Amfotropowe i VSV-G-pseudotypowe wektory retrowirusowe transdukują ludzkie hematopoetyczne komórki progenitorowe z podobną wydajnością

Jednym z ograniczeń retrowirusowego transferu genów do hematopoetycznych komórek macierzystych jest niski poziom receptora wirusa amfotropowego. W obecnym badaniu sprawdziliśmy, czy wektory retrowirusowe pseudotypowane z białkiem G wirusa pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej (VSV) mogą przezwyciężyć to ograniczenie. Ludzkie komórki progenitorowe oczyszczone za pomocą kulek magnetycznych i sortowania komórek transdukowano wektorem retrowirusowym amfotropowym lub VSV-G-pseudotypowym, zawierającym skrócony ludzki receptor czynnika wzrostu nerwów jako gen markerowy. Komórki były wstępnie stymulowane ligandem flt-3, czynnikiem komórek macierzystych oraz interleukiną-3 i transdukowane na fibronektynie. Ekspresję genów markerowych analizowano metodą cytometrii przepływowej. Wydajność transdukcji wirusa amfotropowego i VSV-G-pseudotypowego do komórek CD34+ nie różniła się istotnie. Transfer genu do komórek CD34+CD38-, które są wzbogacone w bardziej niedojrzałe progenitory, nie był ograniczony, a wydajność transferu dla tego podzbioru była również podobna dla obu pseudotypów. Dodatek fibronektyny znacznie poprawił transfer genów z wektora amfotropowego (5- do 19,3-krotnie, średnio 12,6), podczas gdy efekt dla pseudotypu VSV-G był znacznie mniej wyraźny (1- do 3,9-krotnie, średnio 2,1, P = 0,04). Podsumowując, wysoki poziom transferu genów do ludzkich progenitorów hematopoetycznych został osiągnięty przy użyciu zoptymalizowanego protokołu transdukcji, a wydajność transdukcji nie mogła być dalej poprawiona przez użycie VSV-G-pseudotypów. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.

.