Antineoplastic Antibiotic

7.2.3 Medicamente mAb-Enediyne

Antibioticele antitumorale endiene cu activități antitumorale foarte puternice sunt produse de o varietate de microorganisme.43 Antibioticele enediinice au fost împărțite în două subfamilii, incluzând endiene ciclice cu nouă membri, cum ar fi kedarcidina, LDM, maduropeptina, și endiene ciclice cu zece membri, cum ar fi calicheamicinele, esperamicinele și dynemicinele. Endiienele ciclice cu nouă membri sunt compuse din cromofor și apoproteină cu legătură necovalentă. Aceste antibiotice endiene sunt unul dintre cei mai puternici agenți antitumorali și au o arhitectură moleculară unică, mecanisme complicate de acțiune și activități biologice remarcabile, producând rupturi monocatenare și bicatenare în ADN.44 Majoritatea antibioticelor endiene au activități rapide și puternice împotriva celulelor canceroase și prezintă o activitate antitumorală mult mai mare (de 100 până la 1000 de ori) în raport cu medicamentele de chimioterapie utilizate pe scară largă, cum ar fi adriamicina. Utilizarea directă a antibioticelor enediinice ca medicamente antitumorale este, în general, limitată din cauza lipsei de specificitate a celulelor tumorale.45 Este foarte de dorit să se genereze compuși enediinici modificați cu specificitate și proprietăți farmacologice îmbunătățite. mAb livrează în mod specific agentul citotoxic către celulele tumorale și maximizează efectul antitumoral al acestuia și minimizează expunerea țesutului normal, ceea ce duce la un indice terapeutic îmbunătățit. Mai mulți conjugați mAb-enediină s-au dovedit a fi promițători din punct de vedere clinic și au avut succes în chimioterapia țintită a cancerului.46

GO (Mylotarg) constă într-un anticorp umanizat anti-CD33 (hP67.6) legat de diclorura de N-acetil-gamma-calicheamicină 1,2-dimetilhidrazină. Odată ce anticorpul se atașează la antigenul de suprafață, acesta este rapid internalizat. Calicheamicina, o enedină puternică, este ulterior eliberată și acționează ca agent antitumoral citotoxic. Mylotarg a fost aprobat de către FDA din SUA în anul 2000 pentru utilizare ca monoterapie la pacienții cu vârsta de 60 de ani și peste cu LMA recidivată. În studiile clinice, Mylotarg a demonstrat eficacitate împotriva LMA, chiar dacă atât medicamentul, cât și liantul utilizat pentru a-l atașa la mAb sunt relativ instabile în condiții fiziologice, iar preparatul este foarte eterogen, doar ~50% din mAb existând efectiv în forma conjugată.47 GO cu agent unic și combinațiile cu chimioterapicele standard au fost explorate pe scară largă în LMA. Hepatotoxicitatea și mielosupresia întârziată sunt limitatoare de doză. Profilul de toxicitate este redus prin scăderea dozelor de GO și chiar prin administrarea unei singure perfuzii. Imunoterapia țintită cu GO pentru tratamentul LMA a produs remisiuni. GO are o toxicitate acceptabilă și produce rate de răspuns care se apropie de 30%. Eficacitatea GO în monoterapie și în terapie combinată pentru tratamentul LMA de novo și recidivă rămâne în curs de investigare. În vederea reducerii toxicității și a îmbunătățirii eficacității, doza și schema optimă, precum și asocierea cu alți agenți chimioterapici standard trebuie definite în cadrul unor studii clinice de amploare.

Până în prezent, sunt explorate pentru aplicații terapeutice o serie de conjugate de calicheamicină cu destinație tumorală legate de mAb împotriva diferitelor ținte tumorale. CMC-544 este un imunoconjugat specific CD22 de calicheamicină și mAb care se leagă de CD22 uman cu afinitate mare și determină o activitate citotoxică puternică împotriva celulelor B maligne CD22-pozitive. CMC-544 previne instalarea xenogrefele de limfom cu celule B uman subcutanat și determină, de asemenea, regresia xenogrefele de limfom cu celule B mici și mari stabilite la șoarecii nude. CMC-544 asigură supraviețuirea pe termen lung a șoarecilor cu limfom cu celule B diseminat sistemic. Aceste rezultate susțin aplicarea clinică a CMC-544 ca agent terapeutic țintit în tratamentul malignităților limfoide B CD22-pozitive. CMC-544 a fost evaluat în cadrul studiilor clinice la pacienții cu LNH cu celule B. 48 Efectul CMC-544, un mAb anti-CD22 conjugat cu calicheamicină, a fost analizat în raport cu CD22 și P-glicoproteina (P-gp) în leucemia limfatică cronică cu celule B (LLC) și LNH in vitro. Liniile celulare utilizate au fost liniile parentale Daudi și Raji CD22-pozitive, precum și sublinii lor P-gp pozitive, Daudi/MDR și Raji/MDR. Au fost utilizate, de asemenea, celule care au fost obținute de la 19 pacienți cu LLC cu celule B sau NHL. CMC-544 nu a fost eficient pe celulele Daudi/MDR și Raji/MDR în comparație cu celulele lor parentale. Modificatorii MDR, PSC833 și Ms209, au restabilit efectul citotoxic al CMC-544 în sublinii care exprimă P-gp. În probele clinice, efectul citotoxic al CMC-544 a fost invers proporțional cu cantitatea de P-gp (P=0,003) și cu acumularea intracelulară de rodamină-123 (P<0,001). Pe de altă parte, efectul s-a corelat pozitiv cu cantitatea de CD22 (P=0,010). Efectul CMC-544 depinde de nivelurile de CD22 și P-gp. Aceste constatări vor ajuta la prezicerea eficacității clinice a acestui medicament asupra acestor tumori maligne cu celule B, sugerând un efect benefic în cazul utilizării combinate a CMC-544 și a modificatorilor MDR.

Compusul CMB-401 este un imunoconjugat format din mAb hCTM01 îndreptat împotriva mucinei epiteliale polimorfe legat covalent de antibioticul citotoxic calicheamicină printr-un linker amidic.26 CMB-401 a demonstrat o distrugere țintită a celulelor care exprimă MUC1 in vitro și a produs efecte antitumorale pronunțate, legate de doză, într-un interval de doze de opt ori mai mare față de un xenograft de carcinom ovarian care exprimă MUC1 (OvCar-3). CMB-401 a fost foarte activ în modelele cu regimuri cu doze unice sau multiple și a provocat regresii complete la cele mai mari doze. În cadrul unui studiu clinic, CMB-401 a fost evaluat ca monoterapie pentru tratamentul carcinomului ovarian epitelial epitelial (EOC) recurent sensibil la platină (EOC).25 După o doză inițială IV de hCTM01 (fără calicheamicină), CMB-401 legat de calicheamicină (16 mg/m2 IV) a fost administrat timp de 60 de minute, timp de până la șapte cicluri, cu 4 săptămâni între cicluri. Nouăsprezece pacienți au fost evaluabili. Modificările măsurabile observate în urma administrării CMB-401 nu au îndeplinit criteriile pentru PR. CMB-401 nu a fost eficient ca monoterapie pentru acest tip de EOC. MTD a fost atinsă la 16 mg/m2. CMB-401 pare să aibă un profil de toxicitate acceptabil, cu o activitate demonstrabilă împotriva EOC.49 Evenimentele adverse resimțite de pacienții din cadrul studiului au inclus greață, astenie, dureri abdominale, cefalee, anorexie și diaree, în cea mai mare parte la un nivel de toxicitate de gradul 1 sau 2. Pe baza datelor publicate cu privire la eficacitatea conjugatelor care administrează calicheamicină prin intermediul unor lianți hibrizi (bifuncționali), se sugerează că liantul amidă utilizat în CMB-401 ar fi putut contribui la eșecul acestuia de a induce RP la pacienți. Utilizarea de linkeri hibrizi pentru a direcționa hCTM01 către EOC ar putea justifica investigații suplimentare.

Antibioticul antitumoral LDM, denumit inițial C1027, care este izolat din filtratul de bulion al Streptomyces globisporus C1027 prezintă o citotoxicitate extrem de puternică împotriva celulelor canceroase umane cultivate și o inhibiție marcantă asupra tumorilor transplantabile în modele animale.50,51,52 LDM este compus dintr-o apoproteină și un cromofor,53 iar greutatea moleculară a primei este de 10.500 Da. Pe baza structurii holoproteinei, mecanismele presupuse de stabilizare și eliberare a cromoforului sunt executate de apoproteină.54 Fracțiunea beta-tirozină a cromoforului ar putea juca un rol important pentru stabilizarea sistemului de endiene, iar disocierea cromoforului de apoproteină ar funcționa ca declanșator. LDM cu o arhitectură moleculară unică ar fi un candidat promițător de medicament „cap de război”. În ceea ce privește valorile IC50, citotoxicitatea LDM asupra celulelor de carcinom de colon uman HT-29 a fost de 10.000 de ori mai puternică decât cea a mitomicinei C și a adriamicinei. Utilizând diferite metode de legare a LDM la mAb împotriva celulelor de hepatom, se prepară două tipuri de imunoconjugate: (1) un conjugat direct este realizat prin legarea LDM la mAb; (2) un conjugat asamblat este realizat prin două etape, legare și reconstituire, în care apoproteina este conjugată la mAb și apoi cromoforul este adăugat la conjugatul mAb-apoproteină. Testul clonogenic arată că citotoxicitatea conjugatului asamblat este mult mai puternică decât cea a conjugatului direct.55 Experimentul in vivo arată că imunoconjugatul asamblat inhibă selectiv și puternic creșterea tumorală în comparație cu LDM liber.56

Conjugatul 3G11-LDM a fost preparat prin legarea mAb 3G11 modificat cu 2-iminotiolan împotriva colagenazei de tip IV la fracțiunea lizină-69 a apoproteinei LDM prin SPDP sau SMBS ca liant medicamentos intermediar.57 3G11 a prezentat imunoreactivitate pozitivă în carcinomul de colon, fibrosarcomul, hepatomul și imunoreactivitate negativă în țesuturile nonmaligne adiacente.58 3G11-LDM a păstrat imunoreactivitatea lui 3G11 împotriva colagenazei de tip IV, a inhibat activitatea de secreție a colagenazei de tip IV și a prezentat o citotoxicitate extrem de puternică în comparație cu LDM liber. În modelul animal, 3G11-LDM a suprimat în mod remarcabil creșterea hepatomului 22 și a fibrosarcomului HT-1080 și a crescut durata de supraviețuire a șoarecilor purtători de tumori. În plus, eficacitatea antitumorală și durata de supraviețuire a conjugatului au fost mai mari decât cele ale LDM și/sau 3G11 liber. Conjugatul 3G11-LDM prezintă efecte antitumorale mult mai puternice decât doza echivalentă de LDM liber și poate avea un potențial terapeutic promițător în tratamentul cancerului.

.