DETECTION OF ANTI-NEUTROPHIL ANTIBODIES

Neutrofiel antilichamen kunnen een verscheidenheid van aandoeningen veroorzaken waaronder neonatale immuun neutropenie, auto-immuun neutropenie, immuun neutropenie na beenmergtransplantatie, drug-geïnduceerde immuun neutropenie en transfusie-gerelateerde acute longschade. Er is momenteel geen enkele techniek beschikbaar die alle klinisch relevante neutrofiele antilichamen aantoont. Een combinatie van granulocytenagglutinatie en immunofluorescentietests is momenteel de meest doeltreffende manier van opsporing. Wegens de autolytische neiging van opgeslagen neutrofielen moeten verse, zorgvuldig geïsoleerde neutrofielen als testcellen worden gebruikt. De testneutrofielen moeten worden getypeerd voor de neutrofiele antigenen NA1, NA2, NB1, SH, en 5b. Indien het niet mogelijk is de specificiteit van het allo-antilichaam te bepalen aan de hand van het reactiepatroon met getypeerde testcellen, moet het serum worden getest met een antigeenspecifieke assay op basis van monoklonale antilichaam-specifieke immobilisatie van granulocyten (MAIGA assay). Om omslachtige celisolatie voor de identificatie van alloantilichamen te vermijden, hebben wij stabiele zoogdiercellijnen ontwikkeld die de neutrofiele antigenen NA1, NA2, en SH tot expressie brengen. Ongeveer 30% van de neutrofiele autoantilichamen binden zich bij voorkeur aan het NA1-antigeen en worden het best gedetecteerd met neutrofielen van NA1-homozygote donoren of met zoogdiercellen die NA1 tot expressie brengen. Autoantilichamen worden tijdens de eerste ronde van antilichaamscreening slechts in 74% van de sera opgespoord. Anderzijds kan een positieve directe antilichaamtest van de neutrofielen van de patiënt niet worden beschouwd als bewijs voor de aanwezigheid van autoantilichamen omdat de neutrofielen van de patiënt gewoonlijk geactiveerd zijn met verhoogde expressie van complement en Fcyreceptoren wat resulteert in niet-specifieke IgG-binding. Daarom blijft het met tussenpozen testen van de sera van de patiënt op ongebonden neutrofiele antilichamen de beste manier om auto-antilichamen op te sporen.