Emerging evidences for the opposite roli apolipoproteiny C3 i apolipoproteiny A5 w metabolizmie lipidów i chorobie wieńcowej

Apolipoproteina C3 (apoC3) i apolipoproteina A5 (apoA5) są kodowane przez klastry genów APOA1/C3/A4/A5. Badania genetyczne, epidemiologiczne i podstawowe eksperymenty konsekwentnie dowodzą, że apoC3 i apoA5 są krytycznymi modulatorami metabolizmu triglicerydów (TG) w osoczu. Niedobór apoC3 lub apoA5 prowadził do znacznego obniżenia lub podwyższenia poziomu TG w osoczu u ludzi i myszy. Dogłębne badania mechanistyczne wykazały, że apoC3 hamowała hydrolizę TG w osoczu, wychwyt resztkowych lipoprotein i promowała wątrobowe wydzielanie TG, podczas gdy apoA5 regulowała metabolizm TG w osoczu w zupełnie przeciwny sposób. Ostatnie badania ujawniły dodatkową rolę apoC3 i apoA5 w metabolizmie cholesterolu resztkowego (RC), lipoprotein o wysokiej gęstości (HDL) i wątrobowego TG. Ponadto, populacyjne badania genetyczne na dużą skalę wykazały, że mutacje utraty funkcji w genach APOC3 i APOA5 powodują odpowiednio zmniejszone i zwiększone ryzyko wystąpienia choroby wieńcowej (CAD). Dlatego też apoC3 i apoA5 jawią się jako potencjalne nowe cele redukcji ryzyka sercowo-naczyniowego. W niniejszym artykule dokonano przeglądu istniejących dowodów sugerujących przeciwstawną rolę apoC3 i apoA5 w metabolizmie lipidów i ryzyku CAD oraz omówiono potencjalne korelacje między tymi dwoma apolipoproteinami.

Struktura genu i regulacja ekspresji

Ludzkie skupiska genów APOA1/C3/A4/A5 są zlokalizowane na chromosomie 11q23, gdzie gen APOC3 znajduje się około 35 kbp upstream od locus genu APOA5. Ich sekwencje są ewolucyjnie konserwowane. Regiony regulatorowe ludzkiego genu APOC3 zawierają zestaw proksymalnego promotora z czterema elementami (- 283/+ 24) i dystalnego enhancera z sześcioma elementami (- 890/- 500). Wcześniejsze badania na zwierzętach i w hodowlach komórkowych wykazały, że enhancer APOC3 działa jako wspólna sekwencja regulacyjna, która kieruje ekspresją wątrobowych i jelitowych genów APOA1, APOC3 i APOA4. Jednakże wystarczającą, specyficzną dla wątroby ekspresję genu APOA5 uzyskano in vivo przy użyciu 26 kb fragmentu DNA XhoI zawierającego wyłącznie gen APOA5, a więc pozbawionego enhancera APOC3. Gao i wsp. dodatkowo potwierdzili, że enhancer APOC3 nie wpływa na ekspresję APOA5 u myszy transgenicznych. W rzeczywistości, dwa elementy w regionie promotora APOA5 okazały się krytyczne dla kierowania jego ekspresją w ludzkich wątrobowych liniach komórkowych .

Inicjacja ekspresji genów jest realizowana przez specyficzne wiązanie czynników transkrypcyjnych z elementami regulacyjnymi genów, a cząsteczki wpływające na ten proces mogą regulować odpowiednią ekspresję genów. Konkretna struktura i mechanizmy regulacji ekspresji genów APOC3 i APOA5 zostały omówione w innym miejscu, a my skupimy się tutaj na regulatorach, które są wspólne dla APOC3 i APOA5. Rzeczywiście, kilka cząsteczek zostało włączonych w regulację ekspresji APOC3 i APOA5 w tym samym kierunku, włączając w to wzrost regulacji z hepatocytowym czynnikiem jądrowym 4-α (HNF4-α) i glukozą oraz spadek regulacji z kinazą białkową aktywowaną przez AMP, insuliną i czynnikiem martwicy nowotworów-α (TNF-α). Należy zauważyć, że wszystkie te substancje, z wyjątkiem TNF-α, są ważnymi składnikami bezpośrednio zaangażowanymi w metabolizm glukozy, co sugeruje, że dysregulacja APOC3 i APOA5 może przyczyniać się do dyslipidemii cukrzycowej. Stwierdzono również przeciwstawny kierunek regulacji, w którym receptor aktywowany proliferatorami peroksysomów-α (PPAR-α) i receptor aktywowany farnezoidem X (FXR) promowały APOA5, natomiast hamowały ekspresję APOC3. W przeciwieństwie do APOA5, promotor ludzkiego genu APOC3 nie zawiera pozytywnych elementów odpowiedzi PPAR-α i FXR. W rzeczywistości te dwa receptory jądrowe działały pośrednio poprzez zakłócanie wiązania innych czynników transkrypcyjnych, takich jak HNF4-α, do specyficznych elementów APOC3, a tym samym dalsze hamowanie transkrypcji genu APOC3. Tak więc efekt obniżania TG w osoczu przez fibraty, jeden z rodzajów agonistów PPAR-α, może być częściowo pośredniczony przez zwiększenie stężenia krążącego apoA5 i/lub zmniejszenie stężenia apoC3. Rzeczywiście, ostatnie badania wykazały, że zarówno fenofibraty, jak i terapia wielonienasyconymi kwasami tłuszczowymi omega-3 znacząco zmniejszyły poziom apoC3 w osoczu u ludzi.

Metabolizm lipidów osocza

Rozkład lipoprotein

Krążące apoC3 i apoA5 były głównie związane z białkiem bogatym w triglicerydy (TRL) i HDL. Badania wykazały, że zarówno apoC3 jak i apoA5 były wymienne pomiędzy TRL i HDL. W stanie normolipidemii u ludzi, większość apoC3 w osoczu była związana z HDL. Przeciwnie, u osób z hipertriglicerydemią (HTG), apoC3 znajdował się głównie na lipoproteinie o bardzo niskiej gęstości (VLDL). Wraz ze wzrostem stężenia TG w sztucznych emulsjach TG, większa frakcja apoC3 przeniosła się z natywnych lipoprotein osocza do sztucznych emulsji. Glangeaud i wsp. stwierdzili, że podczas pośredniczonej przez lipazę lipoproteinową (LPL) hydrolizy VLDL, apoC3 redystrybuował z VLDL do HDL w badaniu in vitro, z ilością, która była proporcjonalna do wielkości hydrolizy TG w VLDL, a apoC3 był następnie przenoszony z powrotem do nowo syntetyzowanych cząstek VLDL wzbogaconych w TG. Podobnie Nelbach i wsp. wykazali, że apoA5 była związana głównie z HDL u myszy transgenicznych APOA5, które miały VLDL ubogie w TG, ale była szybko i skutecznie redystrybuowana do bogatych w TG VLDL wyizolowanych z myszy z nokautem APOA5 po inkubacji. Shu i wsp. donieśli również, że dożylne wstrzyknięcie rekonstytuowanego HDL zawierającego apoA5 u myszy z nokautem APOA5 wykazało identyczny wzór wymiany apoA5 między rekonstytuowanym HDL i VLDL, a apoA5 nadal pozostawał związany z VLDL bogatym w TG z powodu zakłócenia hydrolizy VLDL.

Te odkrycia sugerowały, że dystrybucje lipoproteinowe apoC3 i apoA5 były ściśle związane z zawartością TG w TRL. Większość apoC3 i apoA5 znajdowała się w HDL, gdy poziom TG w TRL był niski. Duża część apoC3 i apoA5 redystrybuowała się z HDL do cząsteczek TRL, gdy wzrastała ilość TG w TRL, i stopniowo powracała do HDL wraz z procesem hydrolizy TRL. Jednak biologiczna funkcja i mechanizm regulacji procesu wymiany nie zostały dobrze wyjaśnione.

Plazma TG

ApoC3 i apoA5 są krytycznymi determinantami stężenia TG w osoczu, jak dowodzą obserwacje genetyczne u ludzi. Mutacje utraty funkcji w ludzkim genie APOC3 nadawały niski profil TG w osoczu, podczas gdy pacjenci z mutacją niedoboru APOA5 mieli ekstremalnie wysoki poziom TG w osoczu. Nieprawidłowości w apoC3 i apoA5 były związane z różnymi formami HTG, takimi jak rodzinna hiperchylomikronemia, rodzinna hiperlipidemia mieszana i rodzinna dysbetalipoprotenia. Co ciekawe, ostatnie badania wykazały istnienie pojedynczego miejsca glikozylacji przy treoninie 74 białka apoC3, dając początek czterem głównym proteoformom w osoczu. Forma typu dzikiego, która nie zawiera łańcucha glikanów, jest powszechnie określana jako apoC30a. Pozostałe trzy posiadają rdzeniowy łańcuch glikanowy zbudowany z O-linkowanego disacharydu galaktozy połączonego z N-acetylogalaktozaminą. ApoC30b jest proteoformą, która zawiera tylko rdzeń glikanu, podczas gdy apoC31 i apoC32 zawierają dodatkowo odpowiednio jedną i dwie reszty kwasu sialowego. Co więcej, cztery główne proteoformy apoC3 różnie korelowały z poziomem TG na czczo. Stwierdzono, że przy użyciu spektrometrii masowej pomiaru immunologicznego, osoczowe apoC30a, apoC30b i apoC31 miały pozytywny, podczas gdy apoC32 miał negatywny związek z TG na czczo, sugerując, że analiza poszczególnych izoform apoC3 może dostarczyć bardziej wszechstronnych informacji niż tylko całkowite stężenie apoC3 w osoczu.

Konsekwentnie, myszy z nokautem APOC3 miały zmniejszone stężenie TG (- 30%) w porównaniu z dzikimi miotami, podczas gdy myszy transgeniczne APOC3 wykazały zwiększony poziom TG w surowicy (+ 200% do 2000%) . Z drugiej strony, myszy z nokautem APOA5 miały zwiększone (+ 400%) stężenie TG, podczas gdy myszy transgeniczne APOA5 wykazywały znacznie zmniejszone (- 70%) stężenie tego parametru lipidowego .

Głębokie badania mechanistyczne ujawniły, że apoC3 i apoA5 regulowały stężenie TG w osoczu poprzez wiele ścieżek. ApoC3 hamował hydrolizę TRL pośredniczoną przez LPL, klirens krążących resztek TRL i promował wątrobowe wydzielanie TG. Co ciekawe, apoA5 regulowała metabolizm TG w osoczu w zupełnie przeciwny sposób. Mianowicie, apoA5 przyspieszała hydrolizę TRL, wychwyt resztek TRL przez wątrobę i hamowała wątrobowe wydzielanie TG (ryc. 1).

Plazma RC

RC definiuje się jako całkowitą zawartość cholesterolu w TRL, w tym w VLDL i lipoproteinach o pośredniej gęstości (IDL) w stanie na czczo oraz w VLDL, IDL i resztkach chylomikronów w stanie bez spożywania posiłków. Coraz więcej dowodów wskazuje, że RC jest niezależnym przyczynowym czynnikiem ryzyka choroby niedokrwiennej serca. Co więcej, podwyższone poziomy RC były związane ze zwiększoną śmiertelnością z wszystkich przyczyn u pacjentów z chorobą niedokrwienną serca .

Since apoC3 i apoA5 regulowały metabolizm TRL, nie jest nieoczekiwane, aby znaleźć, że warianty genów APOC3 i APOA5 były związane z poziomami RC. W metaanalizie obejmującej 137 895 osób, RC było o 43% niższe u heterozygot APOC3 loss-of-function w porównaniu z osobami niebędącymi nosicielami. Przeciwnie, kombinacje genotypów wspólnych wariantów APOA5 (c.-1131 T > C, S19 W, i c.*31C > T) wiązały się ze wzrostem RC aż o 56%. Tak więc, celowanie w apoC3 lub apoA5 wydaje się być potencjalnym podejściem do zmniejszenia poziomu RC w osoczu, co może być sprawdzone w przyszłych badaniach.

HDL

HDL wywiera różne właściwości atero-ochronne, w tym pośredniczy w odpływie cholesterolu, chroni śródbłonek naczyniowy, działa przeciwzapalnie i antyapoptotycznie. HDL z niedoborami tych właściwości jest określany jako dysfunkcyjny HDL, co z kolei przyczynia się do progresji CAD. Badania obserwacyjne u ludzi wykazały, że właściwości te są upośledzone pod wpływem zaburzeń patologicznych. Na przykład, upośledzoną zdolność odpływu cholesterolu stwierdzono w przypadku HDL pochodzących od pacjentów z mocznicą. Riwanto i wsp. stwierdzili, że HDL od pacjentów z CAD nie aktywuje śródbłonkowych szlaków anty-apoptotycznych, ale raczej stymuluje potencjalne śródbłonkowe szlaki pro-apoptotyczne. Dzięki analizom spektrometrycznym i biochemicznym, badania wykazały, że upośledzona funkcja HDL ściśle koreluje ze zmianą składu jego proteomu, wśród których wiele uwagi poświęcono zmianom apoC3 i apoA5.

Riwanto i wsp. stwierdzili, że w cząsteczce HDL pochodzącej od pacjentów z CAD występowało znacznie więcej apoC3 w porównaniu ze zdrowymi osobami z grupy kontrolnej. Ponadto, zastosowanie przeciwciała neutralizującego apoC3 w tych HDL poprawiło funkcję HDL mediowaną przeciwko apoptozie śródbłonka. Cho KH wykazał, że zwiększenie zawartości apoC3 w sztucznie odtworzonych HDL zmniejsza ich zdolność do aktywacji acylotransferazy cholesterolu lecytyny (LCAT). Co ciekawe, Luo M i wsp. wykazali, że zawartość ApoC3 w HDL jest ujemnie związana ze zdolnością HDL do odpływu cholesterolu, jednak mechanizm leżący u podstaw tego zjawiska nie jest znany. Z kolei nadekspresja APOA5 u myszy spowodowała zwiększenie zawartości apoA5 w HDL, co wiązało się ze zwiększoną zdolnością odpływu cholesterolu. Rekonstytuowany HDL syntetyzowany z większą ilością apoA5 miał większy rozmiar cząsteczki, większą zawartość lipidów i lepszą zdolność przeciwutleniającą przeciwko LDL in vitro .

Definitywna rola apoC3 i apoA5 w funkcji HDL musi być dalej badana. Doniesiono, że apoC3 w HDL może wiązać się z receptorem scavengera B1 (SR-B1), z niescharakteryzowaną domeną struktury. SR-B1 jest znany jako ważny element w transporcie zwrotnym cholesterolu częściowo dla ułatwienia selektywnego wychwytu estrów cholesterolu z HDL przez wątrobę. Czy ta interakcja apoC3 z SR-B1 wpłynęłaby na transport zwrotny cholesterolu jest nieokreślona.

Wątrobowe wydzielanie VLDL

Jedną z głównych funkcji wątroby jest synteza i wydzielanie VLDL. VLDL składa się z rdzenia z obojętnych lipidów, głównie TG, i kilku apolipoprotein . Spośród nich apolipoproteina B100 (apoB100) jest najważniejsza i zapewnia strukturalną stabilność cząsteczki VLDL. Biogeneza VLDL przebiega w dwóch etapach. Początkowo, tworzenie VLDL rozpoczyna się od syntezy apoB100 w retikulum endoplazmatycznym (ER). Powstający apoB100 jest następnie częściowo lapidowany, tworząc ubogą w lipidy pierwotną cząsteczkę VLDL, co jest ułatwione przez mikrosomalne białko transferowe triglicerydów (MTP). W drugim etapie tworzenia VLDL, pierwotna cząsteczka VLDL łączy się z cząsteczkami bogatymi w triglicerydy, tworząc dojrzałe VLDL bogate w TG. Coraz więcej dowodów wskazuje na to, że apoC3 i apoA5 regulują lipidację VLDL i wpływają na zawartość TG w wątrobie (ryc. 1).

Dane z hodowli komórkowych, doświadczeń na zwierzętach i badań na ludziach potwierdziły, że apoA5 hamuje wydzielanie VLDL-TG i promuje przechowywanie TG w cytozolowych kroplach lipidowych. Komórki McA-RH7777 stably transfekowane ludzką APOA5 wydzielały VLDL, które były mniejsze niż te z komórek kontrolnych, ale miały większy poziom TG w komórkach i większe kropelki lipidowe. Z kolei Ress i wsp. donieśli, że knockdown APOA5 w komórkach HepG2 prowadził do zmniejszenia zawartości TG w komórkach. Wątroby myszy transgenicznych z APOA5 miały zwiększony poziom TG w wątrobie w porównaniu do dzikich osobników. Qin i wsp. stwierdzili, że pacjenci z niealkoholową stłuszczeniową chorobą wątroby (NAFLD) mają podwyższoną ekspresję APOA5 w porównaniu z osobami zdrowymi. Jednak wciąż pozostaje kilka zagadek wymagających dalszego wyjaśnienia. Przede wszystkim, w jaki sposób część apoA5 wymyka się z drogi wydzielania do krwi i wiąże się z cytozolowymi kropelkami lipidowymi? Dodatkowo, w jaki sposób apoA5 promuje wątrobowe magazynowanie TG w kropelkach lipidowych (LD) zamiast wydzielania w postaci VLDL.

Odwrotnie, badania in vivo i in vitro wykazały, że apoC3 ma stymulujący wpływ na lipidację VLDL. Karmienie myszy z nokautem APOC3 dietą wysokotłuszczową przez dwa tygodnie nie stymulowało produkcji VLDL-TG, podczas gdy odtworzenie ekspresji APOC3 za pomocą adenowirusa kodującego ludzki apoC3 spowodowało silną produkcję VLDL-TG. Stymulujący wpływ ludzkiej apoC3 na lipidację VLDL został odtworzony w komórkach McA-RH7777 w warunkach bogatych w lipidy. Ponadto, mutacja w miejscu wiązania reszt w domenie wiążącej lipidy (K58E) apoC3 zniosła ten efekt stymulujący. Wyniki te zostały poparte u ludzi obserwacjami, że dwa SNPs APOC3 (C-482 T, T-455C), prowadzące do zmniejszonej ekspresji APOC3, były skorelowane z podwyższonym poziomem TG w wątrobie i wyższą częstością występowania NAFLD w populacji azjatyckich Hindusów.

Proponuje się, że subkomórkową lokalizacją apoA5 i apoC3 regulujących lipidację VLDL jest przedział ER. Gao i wsp. wysunęli hipotezę, że apoA5 może ułatwiać pączkowanie ER-luminalnych LD na zewnątrz, tworząc cytozolowe LD, a tym samym zmniejszać TG składane w cząsteczkach VLDL. Qin i wsp. stwierdzili, że apoC3 promuje fuzję ER-luminalnych LD z cząsteczkami VLDL podczas lipidacji VLDL. Potrzebne są dogłębne badania skupiające się na podstawach molekularnych leżących u podstaw wpływu apoA5 i apoC3 na lipidację VLDL i metabolizm LD, co zapewni nowe zrozumienie wątrobowej homeostazy TG.

Association with CAD

CAD stała się główną przyczyną śmierci na całym świecie. Cholesterol lipoprotein o małej gęstości (LDL-C) jest dobrze znany jako odgrywający kluczową rolę w patogenezie CAD, a obniżenie stężenia LDL-C w osoczu powoduje znaczne zmniejszenie zachorowalności i śmiertelności z powodu CAD. Jednakże odnotowano, że wiele osób nadal cierpi na CAD pomimo osiągnięcia celu terapeutycznego dla poziomu LDL-C . Dlatego też podejmowane są wysiłki mające na celu identyfikację innych modyfikowalnych czynników ryzyka w celu dalszego zmniejszenia ryzyka wystąpienia CAD. Populacyjne dane genetyczne są wolne od czynników zakłócających i odwrotnej przyczynowości, a zatem są uznawane za ważny sposób identyfikacji nowych potencjalnych czynników ryzyka CAD.

Co ciekawe, wykazano, że genetycznie obniżone poziomy apoC3 w osoczu były związane z obniżonym ryzykiem CAD u ludzi. Nonsensowna mutacja genu APOC3, R19X, była związana z 50% obniżeniem poziomu krążących apoC3. Co ważniejsze, nosiciele rzadkiego wariantu R19X mieli mniejszą częstość występowania zwapnień w tętnicach wieńcowych i niższe 10-letnie ryzyko CAD według Framingham. Kardioprotekcyjne działanie R19X i innych trzech rzadkich wariantów, dwóch mutacji w miejscu splotu (IVS2 + 1G → A; IVS3 + 1G → T) i jednej mutacji typu missense (A43T) w genie APOC3, zostało ostatnio potwierdzone w dwóch badaniach na dużą skalę. W badaniu będącym częścią Exome Sequencing Project of the National Heart, Lung, and Blood Institute około 1 na 150 uczestników był heterozygotycznym nosicielem co najmniej jednej z tych czterech mutacji, a krążące poziomy APOC3 u nosicieli były o 46% niższe niż u osób niebędących nosicielami. Ryzyko CAD wśród 498 nosicieli jakiejkolwiek rzadkiej mutacji APOC3 było o 40% niższe niż ryzyko wśród 110 472 osób niebędących nosicielami. Konsekwentnie, w kohorcie 75 725 uczestników, skumulowane występowanie choroby niedokrwiennej naczyń i choroby niedokrwiennej serca było zmniejszone u heterozygot dla mutacji utraty funkcji w APOC3 (R19X lub A43T lub IVS2 + 1G → A) w porównaniu z osobami niebędącymi nosicielami, z odpowiednim zmniejszeniem ryzyka o 41% i 36% . Zauważono, że odnotowano również tendencję do mniejszej liczby poważnych niekorzystnych zdarzeń związanych z chorobami sercowo-naczyniowymi u pacjentów z wyższym poziomem proteoformy apoC32, podczas gdy stowarzyszenia te nie zostały wykryte dla innych proteoform apoC3, co sugeruje, że apoC32 jest raczej proteoformą utraty funkcji .

Czasem warianty APOA5 prowadzące do obniżenia poziomu apoA5 były związane ze zwiększonym ryzykiem CAD . Związek między -1131 T > C promotorowym polimorfizmem genu APOA5 a ryzykiem CAD został wykazany w dużej metaanalizie. Współczynnik szans dla CAD wynosił 1,18 na allel C vs. T . Ponadto, kilka niezależnych badań konsekwentnie wskazywało, że warianty APOA5 były istotnie związane z ryzykiem zawału serca (MI). Raffaele De Caterina i wsp. stwierdzili silny związek wariantu genu APOA5 -1131 T > C z ostrym zawałem serca o wczesnym początku. Jorgensen AB i wsp. wykazali ponadto zmienność genetyczną w genie APOA5 (c.-1131 T. C, S19 W, i c.*31C. T) związaną z 87% wzrostem ryzyka MI. Do R i wsp. sekwencjonowali eksony genu APOA5 u 6721 osób z MI i 6711 osób z grupy kontrolnej. Zidentyfikowano 46 unikalnych niesynonimicznych lub splice-site pojedynczych wariantów nukleotydowych lub indel frameshifts z częstością alleli < 1%. Co więcej, nosiciele tych rzadkich mutacji w genie APOA5 (1,4% przypadków vs 0,6% kontroli) mieli 2,2-krotnie zwiększone ryzyko wystąpienia MI w porównaniu z kontrolami .

Furthermore, it has been suggested the effects of apoC3 and apoA5 on CAD risk are partially mediated by changes in plasma RC levels. Wulff AB i wsp. stwierdzili, że RC pośredniczy 37% z obserwowanego 41% niższego ryzyka choroby niedokrwiennej naczyń i 54% z obserwowanego 36% niższego ryzyka choroby niedokrwiennej serca u heterozygot APOC3 loss-of-function versus noncarriers . Natomiast warianty genu APOA5 (c.-1131 T. C, S19 W, i c.*31C. T) prowadzące do genetycznie zwiększonego RC wiązały się ze zwiększonym ryzykiem MI. Z drugiej strony, warianty genu APOA5 (c.-1131 T. C, S19 W, i c.*31C. T) związane ze wzrostem RC do 56%, i z odpowiednim ilorazem szans dla MI wynoszącym 1,87 .

Potencjalna korelacja między apoC3 i apoA5

Ponieważ apoC3 i apoA5 regulują metabolizm lipidów i wiążą się z ryzykiem CAD w przeciwny sposób, uzasadnione jest zastanowienie się, czy funkcjonują one niezależnie, czy współpracują. Niektóre wyniki badań na myszach genetycznych sugerowały bliski związek między tymi dwoma białkami, chociaż nie ma aktualnych dowodów na ich bezpośrednią interakcję. Pennacchio i wsp. wykazali, że myszy transgeniczne i myszy pozbawione APOA5 mają odpowiednio obniżony i podwyższony poziom białka apoC3 w wątrobie, podczas gdy nie stwierdzono istotnych zmian w obfitości mRNA apoC3. Rzeczywiście, ilość białka apoC3 w wątrobie była zwiększona o 90% u myszy z nokautem APOA5 i zmniejszona o 40% u myszy transgenicznych APOA5 w porównaniu z osobnikami typu dzikiego. Podobnie, obniżony poziom apoC3 w surowicy został zaobserwowany po nadekspresji ludzkiego APOA5 przez adenowirusa u myszy. Wyniki te sugerują, że apoC3 może wpływać na apoA5 na poziomie transkrypcji i odwrotnie. Jednak mechanizmy leżące u podstaw tego zjawiska są nieznane.