NanoHybrids – Antibody Conjugation for Gold Nanoparticles
Antibody conjugated gold nanoparticle probes allow for the study and visualization of cellular and molecular processes in vitro and in vivo; a critical tool for both basic science researchers and clinicians.
Muitos investigadores gastam tempo e energia excessivos sintetizando estes conjugados com vários graus de sucesso e resultados inconsistentes. A maioria descobre que, embora realizem conjugações por si próprios, sofrem de uma ligação anticorpo-para-partícula inconsistente e de uma eficiência de etiquetagem de células não reprodutíveis.
Solucionar o primeiro problema de ligação anticorpo-para-partícula inconsistente requer tanto:
(1) criação de uma ligação estável entre a partícula e o anticorpo e
(2) caracterização adequada da ligação anticorpo.
Para criar uma ligação estável, os anticorpos devem ser ligados covalentemente à superfície. O esquema abaixo mostra vários métodos diferentes de conjugação de anticorpos.
O método de adsorção física é o menos estável. Ele depende da afinidade de certos grupos funcionais em proteínas como aminas e tióis para serem atraídos através de interações não covalentes à superfície da partícula. Em um ambiente in vivo, ou mesmo em meios celulares, anticorpos que são fisicamente adsorvidos podem ser facilmente deslocados.
O método de conjugação covalente é o regime mais amplamente utilizado. Ele fornece uma ligação estável entre a nanopartícula de ouro e o anticorpo e vários produtos químicos diferentes, como N-Hidroxisuccinimida (NHS) acoplado com 1-Etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC) podem ser empregados. Entretanto, enquanto este método produz uma fixação estável, ele ainda deve ser caracterizado.
Conjugação Direcional para Melhor Eficiência
Caracterização de nanopartículas de anticorpos conjugados com ouro geralmente envolve a estimativa da relação anticorpo/partícula através da comparação de medidas de fluorescência de partículas conjugadas de anticorpos marcados com fluoróforo com padrões conhecidos de anticorpos marcados com fluoróforo. A medição em si pode ser complicada pelo têmpera do fluoróforo na superfície da nanopartícula metálica. Além disso, os pesquisadores também devem preparar o anticorpo conjugado ao fluoróforo e seus padrões.
NanoHybrids podem empregar um método de conjugação direcional que alivia muitos desses problemas.
Para permitir a fixação direcional, uma extremidade de uma molécula reticuladora heterobifuncional é ligada à região Fc do anticorpo. A outra extremidade do linker liga-se diretamente à superfície da nanopartícula de ouro, fornecendo uma ligação direcional entre o anticorpo e a partícula. Usando este método, uma ligação estável entre a partícula e o anticorpo é realizada deixando a região variável (Fv), ou local de interação do antígeno, estericamente sem obstáculos e disponível para ligação.
A natureza direcional da ligação torna a caracterização da relação anticorpo/partícula mais consistente e também melhora a eficiência da etiquetagem celular e o direcionamento molecular. A eficiência da etiquetagem pode ser aumentada de 7 a 10 vezes usando um método de fixação direcional versus não direcional. O uso de nanopartículas de ouro conjugadas direcionalmente pode resultar em significativa economia de custos, aumentar a produtividade e acelerar a descoberta científica.
Serviços de conjugação de anticorpos personalizados
Podemos conjugar nossas nanopartículas de ouro com anticorpos, proteínas ou qualquer outro tipo de moléstia de sua escolha. Nós também fornecemos suporte técnico para pesquisadores que gostariam de comprar nossas nanopartículas de ouro e trabalhar com as conjugações. Contacte-nos hoje para os seus requisitos de conjugação personalizados.
