NanoHybrids – Koniugacja przeciwciał z nanocząstkami złota

Sondy z nanocząstkami złota skoniugowane z przeciwciałami umożliwiają badanie i wizualizację procesów komórkowych i molekularnych in vitro i in vivo; jest to krytyczne narzędzie zarówno dla badaczy nauk podstawowych, jak i klinicystów.
Wielu badaczy poświęca nadmierną ilość czasu i energii na samodzielną syntezę tych koniugatów z różnym stopniem powodzenia i niespójnymi wynikami. Większość z nich odkrywa, że podczas samodzielnego wykonywania koniugacji cierpi z powodu niespójnego przyłączania przeciwciał do cząsteczek i niereprodukowalnej wydajności znakowania komórek.
Rozwiązanie pierwszego problemu niespójnego przyłączenia przeciwciała do cząsteczki wymaga zarówno:
(1) utworzenia stabilnego połączenia między cząsteczką a przeciwciałem oraz
(2) właściwej charakterystyki przyłączenia przeciwciała.

Aby utworzyć stabilne połączenie, przeciwciała powinny być kowalencyjnie połączone z powierzchnią. Poniższy schemat przedstawia kilka różnych metod koniugacji przeciwciał.

Metoda adsorpcji fizycznej jest najmniej stabilna. Polega ona na powinowactwie niektórych grup funkcyjnych na białkach, takich jak aminy i tiole, do bycia przyciągniętym przez niekowalencyjne interakcje do powierzchni cząstki. W środowisku in vivo, a nawet w mediach komórkowych, przeciwciała, które są fizycznie zaadsorbowane, mogą być łatwo wyparte.
W związku z tym, metoda koniugacji kowalencyjnej jest najszerzej stosowanym systemem. Zapewnia ona stabilne połączenie między nanocząstką złota a przeciwciałem i można zastosować kilka różnych chemikaliów, takich jak N-hydroksysukcynimid (NHS) połączony z 1-Etylo-3-(3-dimetyloaminopropylo) karbodiimidem (EDC). Jednakże, chociaż ta metoda wytwarza stabilne przyłączenie, nadal musi być scharakteryzowana.

Directional Conjugation for Better Efficiency

Charakteryzacja nanocząstek złota sprzężonych z przeciwciałami zwykle obejmuje oszacowanie stosunku przeciwciał do cząstek poprzez porównanie pomiarów fluorescencji cząstek sprzężonych z przeciwciałami znakowanymi fluoroforami ze znanymi standardami przeciwciał znakowanych fluoroforami. Sam pomiar może być skomplikowany z powodu wygaszania fluoroforu na powierzchni nanocząstek metalu. Ponadto, badacze muszą również przygotować przeciwciało sprzężone z fluoroforem i jego standardy.

Nanohybrydy mogą stosować metodę kierunkowego sprzęgania, która łagodzi wiele z tych problemów.
Aby umożliwić kierunkowe przyłączanie, jeden koniec heterobifunkcyjnej cząsteczki sieciującej jest związany z regionem Fc przeciwciała. Drugi koniec linkera wiąże się bezpośrednio z powierzchnią nanocząstki złota, zapewniając kierunkowe połączenie między przeciwciałem a cząsteczką. Stosując tę metodę, uzyskuje się stabilne połączenie pomiędzy cząsteczką i przeciwciałem, pozostawiając region zmienny (Fv), lub miejsce oddziaływania z antygenem, sterylnie nieskrępowane i dostępne do wiązania.
Kierunkowa natura przyłączenia sprawia, że charakterystyka stosunku przeciwciała do cząsteczki jest bardziej spójna, a także zwiększa wydajność znakowania komórek i ukierunkowanie molekularne. Wydajność znakowania może być zwiększona o 7 do 10 razy przy użyciu kierunkowej w porównaniu do niekierunkowej metody przyłączania. Stosowanie kierunkowo sprzężonych nanocząstek złota może przynieść znaczne oszczędności kosztów, zwiększyć wydajność i przyspieszyć odkrycia naukowe.

Usługi koniugacji przeciwciał na zamówienie

Możemy sprzęgać nasze nanocząstki złota z przeciwciałami, białkami lub dowolnymi innymi cząsteczkami według Państwa wyboru. Zapewniamy również wsparcie techniczne dla naukowców, którzy chcieliby zakupić nasze nanocząstki złota i pracować nad ich koniugacją. Skontaktuj się z nami już dziś, aby uzyskać informacje na temat wymagań dotyczących koniugacji.

.