Antiatherogenic and Anti-Ischemic Properties of Traditional Chinese Medicine Xinkeshu via Endothelial Protecting Function
- Abstract
- 1. Introduction
- 2. Materiały i metody
- 2.1. Leki i odczynniki
- 2.2. Zwierzęta i projekt eksperymentalny
- 2.3. Analiza lipoprotein w osoczu
- 2.4. ECG Test on VP-Induced Myocardial Ischemia Model
- 2.5. Ocena EDVR
- 2.6. Badania histomorfologiczne
- 2,7. Immunohistochemical Studies of eNOS and VCAM-1 on Coronary Artery
- 2,8. Statistical Analysis
- 3. Wyniki
- 3.1. Analiza lipoprotein w osoczu
- 3.2. ECG Test on VP-Induced Myocardial Ischemia Model
- 3.3. Ocena EDVR
- 3.4. Badania histomorfologiczne
- 3.5. Immunohistochemistry Studies of eNOS and VCAM-1 on Coronary Artery
- 4. Dyskusja
- 5. Wnioski
- Podziękowania
Abstract
Including herbal medicine, complementary and alternative medicine (CAM) is popular worldwide. Tradycyjna medycyna chińska xinkeshu jest szeroko stosowana w leczeniu choroby wieńcowej serca w Chinach. Badanie to zostało zaprojektowane w celu zbadania efektu ochronnego i prawdopodobnego mechanizmu działania tabletki xinkeshu na miażdżycowe niedokrwienie mięśnia sercowego królika. Króliki zostały podzielone na cztery grupy (każda) i karmione różnymi dietami przez 12 tygodni: Control (dieta standardowa), Model (dieta wysokocholesterolowa), XKS (dieta wysokocholesterolowa z dodatkiem 184,8 mg/kg/d xinkeshu), oraz Atorvastatin (dieta wysokocholesterolowa z dodatkiem 5,0 mg/kg/d atorwastatyny). Oceniano stężenie lipoprotein w osoczu, EKG, relaksację naczyń zależną od śródbłonka, badanie histomorfologiczne oraz ekspresję eNOS i VCAM-1 na tętnicach wieńcowych. Wyniki wykazały, że podobnie jak atorwastatyna, xinkeshu wykazywało znaczący wpływ na ratowanie relaksacji naczyń zależnej od śródbłonka, hamowanie postępu miażdżycy, zapobieganie niedokrwieniu mięśnia sercowego oraz zmianę ekspresji eNOS i VCAM-1. Jednakże xinkeshu nie wykazało efektu obniżenia poziomu lipoprotein u królików z hipercholesterolemią. Wyniki obecnego badania wskazują, że xinkeshu wywiera silne właściwości przeciwmiażdżycowe i przeciwniedokrwienne na miażdżycowe niedokrwienie mięśnia sercowego królika. Efekt chroniący śródbłonek może być zaangażowany w mechanizm inny niż efekt antyhiperlipidemiczny.
1. Introduction
Coronary heart disease (CHD) is caused by atherosclerosis mainly, and high cholesterol levels play an important role in the onset of this disease . Przyczyny miażdżycy wydają się być retencja lipidów, utlenianie i modyfikacja, które prowokują przewlekły stan zapalny w podatnych miejscach w ścianach wszystkich głównych tętnic przewodzących. Chociaż poczyniono znaczne postępy w zmniejszaniu śmiertelności z powodu CHD, stan ten pozostaje główną przyczyną zgonów na całym świecie. Statyny są najsilniejszymi lekami w tej dziedzinie. Badania wykazały, że statyny mogą nie tylko obniżać poziom lipoprotein o małej gęstości (LDL), ale także podwyższać poziom lipoprotein o dużej gęstości (HDL) i poprawiać funkcję śródbłonka naczyniowego. Jednak dysfunkcja wątroby i mioliza jako skutki uboczne stosowania statyn spowodowały, że niektórzy pacjenci wycofali się z leczenia. Medycyna komplementarna i alternatywna (CAM), w tym ziołolecznictwo, jest popularna w populacji ogólnej na całym świecie. Wiele ziół lub roślin o silnych składnikach leczniczych zostało przebadanych pod kątem ich właściwości antyhiperlipidemicznych, antyoksydacyjnych i przeciwmiażdżycowych. Stosowanie leków ziołowych w leczeniu różnych zaburzeń, w tym chorób serca, ma długą i bogatą historię.
W Chinach, Tradycyjne chińskie produkty ziołowe z niskimi skutkami ubocznymi są wysokiego zainteresowania jako CAM terapii do CHD . Tradycyjna medycyna chińska (TCM) xinkeshu (XKS) w tabletce jest receptą złożoną sformułowaną zgodnie z teorią meridianów TCM i zatwierdzoną w 2005 r. przez Państwową Agencję Żywności i Leków Chin jako leczenie dusznicy bolesnej i pacjentów z arytmią w klinice. Tutaj dalej badaliśmy mechanizm leczenia tabletką XKS królików z miażdżycą. Wyniki można podsumować w następujący sposób: poziomy lipoprotein w osoczu krwi; badanie EKG, wskaźnik ciężkości niedokrwienia mięśnia sercowego; relaksacja naczyń zależna od śródbłonka (EDVR); badania histomorfologiczne; ekspresja śródbłonkowej syntazy tlenku azotu (eNOS) i cząsteczki adhezji komórek naczyniowych 1 (VCAM-1) na tętnicach wieńcowych, markery funkcji śródbłonka
2. Materiały i metody
2.1. Leki i odczynniki
XKS tabletki pochodziły z Wo Hua Pharmaceutical Co, CHN. Cholesterol pochodził z Tian Qi Chemical Engineering Co, CHN. Atorwastatyna pochodziła z Jia Lin Pharmaceutical Co, CHN. Vasopressin (VP), phenylephrine (PE), and acetylcholine (Ach) were from Sigma, USA. Poliklonalne immunohistochemiczne kozie przeciwciała anty-rabbitowe eNOS i VCAM-1 pochodziły z Santa Cruz, USA. Zestaw streptawidyna/peroksydaza i biotynylowana mysia anty-kozia IgG pochodziły z Boster, Chiny.
2.2. Zwierzęta i projekt eksperymentalny
Króliki japońskie z dużym uchem ( kg, w wieku 3 tygodni, samce) zakupiono w Instytucie Zwierząt Laboratoryjnych Chińskiej Akademii Nauk Medycznych. Były one trzymane w pojedynczych pomieszczeniach w cyklu światło-ciemność 12 : 12 h, temperatura-(°C) i wilgotność () kontrolowane specyficzne środowisko wolne od patogenów, z wodą dostępną ad libitum. Wszystkie protokoły opieki nad zwierzętami i protokoły eksperymentalne były zgodne z zasadami zarządzania zwierzętami Chińskiego Ministerstwa Zdrowia, a badanie zostało zatwierdzone przez komisję etyki zwierząt Chińskiej Akademii Nauk Medycznych. Granulat standardowej diety i granulat diety z estrem wysokocholesterolowym (H-ChE), który zawiera 2% cholesterolu (240-280 g/d) dla królików został przygotowany przez Beijing Scientific Animal Feedstuff Company.
Króliki podzielono na 4 grupy ( na grupę), a projekt doświadczenia przedstawiono na rysunku 1.
Projekt doświadczenia. H-ChE, 2% ester cholesterolu; XKS, Xinkeshu; VP, wazopresyna; EKG, elektrokardiogram; EDVR, relaksacja naczyń zależna od śródbłonka; eNOS, śródbłonkowa syntaza tlenku azotu; VCAM-1, cząsteczka adhezyjna komórek naczyniowych 1.
Kontrola
Króliki były stale karmione standardowymi granulkami przez 12 tygodni. Królikom podawano dożołądkowo normalną sól fizjologiczną (10 mL/kg/d).
Model
Rzęby były stale karmione granulkami diety H-ChE. Pozostałe były takie same jak w przypadku Kontroli.
XKS
Rzabikom podawano dożołądkowo 184,8 mg/kg/d XKS (dawka równoważna dla dorosłego osobnika o średniej wadze 60 kg) w normalnej soli fizjologicznej (10 mL/kg/d). Pozostałe były takie same jak Model.
Atorwastatyna
Królikom podawano dożołądkowo atorwastatynę w dawce 5,0 mg/kg/d w normalnym roztworze soli (10 mL/kg/d). Pozostałe czynności były takie same jak w modelu.
2.3. Analiza lipoprotein w osoczu
Próbki krwi żylnej na czczo pobierano w heparynie z żyły brzeżnej przed i po 12-tygodniowych eksperymentach. Osocze zostało oddzielone i przechowywane w temperaturze -20°C. Poziom lipoprotein w osoczu, w tym cholesterolu całkowitego (TC), triglicerydów (TG), LDL i HDL mierzono za pomocą automatycznego analizatora biochemicznego (Dimension AR, DuPont, USA).
2.4. ECG Test on VP-Induced Myocardial Ischemia Model
Na koniec 12-tygodniowego okresu eksperymentalnego, zgodnie z metodą Serradeil-Le Gal et al. , eksperymentalne niedokrwienie mięśnia sercowego wywołane naczyniami wieńcowymi było indukowane przez VP. Standardowe odprowadzenie kończynowe II odprowadzenia EKG rejestrowano w sposób ciągły przed i 25 min po podaniu VP (2,0 IU/kg, iv.) za pomocą systemu Powerlab 30 (AD Instruments, Castle Hill, Australia).
2.5. Ocena EDVR
W tydzień po zakończeniu badań EKG, króliki ( na grupę) znieczulono 10% wodzianem chloralu (25 mg/kg, ip). Zgodnie z metodą Lee i wsp. natychmiast uzyskano świeże serca i przechowywano je w zimnym PBS. Następnie rozpreparowano aorty brzuszne i pocięto je na 3 mm pierścienie. Pierścienie rozciągano do siły 1,5 g i pozostawiano do wyrównania przez 60 min w 10 mL łaźni tkankowej (38,6°C) zawierającej roztwór Krebsa-Henseleita (skład w mM: 115 NaCl, 25 NaHCO3, 1,38 NaH2PO4, 2,51 KCl, 2,46 MgSO4, 1,91 CaCl2 i 5,56 dekstrozy) i napowietrzanej mieszaniną 95% O2 i 5% CO2. Generację siły monitorowano za pomocą przetwornika izometrycznego podłączonego do systemu Powerlab 30. Po wyrównaniu, indukowano skurcz naczyń za pomocą 10-6 M PE. Gdy maksymalny skurcz osiągnął plateau, EDVR określano jako odpowiedź od 10-9 do 10-4 M Ach. Procent relaksacji obliczono na podstawie zmian w napięciu do maksymalnej wartości prekontrakcji wywołanej przez PE.
2.6. Badania histomorfologiczne
Pozostałe króliki ( na grupę) znieczulono 10% wodzianem chloralu (25 mg/kg, ip). Perfuzję utrwalającą przeprowadzono u każdego królika przez lewą tętnicę szyjną wspólną z heparynizowaną normalną solą fizjologiczną (70 mL/kg) i 4% paraformaldehydem (140 mL/kg) w 0.1 M buforze fosforanowym przy użyciu cewnika aortalnego (przy ciśnieniu około 100 mmHg), w międzyczasie żyła szyjna zewnętrzna została przecięta w celu usunięcia pozostałej krwi. Dwie godziny później w temperaturze 4,0°C, serca i aorty zostały usunięte i utrwalone w 10% zbuforowanej formalinie przez noc.
Aorty zostały otwarte wzdłuż wzdłuż tylnej strony, a następnie zabarwione Sudanem IV w celu wizualizacji blaszek miażdżycowych. Po barwieniu, aorty zostały spięte, aby je spłaszczyć i sfotografowane. Całkowitą powierzchnię () i powierzchnię blaszek () aorty analizowano morfometrycznie przy użyciu systemu analizy morfometrycznej Image-Pro Plus 7.0 (Media Cybernetics, USA). Wskaźnik blaszek miażdżycowych obliczano jako .
Tętnicę wieńcową okalającą lewą (o długości 2 cm) wraz z przylegającymi tkankami mięśnia sercowego starannie wycinano. Próbki zatopiono w parafinie i pocięto na mikrotomie na 5 μm przekroje, a następnie zabarwiono hematoksyliną i eozyną (HE) i zeskanowano za pomocą systemu analizy obrazu NanoZoomer Digital Pathology (Hamamatus, Olympus, JAP). Obszar światła () i obszar ograniczony wewnętrzną blaszką sprężystą () były analizowane morfometrycznie przy użyciu systemu analitycznego Image-Pro Plus 7.0 dla powiększeń ×200. Współczynnik zwężenia naczyń wieńcowych obliczono jako .
2,7. Immunohistochemical Studies of eNOS and VCAM-1 on Coronary Artery
ekspresje eNOS i VCAM-1 oceniano immunohistochemicznie na tętnicy wieńcowej przy użyciu zestawu streptawidyna/peroksydaza zgodnie z instrukcjami producenta. Sekcje były deparafinowane, rehydratyzowane, a następnie moczone w buforze do odzyskiwania antygenu (0,01 M Tris-base, 1,0 M EDTA, 0,05% Tween 20, pH 6,0) przez 3 min w 95°C. Aktywność endogennej peroksydazy została zablokowana przez inkubację skrawków w 3% wodnym roztworze nadtlenku wodoru przez 1 h w temperaturze pokojowej. Wycinki przepłukiwano trzykrotnie PBS, a następnie inkubowano z 100 μL koziego przeciwciała anty-rabbitowego eNOS lub VCAM-1. Odcinki płukano PBS i inkubowano z 100 μL biotynylowanej mysiej anty-koziej IgG (rozcieńczenie 1 : 100 w PBS). Białka wizualizowano za pomocą roztworu substratu diaminobenzydyny. W kontrolach negatywnych przeciwciało pierwotne zastąpiono PBS. Obszar zabarwienia eNOS lub VCAM-1 () i obszar obserwowany () analizowano morfometrycznie przy użyciu systemu analitycznego Image-Pro Plus 7.0 dla powiększenia ×400. Całkowita istniejąca eNOS lub VCAM-1 została obliczona półilościowo jako .
2,8. Statistical Analysis
Analizy statystyczne obejmowały użycie SPSS, v13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Zmienne ilościowe są wyrażone jako średnie ± SEM. Porównanie zmiennych ciągłych pomiędzy wieloma grupami przeprowadzono za pomocą analizy wariancji ANOVA, a porównania post hoc za pomocą testu LSD.
3. Wyniki
3.1. Analiza lipoprotein w osoczu
Przed 12-tygodniowym eksperymentem, wartości wyjściowe poziomów lipoprotein w osoczu (TC, TG, LDL i HDL) nie różniły się znacząco pomiędzy czterema grupami. Po 12-tygodniowym eksperymencie, króliki z grupy Model wykazały znaczący wzrost poziomu TC (), LDL (), TG () i znaczące obniżenie poziomu HDL () w porównaniu z grupą Kontrolną. Leczenie atorwastatyną przez 12 tygodni znacząco zmniejszyło poziom TC (), LDL (), i TG () i znacząco zwiększyło poziom HDL () w porównaniu z Modelem. Natomiast leczenie XKS wykazało nieznaczne zmniejszenie () poziomów TC, TG, LDL i nieznaczny przyrost () poziomów HDL w porównaniu z Modelem (Tabela 1).
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Dane wyrażone są jako średnie ± SEM, , a aa versus Kontrola; b bb versus Model; cc versus XKS. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.2. ECG Test on VP-Induced Myocardial Ischemia Model
Wstrzyknięcie VP (iv.) przytomnym królikom wywołało przemijające uniesienie odcinka ST w EKG w każdej grupie. Maksymalne uniesienie odcinka ST obserwowano 5-10 min po podaniu VP w grupie kontrolnej. Króliki z grupy modelowej wykazywały znacząco wyższe () uniesienie odcinka ST niż w grupie kontrolnej. Leczenie XKS wykazało znaczący () efekt przeciwniedokrwienny (hamowanie uniesienia odcinka ST wywołanego przez VP) w porównaniu z grupą Model. Atorwastatyna również wykazała znaczący () efekt przeciw niedokrwienny; jednak XKS była bardziej skuteczna () niż Atorwastatyna (Tabela 2 i Figura 2).
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Dane wyrażono jako średnie ± SEM, , a aa versus Kontrola; b bb versus Model; c versus XKS. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Maksymalne uniesienie odcinka ST w EKG po podaniu wazopresyny.
Przemijające zmniejszenie częstości akcji serca (HR) wystąpiło po podaniu VP w każdej grupie. Efekt ten osiągnął szczyt po 10-15 min u królików z grupy kontrolnej. Króliki z grupy modelowej wykazywały bardziej oczywisty spadek HR () w porównaniu z Kontrolą. Leczenie XKS wykazało znaczące () zahamowanie spadku HR w porównaniu do Modelu. Jednakże, nie zaobserwowano znaczącego efektu hamującego () przy leczeniu atorwastatyną w porównaniu z Model (Figura 3).
Krzywe częstości akcji serca po podaniu wazopresyny.
3.3. Ocena EDVR
Ach (10-9 do 10-4 M) powodował zależną od stężenia relaksację w zwężonych pierścieniach aorty brzusznej. Maksimum EDVR było znacząco upośledzone () u królików z grupy Model w porównaniu z Kontrolą. Leczenie XKS i Atorwastatyną znacząco () osłabiało to upośledzenie w porównaniu z grupą Model. Atorwastatyna była bardziej skuteczna () niż XKS (Figura 4).
Krzywe relaksacji naczyń zależne od śródbłonka w pierścieniach aorty brzusznej.
3.4. Badania histomorfologiczne
Nie stwierdzono żadnych nieprawidłowych zmian histologicznych w aorcie u królików z grupy kontrolnej. Typowe makroskopowe blaszki miażdżycowe na wewnętrznej powierzchni aorty były widoczne wyraźnie i powszechnie u królików z grupy Model. Blaszki miażdżycowe przybierały czerwony kolor przy barwieniu Sudanem IV. Leczenie XKS i Atorwastatyną znacząco () zmniejszyło obszar blaszek miażdżycowych w porównaniu do Modelu. Efekt ten był podobny () między dwiema grupami (Figura 5).
(a)
(b)
(a)
(b)
Płytki miażdżycowe na powierzchni intymnej aorty metodą barwienia Sudanem IV.
Nie stwierdzono zmian miażdżycowych żadnej ściany tętnicy u królików z grupy kontrolnej. Ale u królików z grupy Model, niektóre wewnątrzsercowe małe tętniczki wykazywały znaczące zmiany miażdżycowe, włączając w to, że podstawowa blaszka wokół komórek mięśni gładkich była nieregularnie pogrubiona i wielofilamentowa. Włókna kolagenowe znacznie zwiększyły się w mediach, a duża liczba lipidów przeniknęła do pogrubiałej intimy. Światła naczyń wieńcowych uległy zwężeniu z towarzyszącym odkładaniem się lipidów, które zawierały komórki piankowate. Króliki z grupy modelowej wykazywały znaczące () zwężenie naczyń wieńcowych w porównaniu z grupą kontrolną. Leczenie XKS i Atorwastatyną znacząco () hamowało zwężenie naczyń wieńcowych w porównaniu do Modelu. Efekt był podobny () między dwiema grupami (Figura 6).
Zwężenie wieńcowe przez barwienie HE (mikrografy świetlne, środkowe 100×, lewy górny 400×).
3.5. Immunohistochemistry Studies of eNOS and VCAM-1 on Coronary Artery
W grupie kontrolnej, pozytywne barwienie eNOS można było zaobserwować w cytoplazmie obszaru warstwy intymnej naczyń wieńcowych. Istniejąca eNOS była znacząco zmniejszona () w grupie Modelu w porównaniu z Kontrolą. Leczenie XKS i Atorwastatyną znacznie () zwiększyło istniejącą eNOS w porównaniu z Modelem. Atorwastatyna była bardziej skuteczna () niż XKS (Rycina 7).
Występowanie eNOS i VCAM-1 na tętnicy wieńcowej przez barwienie immunohistochemiczne (mikrografy świetlne, 400×).
W grupie kontrolnej, dodatnie barwienie VCAM-1 było rzadko obserwowane w całej ścianie tętnicy wieńcowej. However, it could be observed largely in collagen fibrils and foam cells rich area of the vascular wall in Model group, and the existing of VCAM-1was significantly () increased than Control. XKS i Atorvastatin leczenie znacząco () zmniejszyło istniejące VCAM-1 w porównaniu z Modelem. XKS był bardziej skuteczny () niż Atorwastatyna (Figura 7).
4. Dyskusja
CAM włączając medycynę ziołową zyskał światową popularność w ciągu ostatnich 20 lat. Twierdzi się, że pacjenci z przewlekłymi schorzeniami, w tym z chorobami układu sercowo-naczyniowego, są skłonni do stosowania CAM. Ziołolecznictwo jest metodą wykorzystującą rośliny lecznicze lub zioła do zapobiegania i leczenia chorób, a jego zakres sięga od tradycyjnych i popularnych leków każdego kraju do stosowania standaryzowanych i miareczkowanych ekstraktów ziołowych.
Tabletka XKS była szeroko stosowana w leczeniu CHD przez tradycyjnych lekarzy w Chinach w ciągu dziesięciu lat. Badania kliniczne ujawniły, że XKS niosła wiele działań biologicznych, w tym poprawę zmienności rytmu serca, zmniejszenie epizodów dusznicy bolesnej, poprawę elastyczności tętnic. Tymczasem podstawowe badania farmakologiczne ujawniły, że podawanie XKS ma wiele efektów terapeutycznych, takich jak zmniejszanie zużycia tlenu przez mięsień sercowy, obniżanie poziomu lipidów i antyapoptoza.
W obecnym badaniu, atorwastatyna została wybrana jako pozytywna terapia kontrolna. Wyniki pokazały, że leczenie atorwastatyną przez 12 tygodni było bardzo skuteczne w obniżaniu poziomu TC i LDL w osoczu, zwiększaniu poziomu HDL, zmniejszaniu eksperymentalnego niedokrwienia mięśnia sercowego, ratowaniu EDVR i hamowaniu postępu miażdżycy. Leczenie XKS przez 12 tygodni dawało podobne efekty w ratowaniu EDVR i hamowaniu postępu miażdżycy jak atorwastatyna. Nawet XKS był bardziej skuteczny w zapobieganiu niedokrwieniu mięśnia sercowego i utrzymaniu rytmu serca niż atorwastatyna. Być może te właściwości były głównymi mechanizmami działania XKS w klinicznej terapii dusznicy bolesnej i arytmii. Z drugiej strony, jednym z ważnych odkryć w obecnym badaniu było to, że nie wystąpiły znaczące zmiany w profilach lipidowych u królików, którym podawano XKS. Innymi słowy, XKS nie wykazywały efektu obniżania lipoprotein w hipercholesterolemii wywołanej dietą H-ChE.
Dobrze wiadomo, że uszkodzenie śródbłonka jest kluczowym wydarzeniem w patogenezie miażdżycy. Miażdżyca może być wywołana z prostej dysfunkcji śródbłonka, jak to ma miejsce w hipercholesterolemii. Homeostaza komórek śródbłonka jest utrzymywana głównie dzięki syntezie tlenku azotu (NO), silnego czynnika rozszerzającego naczynia, syntetyzowanego przez eNOS. NO pełni ważne funkcje, w tym reguluje tonus naczyniowy i regionalny przepływ krwi oraz hamuje proliferację komórek mięśni gładkich naczyń. Na eNOS wpływają różne bodźce, w tym hipoksja, stres ścinający, LDL oraz rozwój i progresja miażdżycy. Zmniejszająca się ekspresja lub inaktywacja eNOS jest uznawana za kluczowy czynnik w rozwoju dysfunkcji śródbłonka. Odkryto istotną rolę naczyniowych cząsteczek adhezyjnych w miażdżycy, które odgrywają ważną rolę w adhezji krążących leukocytów do śródbłonka, co jest pierwszym krokiem w inicjacji miażdżycy. Jako transmembranowa glikoproteina, VCAM-1 ulega ekspresji w miejscach podatnych na miażdżycę jeszcze przed pojawieniem się makroskopowych zmian chorobowych, z utrzymującą się ekspresją w bardziej zaawansowanych zmianach miażdżycowych. Dieta aterogenna może szybko indukować ekspresję VCAM-1 w śródbłonku aorty w hodowlach organów aortalnych.
Zgodnie z nowatorską właściwością przeciwmiażdżycowego i przeciwniedokrwiennego nie przez antyhiperlipidemię szlaku, skupiliśmy się na śródbłonkowej ochronie jak cel by zbadać faktyczny mechanizm XKS. eNOS i VCAM-1 były wybrane jak przeciwmiażdżycowe i aterogenne czynniki, odpowiednio. Wyniki pokazały, że 12 tygodni diety H-ChE spowodowało zmniejszenie ekspresji eNOS, jak również zwiększenie ekspresji VCAM-1during procedury miażdżycy. Zarówno atorwastatyna jak i XKS wykazywały właściwości chroniące naczynia poprzez zmianę ekspresji eNOS i VCAM-1. Dlatego znacząca ochrona śródbłonka naczyniowego była prawdopodobnie jednym z ważnych mechanizmów zaangażowanych w kardioprotekcyjne właściwości XKS.
XKS zawiera 5 ziołowych składników leczniczych, a są nimi Salvia miltiorrhiza Bunge, Panax notoginseng (PN), Fructus Crataegi, Radix Puerariae i Radix Aucklandiae (Tabela 3). Materiały zostały pierwotnie zmielone na drobny proszek przez mikronizator i przygotowane w formie tabletek, które zostały uwierzytelnione i wystandaryzowane na podstawie związków markerowych z Farmakopei Chińskiej 2010 . Z każdego pojedynczego składnika wyodrębniono kilka grup monomerów o specjalnej aktywności biologicznej, na przykład osłabiający zwłóknienie płuc ekstrakt PN, obniżający poziom cholesterolu w osoczu ekstrakt głogu, poprawiający insulinooporność ekstrakt Puerarin i osłabiający idiopatyczny obrzęk ekstrakt Radix Aucklandiae. Zgodnie z teorią TCM, Salvia miltiorrhiza Bunge była postrzegana jako rodzaj „głównego leku”, Panax notoginseng jako „lek ministerialny”, a pozostałe 3 składniki służyły jako „lek wspomagający” wśród składników XKS. Tanshinone IIA był jednym z najważniejszych monomerycznych składników ekstraktu z Salvia miltiorrhiza Bunge. Aktywność biologiczna Tanshinone IIA dotyczyła zmniejszenia zużycia tlenu w mięśniu sercowym, rozszerzenia tętnic wieńcowych, poprawy regeneracji neuronów, działania przeciwnadciśnieniowego i antyoksydacyjnego.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||
W obecnym badaniu spojrzeliśmy na XKS jako na pojedynczy „lek” i zbadaliśmy farmakologiczne działanie wszystkich składników razem. Chociaż wyniki obecnego badania dostarczyły bodźca do dalszych badań nad terapeutycznym działaniem XKS, związek tych składników i ich interakcje pozostały do wyjaśnienia. Były to główne ograniczenia obecnego badania. Dlatego należy zbadać szczegółowy mechanizm molekularny XKS oraz dalsze badania na zwierzętach dotyczące farmakologii składników czynnych i metabolitów.
5. Wnioski
W podsumowaniu wyraźnie wykazano, że TCM XKS wywiera silne właściwości przeciwmiażdżycowe i przeciwniedokrwienne na modelu królika z miażdżycowym niedokrwieniem mięśnia sercowego. Efekt chroniący śródbłonek może być zaangażowany w mechanizm inny niż efekt antyhiperlipidemiczny. Wierzyliśmy, że lepsze zrozumienie mechanizmów, przez które XKS chroni śródbłonek i interakcji aktywnych składników może prowadzić do nowych farmakologicznych interwencji CAM dla pacjentów z CHD.
Podziękowania
To badanie było wspierane przez Major State Basic Research Development Program (G2000056905), National Natural Science Foundation (No. 81073021), and Education Ministry Science Foundation (108019) of China. Xu Tao i Peng Jing-bo w równym stopniu przyczynili się do powstania tej pracy.
.