Andes Virus

10 Vacinas e anticorpos neutralizantes

Não existem vacinas aprovadas pela FDA ou terapêuticas específicas para prevenir ou tratar a infecção por hantavírus e/ou doenças. Estudos em pacientes infectados por HPS (ANDV ou SNV), bem como em pacientes convalescentes infectados por HFRS (PUUV) sugerem uma correlação direta entre a montagem precoce de uma resposta eficiente de anticorpos neutralizantes (nAb) e resultados de doenças mais leves (Bharadwaj et al., 2000; Pettersson et al., 2014; Valdivieso et al., 2006). A eficácia protectora dos soros hiperimunes em modelos animais e humanos sugere ainda que os anticorpos específicos Gn/Gc provocados pela imunização activa ou passiva podem ter utilidade no tratamento da doença por hantavírus (Brocato et al., 2012, 2014; Hooper et al., 2008, 2014a,b; Klingström et al., 2008; Vial et al., 2015). Embora numerosos estudos destaquem a importância dos nAbs para a proteção contra o hantavírus, a vacinação com cDNA poderia proteger os hamsters sírios do desafio letal ANDV na ausência de qualquer atividade nAb, sugerindo que os nAbs são suficientes mas não essenciais (Brocato et al., 2013).

A vacinação é a abordagem mais bem sucedida para induzir um potente estado antiviral e proporcionar proteção contra infecções e doenças virais. Nos últimos 20 anos, numerosas vacinas candidatas e modalidades têm sido avaliadas quanto à sua eficiência contra o hantavírus. Desde 1990, uma vacina contra o HTNV, ativada formalmente, cultivada em cérebros de camundongos (Hantavax™) tem sido comercializada na República da Coréia (Cho et al., 2002; Yamanishi et al., 1988). No entanto, devido à falta de ensaios clínicos bem concebidos, a sua eficácia clínica e a sua imunogenicidade a longo prazo permaneceram pouco claras. Em um estudo clínico recente da fase III, foi relatada seroconversão alta, mas geração pobre de nAb (Song et al., 2016). Outro estudo de caso-controle observou uma eficácia protetora moderada de Hantavax™, especialmente em populações de alto risco (Jung et al., 2018). Apesar da disponibilidade do Hantavax™, portanto, há uma clara e urgente necessidade de novas e mais eficazes vacinas contra o hantavírus.

Como alternativa às vacinas inativadas, vacinas vivas atenuadas usando VSV recombinante ou vetores de adenovírus (AdV) expressando hantavírus Gn/Gc foram desenvolvidas. Uma única injeção de um vetor de VSV replicante, que expressa ANDV Gn/Gc, protegeu os hamsters sírios contra o desafio letal do ANDV logo nos 3 dias após a imunização (Brown et al., 2011; Prescott et al., 2014). A proteção durou até 6 meses e a perda de proteção em pontos posteriores correlacionados com uma perda de respostas nAb (Prescott et al., 2014). A vacinação dos hamsters às 24 h após o desafio pós-HANDV foi amplamente protetora, sugerindo que a indução de um potente estado antiviral pelo próprio vetor recombinante pode ter contribuído para a proteção (Brown et al., 2011; Prescott et al., 2014). Os VSVs de ciclo único portadores de HTNV Gn/Gc também ofereceram proteção contra a infecção por HTNV em um modelo de mouse Balb/c não letal (Lee et al., 2006). Vetores humanos recombinantes baseados no sorotipo 5 (Ad5V), que expressam ANDV Gn ou Gc e vetores caninos recombinantes baseados no sorotipo 2 do AdV, que expressam SEOV Gn, ofereceram proteção aos hamsters sírios e ratos Balb/c contra o desafio do vírus letal, respectivamente (Safronetz et al., 2009; Yuan et al., 2009). Os hamsters sírios vacinados com um vetor do vírus da vacina que expressa as proteínas HTNV Gn/Gc e N não mostraram viremia quando desafiados com HTNV ou SEOV, mas foram parcialmente suscetíveis à infecção por PUUV, sugerindo proteção parcial cruzada entre hantavírus intimamente relacionados, e a possibilidade de que vacinas amplamente protetoras contra hantavírus possam ser projetadas (Chu et al, 1995; Schmaljohn et al., 1992).

Embora as plataformas de vacinas baseadas em vírus tenham demonstrado ser promissoras nos modelos animais, a sua tradução para o uso humano tem sido complicada por vários factores (Tatsis e Ertl, 2004). A imunidade pré-existente à Ad5V e outros serótipos AdV comuns pode reduzir a eficácia da vacina. Este problema pode ser evitado estabelecendo vectores baseados em serótipos humanos raros (Barouch et al., 2004; Lemckert et al., 2005) ou adenovírus animais (Kobinger et al., 2006). A baixa eficácia da vacina devido à imunidade pré-existente também foi observada com vetores baseados no vírus da vacina: os vírus da vacina que expressam HTNV Gn/Gc eliciaram títulos de nAb específicos de HTNV em 72% dos pacientes vacinados, mas apenas em 26% dos pacientes imunes ao vírus da vacina (McClain et al., 2000). Embora haja pouca imunidade pré-existente contra o VSV na maioria das populações humanas, a crescente popularidade das vacinas baseadas no VSV pode alterar este cenário no futuro (Lévy et al., 2018; Regules et al., 2017; Suder et al., 2018).

Vacinas de subunidade baseadas no ADN, incluindo vetores de cDNA que codificam o hantavírus Gn/Gc, também foram avaliadas. A imunização de hamsters sírios com vacinas de DNA codificando SEOV ou HTNV Gn/Gc os tornou resistentes aos desafios com HTNV, SEOV e DOBV, mas não com os PUUV mais divergentes (Hooper et al., 1999, 2001). As vacinas PUUV e SNV Gn/Gc baseadas em cDNA também foram protetoras em hamsters sírios (Brocato et al., 2013; Hooper et al., 2013). Inesperadamente, uma vacina equivalente ANDV cDNA não foi imunogênica ou protetora em hamsters sírios, apesar da geração de altos níveis de nAb contra ANDV, bem como de SNV heterólogo em rhesus macaques (Custer et al., 2003). A transferência passiva de soros conferiu proteção completa aos hamsters sírios mesmo quando realizada 4-5 dias após o desafio de ANDV e atrasou o desenvolvimento do HPS quando injetado 1 dia antes do desafio (Custer et al., 2003). Em dois estudos clínicos fase I, três vacinações com vacinas cDNA expressando HTNV ou PUUV Gn/Gc por parto epidérmico mediado por partículas mostraram imunogenicidade limitada: apenas 30-56% dos indivíduos desenvolveram uma resposta nAb (Boudreau et al., 2012; Hooper et al., 2014a,b). cDNA eletroporação melhorou a geração de nAb e resultou em respostas nAb em até 78% dos indivíduos (Hooper et al, 2014a,b).

Transferência passiva de anticorpos policlonais de animais imunizados com hantavírus Gn/Gc conferiu proteção contra o desafio letal ANDV em hamsters sírios (Brocato et al., 2012, 2014; Haese et al., 2015; Hooper et al., 2008, 2014a,b). É importante ressaltar que a transfusão passiva de soros hiperimunes de doadores convalescentes de ANDV para pacientes com SPH aguda melhorou os resultados da doença e os títulos de nAb foram correlacionados inversamente com a gravidade da SPH (Vial et al, 2015) sugerindo que a terapêutica anti-hantavírus baseada em mAb poderia ser desenvolvida como um complemento às vacinas.

Para o desenvolvimento de terapias baseadas em mAb, Garrido et al. isolaram células B de ANDV Gn/Gc de memória específica de um paciente convalescente HPS para gerar anticorpos IgG humanos recombinantes e avaliaram dois mAbs potencialmente neutralizantes (JL16 e MIB22) por sua eficácia pós-exposição em hamsters sírios (Garrido et al., 2018). Todos os hamsters tratados com os mAbs, isoladamente ou em combinação, aos 3 e 8 dias após o desafio pós-morte ANDV foram protegidos. Um dos dois mAbs, JL16, limpou completamente o vírus do pulmão do hamster, apesar de sua menor capacidade de neutralização in vitro, sugerindo que o anticorpo Efeito dependente de Fc, incluindo a citotoxicidade celular dependente de anticorpos (ADCC), pode desempenhar papéis na limpeza do hantavirus in vivo.