Vetores retrovirais anfotrópicos e VSV-G-pseudotipados transduzem células progenitoras hematopoéticas humanas com eficiência semelhante

Uma restrição da transferência de genes retrovirais para células-tronco hematopoéticas é o baixo nível de receptor do vírus anfótropo. No presente estudo, examinamos se os vetores retrovirais pseudotipados com a proteína G do vírus da estomatite vesicular (VSV) podem superar essa restrição. Células progenitoras humanas purificadas por contas magnéticas e classificação celular foram transduzidas com um vetor retroviral anfotrópico ou VSV-G-pseudotipado contendo o receptor truncado do fator de crescimento do nervo humano como um gene marcador. As células foram pré-estimuladas com flt-3 ligand, fator de célula tronco e interleucina-3 e transduzidas em fibronectina. A expressão do gene marcador foi analisada por citometria de fluxo. A eficiência de transdução do vírus anfotrópico e VSV-G-pseudotipado para células CD34+ não diferiu significativamente. A transferência de genes para as células CD34+CD38-, que são enriquecidas em progenitores mais imaturos, não foi restrita e as eficiências de transferência para este subconjunto também foram semelhantes para ambos os pseudotipos. A adição de fibronectina melhorou consideravelmente a transferência de genes com o vetor anfótropo (5 a 19,3 vezes, média 12,6), enquanto o efeito sobre o tipo VSV-G-pseudotipo foi muito menos pronunciado (1- a 3,9 vezes, média 2,1, P = 0,04). Em conclusão, altos níveis de transferência de genes para progenitores hematopoiéticos humanos foram alcançados com um protocolo de transdução otimizado, e a eficiência de transdução não pôde ser melhorada ainda mais com o uso do VSV-G-pseudotipos. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.