DETECÇÃO DE ANTIBÓDIOS ANTI-NEUTROFIL
Anticorpos Neutrófilos podem causar uma variedade de desordens incluindo neutropenia imunitária neonatal, neutropenia auto-imune, neutropenia imunitária após transplante de medula óssea, neutropenia imunitária induzida por drogas e lesão pulmonar aguda relacionada com transfusão. Não existe actualmente uma única técnica disponível que defects todos os anticorpos neutrófilos clinicamente relevantes. Uma combinação de aglutinação de granulócitos e testes de imunofluorescência é actualmente o meio de detecção mais eficaz. Devido à tendência autolítica dos neutrófilos armazenados, têm de ser utilizados neutrófilos frescos cuidadosamente isolados como células de teste. Os neutrófilos de teste devem ser tipados para os antígenos neutrófilos NA1, NA2, NB1, SH, e 5b. Se não for possível determinar a especificidade de aloanticorpos a partir do padrão de reacção com células de teste tipadas, o soro deve ser testado num ensaio específico de antigénio com base na imobilização de granulócitos por anticorpos monoclonais (ensaio MAIGA). Para evitar o incómodo isolamento celular para identificação de aloanticorpos, estabelecemos linhas estáveis de células de mamíferos que expressam os antigénios neutrófilos NA1, NA2 e SH. Cerca de 30% dos auto-anticorpos neutrófilos mostram ligação preferencial ao antigénio NA1 e são melhor detectados utilizando neutrófilos de dadores homozigotos NA1 ou células de mamíferos que expressam células de mamíferos NA1. Os auto-anticorpos só são detectados em 74% dos soros durante a primeira ronda de rastreio de anticorpos. Por outro lado, um teste positivo de anticorpos directos dos neutrófilos do doente não pode ser considerado como prova da presença de auto-anticorpos porque os neutrófilos do doente são normalmente activados com expressão aumentada de complemento e Fcyreceptors resultando em ligação não específica de IgG. Portanto, o teste dos soros do doente em intervalos para anticorpos neutrófilos não ligados continua a ser a melhor forma de detecção de auto-anticorpos.