Pathologische veranderingen veroorzaakt door Anoplocephala perfoliata in de ileocecale junctie bij paarden
Eénendertig paarden van gemengde rassen, variërend van 15 maanden tot 13 jaar oud en regelmatig naar slachthuizen gestuurd, werden willekeurig geselecteerd voor deze studie. Er waren 11 parasietvrije dieren (controlegroep) en 20 paarden met een spontane A. perfoliata infectie. Bij alle paarden werd de ileocecale junctie afgenomen binnen 30 minuten na overlijden. Vervolgens werden de darmmonsters in stromend water gespoeld en onmiddellijk in 10% neutraal gebufferde formaline gelegd. Ondertussen werden de volwassen lintwormen die aan de ileocecale overgang vastzaten direct geteld, geregistreerd, gespoeld in stromend water en geconserveerd in een 10% formalineoplossing. De verzamelde lintwormen werden in een lactofenoloplossing gelegd en vervolgens op objectglaasjes gemonteerd om aan de hand van morfologische parameters te worden geïdentificeerd (Euzeby 1981). Op basis van het aantal vastgestelde lintwormen werden de 31 geselecteerde paarden in vier groepen verdeeld: groep “N”, met 0 lintwormen; groep “A”, met 1 tot 20 lintwormen; groep “B”, met lintwormen variërend van 20 tot 100; en groep “C”, met meer dan 100 lintwormen.
Van elk monster werden 5 µm dikke paraffine-ingebedde secties gekleurd met hematoxyline-eosine en cresyl violet. Histologisch onderzoek werd uitgevoerd om de volgende parameters te evalueren: lymfomonocytische en eosinofiele ontstekingsinfiltratie in de mucosa/submucosa, atrofie/fusie van darmvlokken, erosieve/ulceratieve laesies, degeneratieve veranderingen van gobletcellen, en intestinale lymfatische follikelhyperplasie. Aan elke geselecteerde parameter werd een score toegekend: 0, geen laesies; 1, lichte laesies; 2, matige laesies; en 3, uitgesproken laesies. Bijgevolg werd, op basis van de som van de genoteerde scores, de mucosale en submucosale schade als volgt gegradeerd: 0 (geen veranderingen) met 0-2 punten; I (milde veranderingen) met 3-7 punten, II (matige veranderingen) met 8-12 punten, en III (duidelijke veranderingen) met 13-15 punten.
Bij de ileocecale junctie werden de diktes van de circulaire en longitudinale spierlagen gekwantificeerd door beeldanalyse (NIS-Elements Br-2) om hypertrofische condities te identificeren. Voor elk monster werd ENS histopathologisch onderzoek beoordeeld door morfometrische evaluatie om de gemiddelde lineaire dichtheid voor myenterische ganglia, het aantal neuronale cellen, en het gemiddelde percentage van chromatolytische / necrotische neuronale cellen in drie 3-cm seriële secties te beoordelen.
Een algemeen lineair model (GLM) werd gebruikt om een significante correlatie tussen de parasitaire last en histopathologische sortering van de mucosale en submucosale laesies te verifiëren. Een eenwegs variantieanalyse (ANOVA) gevolgd door Tukey’s Meervoudige Vergelijkingstest werden gebruikt om significante verschillen op te sporen tussen het aantal myenterische ganglia, het aantal neuronale cellen, het percentage chromatolytische/necrotische neuronen, de dikte van de spierlagen, en de geïdentificeerde groep op basis van het aantal opgenomen lintwormen. Vijf procent was het veronderstelde significantieniveau. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van R 2.7 versie software (GNU GENERAL PUBLIC LICENSE, Free Software Foundation, Inc., Boston, USA).