Apocrine Sweat Gland Ductal Adenoma with Sebaceous Differentiation in a Dog
Abstract
Na skórze lewego policzka u 7-letniego samca rasy Border Collie pojawiła się twarda masa o średnicy około 1 cm. Histologicznie, masa składała się ze struktur kanałowych wyścielonych dwuwarstwowym nabłonkiem luminalnym i bazaloidalnymi komórkami nowotworowymi wraz z kilkoma gniazdami komórek łojowych. Barwienie immunohistochemiczne wykazało, że komórki nabłonka luminalnego guza były pozytywne dla cytokeratyny (CK, CAM5.2) i CK19, ale nie dla CK14 i p63. Natomiast komórki guza bazaloidalnego były pozytywne dla CK14, p63 i αSMA, ale nie dla CK19 czy CAM5.2. Ekspresja CK8 była obserwowana zarówno w komórkach nabłonka luminalnego, jak i w komórkach guza podstawnego. Komórki guza z różnicowaniem łojotokowym były pozytywne dla CK14, ale nie dla pozostałych markerów. Jest to pierwszy przypadek apokrynowego gruczolaka przewodowego gruczołów potowych z różnicowaniem łojowym występującego w skórze policzka u psa.
1. Wprowadzenie
Gruczolaki gruczołów potowych apokrynowych są dość często spotykane u psów i zwykle występują na głowie, szyi i kończynach. Około 70% nowotworów gruczołów potowych apokrynowych psów ma charakter łagodny. Łagodne guzy gruczołów potowych apokrynowych są klasyfikowane jako gruczolaki apokrynowe, złożone i mieszane gruczolaki apokrynowe lub gruczolaki apokrynowe przewodowe. Gruczolaki przewodów apokrynowych u psów są rzadkimi łagodnymi nowotworami i stanowiły tylko 0,3% nowotworów skóry psów w dużym badaniu. U psów zróżnicowanie łojowe zostało opisane w pięciu przypadkach guzów gruczołu sutkowego. Jednakże, zgodnie z wiedzą autorów, nie opisano wcześniej guza apokrynowego niezwiązanego z gruczołem sutkowym z różnicowaniem łojowym u psa.
2. Opis przypadku
U 7-letniego samca rasy Border Collie rozwinęła się twarda masa w skórze lewego policzka, którą usunięto chirurgicznie i przekazano do badania histopatologicznego w Department of Veterinary Pathology, Nippon Veterinary and Life Science University (Tokio, Japonia). Grossly, the mass was approximately 1 cm in diameter, and a cut surface of the mass appeared homogeneously greyish-white in colour. Badanie przedmiotowe obejmujące pełną morfologię krwi i rutynowy profil biochemiczny surowicy nie wykazało żadnych innych nieprawidłowości. Szczegółowe badania radiologiczne i rentgenowskie nie ujawniły żadnych mas sugerujących guz w klatce piersiowej i jamie brzusznej. Po 9 miesiącach od chirurgicznego wycięcia guza nie stwierdzono wznowy ani przerzutów. Nie zastosowano dodatkowego leczenia.
Wyciętą masę utrwalono w 10% obojętnej zbuforowanej formalinie, zatopiono w parafinie, pocięto na odcinki o grubości 4 μm i zabarwiono hematoksyliną i eozyną (HE), kwasem okresowym-Schiffa (PAS), błękitem alcjanowym i czerwienią olejową O. Sekcje seryjne poddano barwieniu immunohistochemicznemu. Sekcje seryjne poddawano barwieniu immunohistochemicznemu (IHC) przy użyciu techniki znakowanej peroksydazy streptawidynowo-biotinowej z mysimi przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko niskocząsteczkowej cytokeratynie (CK; klon CAM5.2, wstępnie rozcieńczone, BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA), CK8 (klon Ks 8.7, 1 : 50, Progen Biotechnik GmbH, Heidelberg, Niemcy), CK14 (klon LC002, 1 : 50, BioGenex Laboratories Inc, San Ramon, CA, USA), – aktynę mięśni gładkich (SMA; klon 1A4, 1 : 400, DAKO, Glostrup, Dania), CK19 (klon 170.2.14, 1 : 100, Boehringer Mannheim, Niemcy) i p63 (klon 4A4, 1 : 400, NeoMarkers Inc., Fremont, CA, USA). Wszystkie wycinki tkanek były wstępnie traktowane buforem cytrynianowym (pH 6,0) i inkubowane w temperaturze 121°C przez 15 min. Reakcja na każdy antygen była wizualizowana przez dodanie 3,3′-diaminobenzydyny tetrahydrochlorku chromogenu i przeciwbarwiona hematoksyliną.
Histologicznie masa była dobrze odgraniczona i zamknięta. Składała się z różnych guzków i gniazd proliferacyjnych, głównie złożonych z dwuwarstwowych struktur kanałowych z wewnętrzną warstwą prostopadłościennych do kolumnowych luminalnych komórek nowotworowych i zewnętrzną warstwą bazaloidalnych komórek nowotworowych, oddzielonych cienkim włóknistym zrębem (rysunek 1). Wewnętrzna warstwa komórek nabłonka luminalnego miała wyraźną cytoplazmę i małe hiperchromatyczne jądra. Zewnętrzna warstwa komórek guza bazaloidalnego miała skąpą eozynofilową cytoplazmę i nieco większe euchromatyczne jądra. Aktywność mitotyczna była umiarkowana. W obrębie guza znajdowało się kilka gniazd dużych komórek piankowatych, podobnych do komórek łojowych, otoczonych komórkami bazaloidalnymi (ryc. 2). Jądra tych komórek były położone centralnie z drobno wakuolizowaną cytoplazmą i były negatywne w barwieniu PAS i błękitem alcjanowym, ale pozytywne dla lipidów w barwieniu czerwienią olejową O (rysunek 2 wstawka). W obrębie guza nie zaobserwowano różnicowania płaskonabłonkowego ani keratynizacji. Ponadto nie zaobserwowano martwicy, inwazji ani zarodkowania komórek nowotworowych.
Wygląd histopatologiczny masy policzkowej. Masa składa się ze struktur kanałowych wyścielonych przez nabłonek dwuwarstwowy i komórki guza bazaloidalnego. Hematoksylina i eozyna (HE). Bar = 100 m.
Zróżnicowanie łojotokowe obserwowane w obrębie gruczolaka przewodu apokrynowego. Komórki łojowe charakteryzują się obfitą, przejrzystą i wakuolizowaną cytoplazmą oraz centralnie położonym jądrem otoczonym komórkami bazaloidalnymi w gruczolaku przewodowym apokryny. HE. Bar = 50 m. Inset: zamrożony przekrój barwiony czerwienią olejową O ujawniający kropelki lipidów w cytoplazmie komórek łojowych.
Jak pokazano w Tabeli 1, barwienie immunohistochemiczne ujawniło, że luminalne komórki nowotworowe nabłonka były pozytywne dla CK19 (Figura 3) i CAM5.2, ale nie dla CK14, SMA i p63. Natomiast komórki guza bazaloidalnego były pozytywne dla CK14 (Figura 4), p63 (Figura 5) i SMA, ale nie dla CK19 i CAM5.2. Ekspresja CK8 była obserwowana zarówno w komórkach nabłonka luminalnego, jak i w komórkach guza podstawnego (Rycina 6). Komórki guza wykazujące zróżnicowanie łojotokowe były pozytywne dla CK14, ale nie dla pozostałych markerów.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Luminalne komórki guza są pozytywne dla CK19. Immunohistochemia dla CK19 z przeciwbarwieniem hematoksyliną. Bar = 50 m.
Komórki guza bazaloidalnego i komórki wykazujące zróżnicowanie łojowe są pozytywne dla CK14. Immunohistochemia dla CK14 z przeciwbarwieniem hematoksyliną. Bar = 50 m.
Komórki guza bazaloidalnego są pozytywne dla p63. Immunohistochemia dla p63 z przeciwbarwieniem hematoksyliną. Bar = 50 m.
Komórki guza luminalnego i basaloidalnego są pozytywne dla CK8. Immunohistochemia dla CK8 z przeciwbarwieniem hematoksyliną. Bar = 50 m.
3. Dyskusja
Na podstawie wyników badań histologicznych i immunohistochemicznych guz rozpoznano jako gruczolaka przewodowego gruczołu potowego apokrynowego z różnicowaniem łojowym. Zgodnie z klasyfikacją nowotworów nabłonkowych i melanocytowych skóry zwierząt domowych Światowej Organizacji Zdrowia, łagodne guzy gruczołu potowego apokrynowego są klasyfikowane jako gruczolaki apokrynowe, złożone i mieszane gruczolaki apokrynowe lub gruczolaki apokrynowe przewodowe. U psów zróżnicowanie łojowe opisano w czterech przypadkach guzów gruczołu sutkowego: dwóch złożonych gruczolakach i dwóch rakach oraz w jednym przypadku guza ślinianki, natomiast w przypadku gruczołów potowych apokrynowych nie opisywano dotychczas takiego przypadku. W niniejszej pracy opisano przypadek gruczolaka przewodowego apokrynowych gruczołów potowych z różnicowaniem łojotokowym występującego w skórze policzka Border Collie.
CK19 i CAM5.2 są użytecznymi markerami komórek luminalnych, podczas gdy CK14, p63 i SMA są markerami komórek podstawno-mioepitelialnych u psów. Ekspresja CK8 została zaobserwowana zarówno w komórkach luminalnych, jak i bazaloidalnych w nowotworach gruczołów apokrynowych psów. W przeciwieństwie do tego, CK14 ulegała ekspresji w prawidłowym gruczole łojowym i komórkach mioepitelialnych gruczołów apokrynowych i sutkowych. Ekspresja SMA była obserwowana w komórkach mioepitelialnych, ale nie w komórkach podstawnych w guzach gruczołów apokrynowych. W raku gruczołów apokrynowych psów, komórki p63+SMA+, p63+SMA- i CK8+p63- zidentyfikowano odpowiednio w komórkach mioepitelialnych, podstawnych i luminalnych. Dodatkowo, zgodnie z poprzednimi badaniami, guz ten składał się głównie z dwóch typów komórek nowotworowych, komórek luminalnych i komórek podstawnych, z różnicowaniem łojotokowym.
Ten guz wydawał się być zróżnicowany z gruczolaka łojotokowego i trichoblastoma skóry. Charakterystyka guza w tym przypadku obejmowała proliferację komórkową z dwuwarstwowymi strukturami kanałowymi z różnicowaniem łojowym, co nie jest cechą guza łojowego lub trichoblastoma. Guzy gruczołów sutkowych u psów są często obserwowane w różnicowaniu płaskonabłonkowym. Niektóre gruczolaki przewodowe gruczołów potowych psowatych mają ogniska różnicowania płaskonabłonkowego z małymi złogami keratyny w części infundibularnej przewodu apokrynowego. Jednakże, różnicowanie płaskonabłonkowe nie było obserwowane w tym przypadku.
Pochodzenie komponentu łojowego w tym guzie było niejasne. Jednak poprzednie badania sugerowały, że komórki podstawne guza mogą różnicować się w komórki nabłonka łojowego i że komórki macierzyste skóry mogą dawać początek sebocytom w guzach sutka u psów. Dlatego proponujemy, że zróżnicowanie łojowe w tym guzie mogło pochodzić z komórek bazaloidowych lub lokalnych pluripotentnych komórek macierzystych, podobnie jak w guzach gruczołu sutkowego psów.
Konflikt interesów
Autorzy deklarują, że nie ma konfliktu interesów.
Podziękowania
Autorzy chcieliby podziękować dr Hidemi Kitagawie za dostarczenie informacji dotyczących dalszego postępowania i próbki guza do tego badania oraz dr Yoko Matsuda, Toshiyuki Ishiwata i Zenya Naito z Department of Pathology and Integrative Oncological Pathology, Nippon Medical School, za pomocne dyskusje.