NanoHybrids – Antilichaam Conjugation for Gold Nanoparticles
Antilichaam geconjugeerde gouden nanodeeltjes sondes zorgen voor de studie en visualisatie van cellulaire en moleculaire processen in vitro en in vivo, een kritische tool voor zowel basiswetenschappen onderzoekers en clinici.
Veel onderzoekers besteden veel tijd en energie aan het zelf synthetiseren van deze conjugaten met wisselende mate van succes en inconsistente resultaten. De meeste vinden dat terwijl het uitvoeren van conjugaties op hun eigen, ze lijden aan inconsistente antilichaam-to-deeltje gehechtheid en niet-reproduceerbare cel labeling efficiëntie.
Het oplossen van het eerste probleem van inconsistente antilichaam-naar-deeltje gehechtheid vereist zowel:
(1) creatie van een stabiele koppeling tussen het deeltje en het antilichaam en
(2) een goede karakterisering van de antilichaam attachment.
Om een stabiele koppeling te maken, moeten antilichamen covalent worden gekoppeld aan het oppervlak. Het onderstaande schema toont verschillende methoden voor antilichaamconjugatie.
De fysische adsorptiemethode is de minst stabiele. Deze berust op de affiniteit van bepaalde functionele groepen op eiwitten, zoals aminen en thiolen, om via niet-covalente interacties te worden aangetrokken tot het deeltjesoppervlak. In een in vivo omgeving, of zelfs in celmedia, kunnen antilichamen die fysisch worden geadsorbeerd, gemakkelijk worden verplaatst.
Dus is de covalente conjugatiemethode de meest gebruikte regeling. Zij zorgt voor een stabiele koppeling tussen het goudnanopartikel en het antilichaam en er kunnen verschillende chemische verbindingen worden gebruikt, zoals N-Hydroxysuccinimide (NHS) gekoppeld aan 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC). Echter, terwijl deze methode produceert een stabiele gehechtheid, moet het nog worden gekarakteriseerd.
Directionele Conjugatie voor een betere efficiëntie
Karakterisering van antilichaam geconjugeerde gouden nanodeeltjes meestal gaat om het schatten van het antilichaam op deeltjes verhouding door het vergelijken van fluorescentie metingen van fluorofoor-gelabelde antilichaam geconjugeerde deeltjes met bekende fluorofoor-gelabelde antilichaam normen. De meting zelf kan worden gecompliceerd door de quenching van de fluoroforen aan het oppervlak van de metalen nanodeeltjes. Bovendien moeten onderzoekers ook het fluorofoor-geconjugeerde antilichaam en zijn standaarden voorbereiden.
NanoHybrids kunnen een directionele conjugatiemethode toepassen die veel van deze problemen verlicht.
Om directionele hechting mogelijk te maken, is één uiteinde van een heterobifunctionele crosslinkermolecule gebonden aan het Fc-gebied van het antilichaam. Het andere uiteinde van de linker bindt direct aan het goud nanodeeltje oppervlak, waardoor een directionele linkage tussen het antilichaam en het deeltje. Met behulp van deze methode wordt een stabiele koppeling tussen het deeltje en het antilichaam gerealiseerd, terwijl het variabele gebied (Fv), of antigeen-interactieplaats, sterisch ongehinderd en beschikbaar voor binding blijft.
De directionele aard van de koppeling maakt karakterisering van de verhouding tussen antilichaam en deeltje consistenter en verbetert ook de cellabelingsefficiëntie en moleculaire targeting. De etiketteringsefficiëntie kan met een factor 7 tot 10 worden verhoogd door gebruik te maken van een gerichte hechtingsmethode in plaats van een nietgerichte. Met behulp van directioneel geconjugeerde gouden nanodeeltjes kan aanzienlijke kostenbesparingen opleveren, de productiviteit verhogen en wetenschappelijke ontdekkingen versnellen.
Aangepaste antilichaamconjugatiediensten
Wij kunnen onze gouden nanodeeltjes conjugeren met antilichamen, eiwitten of andere moeheden van uw keuze. Wij bieden ook technische ondersteuning voor onderzoekers die onze gouden nanodeeltjes willen kopen en aan de conjugaties willen werken. Neem vandaag nog contact met ons op voor uw aangepaste conjugatie-eisen.