1 op de kransslagader

In de controlegroep konden de eNOS-positieve kleuring worden waargenomen in het cytoplasma van de coronaire intimale laag. De aanwezigheid van eNOS was aanzienlijk verminderd () in Model groep vergeleken met Control. XKS en Atorvastatine behandeling verhoogden significant het bestaande eNOS vergeleken met Model. Atorvastatine was effectiever () dan XKS (figuur 7).

Figuur 7

Bestaan van eNOS en VCAM-1 op de kransslagader door immunohistochemische kleuring (lichtmicrofoto’s, 400×).

In de controlegroep werden positieve VCAM-1-kleuring zelden waargenomen in de volledige wand van de kransslagader. In de modelgroep kon het echter grotendeels worden waargenomen in collageenfibrillen en schuimcellenrijke gebieden van de vaatwand, en de bestaande VCAM-1 was significant () verhoogd ten opzichte van de controlegroep. XKS en Atorvastatine behandeling verminderden het VCAM-1 significant in vergelijking met de Model groep. XKS was effectiever () dan Atorvastatine (figuur 7).

4. Discussie

CAM met inbegrip van kruidengeneeskunde heeft een wereldwijde populariteit verworven in de afgelopen 20 jaar. Er wordt beweerd dat patiënten met chronische aandoeningen, waaronder hart- en vaatziekten, waarschijnlijk gebruik maken van CAM . Kruidengeneeskunde is de methode met het gebruik van geneeskrachtige planten of kruiden voor de preventie en behandeling van ziekten, en het varieert van traditionele en populaire medicijnen van elk land tot het gebruik van gestandaardiseerde en getitreerde kruidenextracten.

XKS tablet werd op grote schaal gebruikt voor de behandeling van CHD door de traditionele beoefenaars in China meer dan tien jaar . Uit klinisch onderzoek bleek dat XKS veel biologische activiteiten had, waaronder het verbeteren van de variabiliteit van de hartslag, het verminderen van de episode van angina pectoris, het verbeteren van de arteriële elasticiteit. Ondertussen onthulde farmacologisch basisonderzoek dat XKS-toediening een verscheidenheid aan therapeutische effecten had, zoals verlaging van het myocardiale zuurstofverbruik, verlaging van het lipidegehalte en antiapoptose.

In de huidige studie werd atorvastatine gekozen als een positieve controle therapie. De bevindingen toonden aan dat atorvastatine behandeling gedurende 12 weken zeer effectief was in het verlagen van het plasma TC en LDL-niveau, het verhogen van het HDL-niveau, het verminderen van experimentele myocardiale ischemie, het redden van EDVR, en het remmen van atherosclerotische vooruitgang. Behandeling met XKS gedurende 12 weken had een vergelijkbaar effect op de redding van EDVR en de remming van atherosclerotische progressie als atorvastatine. Zelfs XKS was effectiever in het voorkomen van myocardiale ischemie en het behouden van het hartritme dan atorvastatine. Misschien waren deze eigenschappen de belangrijkste mechanismen van XKS voor de behandeling van klinische angina pectoris en aritmie. Aan de andere kant was een van de belangrijke bevindingen in de huidige studie dat er geen significante veranderingen in lipidenprofielen optraden bij de konijnen die met XKS toegediend kregen. Met andere woorden, XKS vertoonde geen lipoproteïne verlagend effect op de door H-ChE dieet veroorzaakte hypercholesterolemie.

Het is bekend dat endotheelschade een sleutelgebeurtenis is in de pathogenese van atherosclerose. Atherosclerose kan worden geïnduceerd door een eenvoudige disfunctie van de endotheelbekleding, zoals die optreedt bij hypercholesterolemie. De homeostase van de endotheelcellen wordt grotendeels in stand gehouden door de synthese van stikstofmonoxide (NO), een krachtige vaatverwijder die door eNOS wordt gesynthetiseerd. NO heeft belangrijke functies, waaronder regulering van de vasculaire tonus en de regionale bloedstroom en onderdrukking van de proliferatie van vasculaire gladde spiercellen. eNOS wordt beïnvloed door verschillende stimuli, waaronder hypoxie, schuifspanning, LDL, en de ontwikkeling en progressie van atherosclerose. De afnemende expressie of inactivering van eNOS wordt erkend als een cruciale factor in de ontwikkeling van endotheeldisfunctie . De belangrijke rol van vasculaire adhesiemoleculen in atherosclerose is ontdekt en deze moleculen spelen een belangrijke rol in de adhesie van circulerende leukocyten aan endotheel, hetgeen de eerste stap is in de initiatie van atherosclerose . VCAM-1 is een transmembraan glycoproteïne dat tot expressie komt op plaatsen die gevoelig zijn voor atherosclerose, nog voor de ziekte macroscopisch zichtbaar is, met persisterende expressie in meer gevorderde atherosclerotische laesies. Atherogene voeding kan snel VCAM-1 expressie in aorta endotheel in aorta orgaanculturen induceren.

Volgens de nieuwe eigenschap van anti-atherogene en anti-ischemia niet via antihyperlipidemie pathway, richtten we ons op endotheelbescherming als het doelwit om het inderdaad mechanisme van XKS te onderzoeken. eNOS en VCAM-1 werden gekozen als respectievelijk anti-atherogene en atherogene factoren. De bevindingen toonden aan dat 12 weken H-ChE dieet zowel een afnemende expressie van eNOS als een toenemende expressie van VCAM-1 veroorzaakte tijdens de procedure van atherosclerose. Atorvastatine en XKS behandeling toonden beide vasculaire beschermende eigenschappen door de expressie van eNOS en VCAM-1 te veranderen. Daarom was een significante bescherming van de endotheelvaten waarschijnlijk een van de belangrijke mechanismen die betrokken zijn bij de cardioprotectieve eigenschappen van XKS.

XKS bevat 5 geneeskrachtige kruidenbestanddelen, en wel Salvia miltiorrhiza Bunge, Panax notoginseng (PN), Fructus Crataegi, Radix Puerariae, en Radix Aucklandiae (tabel 3). De materialen werden aanvankelijk met een micronisator tot een fijn poeder vermalen en als tabletten bereid, die werden geauthenticeerd en gestandaardiseerd op basis van de markerverbindingen in de Chinese Farmacopee 2010 . Verschillende groepen monomeren met speciale biologische activiteiten werden uit elk afzonderlijk bestanddeel geëxtraheerd, bijvoorbeeld het afzwakken van longfibrose van PN extract, het verlagen van plasma cholesterol van Hawthorn extract, het verbeteren van insulineresistentie van Puerarin extract, en het afzwakken van idiopathisch oedeem van radix Aucklandiae extract. Volgens de theorie van TCM, werd Salvia miltiorrhiza Bunge beschouwd als een soort van “hoofdgeneesmiddel”, Panax notoginseng als “ministeriële drug”, en de andere 3 componenten dienden als “aanvullend geneesmiddel” onder de componenten van XKS . Tanshinone IIA was een van de belangrijkste monomeerbestanddelen van Salvia miltiorrhiza Bungextract. De biologische activiteiten van Tanshinone IIA waren over het verminderen van myocardiaal zuurstofverbruik , dilatatie van kransslagaders , en het verbeteren van neuronregeneratie , antihypertensie , en antioxidant .

In de huidige studie hebben we XKS als één “geneesmiddel” beschouwd en hebben we de farmacologische werking van alle bestanddelen samen onderzocht. Hoewel de resultaten van deze studie een aanzet gaven tot verder onderzoek naar de therapeutische werking van XKS, moest de relatie tussen deze componenten en hun interacties nog worden opgehelderd. Dit waren de belangrijkste beperkingen van de huidige studie. Daarom moeten het gedetailleerde moleculaire mechanisme van XKS en verdere studies in dieren over de farmacologische van de werkzame bestanddelen en metabolieten worden onderzocht.

5. Conclusie

In conclusie werd expliciet aangetoond dat TCM XKS krachtige anti-atherogene en anti-ischemische eigenschappen uitoefende op het atherosclerotische myocardiale ischemie konijnenmodel. Een endotheel beschermend effect kan betrokken zijn bij het mechanisme naast het antihyperlipidemische effect. Wij zijn van mening dat een beter begrip van de mechanismen waarmee XKS endotheel beschermt en de interacties van actieve ingrediënten kunnen leiden tot nieuwe farmacologische CAM-interventies voor CHD-patiënten.

Acknowledgments

Deze studie werd ondersteund door het Major State Basic Research Development Program (G2000056905), National Natural Science Foundation (No. 81073021), en Education Ministry Science Foundation (108019) van China. Xu Tao en Peng Jing-bo hebben gelijkelijk bijgedragen aan dit werk.