Universidade Estadual do Kansas

Março de 2019

Fator Reumatóide (RF) e Anticorpo Anti-nuclear (ANA) no Diagnóstico de Distúrbios Autoimunes em Pacientes Veterinários

Por Drs. Brandy Kastl e Nora Springer

O diagnóstico de distúrbios auto-imunes em medicina veterinária pode ser um desafio. Os títulos séricos de anticorpos auto-imunes, particularmente para o factor reumatóide (RF) e/ou anticorpos anti-nuclear (ANA), são frequentemente utilizados quando se suspeita de doença auto-imune. No entanto, estes dois testes são de grande utilidade diagnóstica quando interpretados no contexto de um quadro clínico completo. A compreensão tanto dos pontos fortes como das armadilhas da detecção de autoanticorpos irá melhorar a interpretação precisa dos resultados positivos. Para este artigo, vamos utilizar o trabalho de diagnóstico da poliartrite como um exemplo da utilidade clínica da RF e do ANA.

Os títulos de RF e ANA são frequentemente utilizados no trabalho de diagnóstico da suspeita de poliartrite imune em cães (ver Tabela 1 – Abordagem Diagnóstica da Poliartrite Canina). A avaliação diagnóstica da poliartrite, independentemente da espécie, deve começar com radiografias da(s) articulação(ões) afetada(s) e análise concomitante do líquido sinovial. As radiografias determinam se as lesões artríticas são erosivas (ou seja, envolvimento ósseo) ou não erosivas (ou seja, sem envolvimento ósseo). Entretanto, a análise do líquido sinovial identifica inflamação e, ocasionalmente, organismos infecciosos. A ausência de organismos microscopicamente visíveis dentro do líquido sinovial não exclui uma etiologia infecciosa; portanto, testes apropriados de doenças infecciosas são necessários. Em última análise, a combinação de características radiográficas de lesão, achados de fluido sinovial e resultados de doenças infecciosas acessórias reduzirá a lista diferencial (ver Tabela 1) na caninepoliartrose. Quando as características da lesão se encaixam e as doenças infecciosas foram excluídas, ambos os títulos de RF e ANA fornecem suporte adicional para o diagnóstico de artrite reumatóide (AR) ou lúpus eritematoso sistêmico (LES), respectivamente.

Figura 1: Esquema do Fator Reumatóide

Artrite reumatóide deve ser considerada em casos de poliartrite neutrofílica erosiva sem etiologia infecciosa identificável. Informações adicionais sobre o diagnóstico de AR, podem ser encontradas em www.rheumatology.org dentro dos Critérios de Classificação ACR-EULAR 2010 para Artrite Reumatóide, que é considerada aplicável para espécies veterinárias. Na AR, acumulam-se auto-anticorpos dirigidos contra a região cristalizável (Fc) do fragmento de anticorpos IgG (Figura 1). Estes autoanticorpos IgM, IgA ou IgG são colectivamente referidos como factor reumatóide (RF). Em circunstâncias normais, a RF facilita a remoção de complexos anticorpos-antigénios após uma resposta imunológica. Devido a esta função imunológica normal, os títulos séricos de RF aumentados não são patognomônicos para AR e podem estar presentes em uma pequena porcentagem de indivíduos normais ou aqueles com condições inflamatóriasotherchrônicas. Em pacientes com AR, a produção excessiva de RF ocorre após o início da inflamação articular inicial e subsequentemente potencia a formação de artrite através da deposição de complexos imunológicos nos tecidos articulares. Devido a este atraso no acúmulo de RF, uma pequena porcentagem de pacientes com AR terá títulos negativos de RF. Independentemente disso, a determinação dos títulos séricos de RF continua a ser a base do diagnóstico de AR.

Em contraste com a AR, o lúpus eritematoso sistêmico (LES) causa uma poliartrose inflamatória nãoerosiva. Em cães, o diagnóstico de LES é frequentemente baseado na presença de ≥ 2 sinais clínicos associados à auto-imunidade (Tabela 2. Critérios diagnósticos propostos para o LES canino) em combinação com um título sérico de ANA > 1:160. Anticorpo antinuclear (ANA) é um termo guarda-chuva para autoanticorpos dirigidos contra vários antígenos nucleares, tais como histônios e DNA. Tal como na RF, um título de ANA sérico positivo não é patognomónico para o diagnóstico de LES. Títulos positivos de ANA podem ser observados em indivíduos saudáveis ou associados a inflamação crônica (por exemplo, dermatite atópica, hepatite Doberman), doenças infecciosas (por exemplo, Ehrlichiosis, Leishmaniasis), neoplasia ou medicamentos (por exemplo, sulfonamidas, penicilina, tetraciclinas). Assim, a detecção de ANA sérica deve ser reservada para casos clínicos em que haja forte suspeita de LES. Como os antígenos nucleares são bem conservados entre as espécies de mamíferos, os títulos de ANA canino no KSVDL são determinados através da detecção indirecta de anticorpos flourescentes utilizando hepatócitos de rato como substrato (Figura 2). Diluições em série múltiplas do soro do doente são incubadas com uma preparação fina de células hepáticas de rato. O ANA presente dentro do soro liga-se aos núcleos dos hepatócitos do rato. Em seguida, é adicionado um anticorpo secundário marcado com flourescente para realçar os anticorpos do doente (isto é, ANA) complexados com os seus antigénios nucleares (Figura 2).

Figure 2A. Esquema de Detecção Indirecta de Anticorpos Flourescentes de Soro Canino Títulos de ANA (Não desenhados à escala).	Figure 2B. Resultado positivo no teste com imunofluorescência localizada aos núcleos.

Em conclusão, os títulos séricos de RF e ANA podem ser úteis no diagnóstico de doenças auto-imunes. É importante ressaltar que ambos os títulos séricos de RF e ANA devem ser reservados para pacientes com sintomas clínicos compatíveis com artrite reumatóide e lúpus eritematoso sistêmico, respectivamente. Doenças infecciosas, outras doenças auto-imunes e condições neoplásicas devem ser efetivamente descartadas antes da realização destes testes e especialmente antes da interpretação de resultados positivos. O Laboratório de Imunologia Clínica do KSVDL oferece actualmente a detecção comercial validada de títulos séricos de RF e ANA para caninos. Aproximadamente 1-3 mL de soro, separado do coágulo de sangue e colocado dentro de um tubo superior vermelho fresco, são solicitados para a realização dos testes. Uma vez separado, o soro deve ser armazenado na geladeira e enviado com uma embalagem fria dentro de 1-2 dias após a coleta. Para questões adicionais relativas a qualquer um destes testes, por favor contacte o KSVDL Client Care no número 1-866-512-5650 ou 785-532-5650.

Table 1. Abordagem diagnóstica da poliartrite canina	Quadro 2: Critérios de diagnóstico propostos para o LES canino