Kansas State University

BY admin
|

Martie 2019

Factorul reumatoid (RF) și anticorpii antinucleari (ANA)în diagnosticul tulburărilor autoimune la pacienții veterinari

De Drs. Brandy Kastl și Nora Springer

Diagnosticul tulburărilor autoimune în medicina veterinară poate fi o provocare. Titrurile serice de autoanticorpi, în special pentru factorul reumatoid (RF) și/sau anticorpii antinucleari (ANA), sunt adesea utilizate atunci când se suspectează o boală autoimună. Cu toate acestea, ambele teste sunt de cea mai mare utilitate diagnostică atunci când sunt interpretate în contextul tabloului clinic complet. Înțelegerea atât a punctelor forte, cât și a capcanelor detecției autoanticorpilor va îmbunătăți interpretarea precisă a rezultatelor pozitive. Pentru acest articol,vom folosi bilanțul de diagnostic pentru poliartrită ca exemplu de utilitate clinică atât a RF cât și a ANA.

Titrii serici RF și ANA sunt adesea utilizați în bilanțul de diagnostic pentru poliartrita imunomediată suspectată la câini (a se vedea Tabelul 1 – Abordarea diagnostică a poliartritei canine). Evaluarea diagnostică a poliartritei, indiferent de specie,ar trebui să înceapă mai întâi cu radiografii ale articulației (articulațiilor) afectate și analiza concomitentă a lichidului sinovial. Radiografiile determină dacă leziunile artrozice sunt erozive (adică implicare osoasă) sau neerozive (adică fără implicare osoasă). Între timp, analiza lichidului sinovial identifică inflamația și, ocazional, organismele infecțioase. Absența organismelor vizibile la microscop în lichidul sinovial nu exclude o etiologie infecțioasă; prin urmare, sunt necesare teste adecvate pentru boli infecțioase. În cele din urmă, combinația dintre caracteristicile leziunilor radiografice, rezultatele lichidului sinovial și rezultatele testelor auxiliare pentru boli infecțioase va reduce lista diferențială (a se vedea tabelul 1) în poliartrita canină. Atunci când caracteristicile leziunilor se potrivesc și bolile infecțioase au fost excluse, atât RF, cât și titlurile ANA oferă un sprijin suplimentar pentru un diagnostic de poliartrită reumatoidă (RA) sau, respectiv, lupus eritematos sistemic (LES).

Figura 1: Schema factorului reumatoid

Artrita reumatoidă trebuie luată în considerare în cazurile de poliartrită erozivă, neutrofilică, fără etiologie infecțioasă identificabilă. Informații suplimentare cu privire la diagnosticul de AR, pot fi găsite la www.rheumatology.org în cadrul Criteriilor de clasificare ACR-EULAR 2010 pentru artrita reumatoidă, care sunt considerate aplicabile pentru speciile veterinare. În RA, se acumulează autoanticorpi direcționați împotriva regiunii fragmentului cristalizabil (Fc) al anticorpilor IgG (figura 1). Acești autoanticorpi IgM, IgA sau IgG sunt denumiți colectiv factor reumatoid (FR). În condiții normale, FR facilitează eliminarea complexelor anticorp-antigen în urma unui răspuns imunologic. Din cauza acestei funcții imunologice normale, titrurile serice crescute de FR nu sunt patognomonice pentru PR și pot fi prezente la un procent mic de indivizi normali sau la cei cu alte afecțiuni inflamatorii cronice. La pacienții cu AR, producția excesivă de FR are loc după debutul inițial al inflamației articulare și ulterior potențează formarea artritei prin depunerea de complexe imune în țesuturile articulare. Din cauza acestei întârzieri în acumularea RF, un procent mic de pacienți cu AR vor avea titruri negative de RF. Indiferent de aceasta, determinarea titlurilor serice de RF rămâne un pilon de bază în diagnosticul de PR.

În contrast cu PR, lupusul eritematos sitemic (LES) determină o poliartrită inflamatorie neerozivă. La câini, diagnosticul de LES se bazează adesea pe prezența a ≥ 2 semne cliniceasociate cu autoimunitatea(Tabelul 2. Criterii de diagnostic propuse pentru LES canin) în combinație cu un titru seric ANA > 1:160. Anticorpul antinuclear (ANA) este un termen generic pentru autoanticorpii direcționați împotriva diferitelor antigene nucleare, cum ar fi histonele și ADN. Ca și în cazul FR, un titru seric pozitiv de ANA nu este patognomonic pentru diagnosticul de LES. Titrurile pozitive de ANA pot fi observate la indivizi sănătoși sau asociate cu inflamații cronice (de exemplu, dermatită atopică, hepatită Doberman), boli infecțioase (de exemplu, Ehrlichioză, Leishmanioză), neoplazii sau medicamente (de exemplu, sulfonamide, penicilină, tetracicline). Astfel, detectarea ANA seric ar trebui să fie rezervată cazurilor clinice în care LES este puternic suspectat. Deoarece antigenele nucleare sunt bine conservate între speciile de mamifere, titlurile ANA canine la KSVDL sunt determinate prin detectarea indirectă a anticorpilor flourescenți utilizând hepatocite de șobolan ca substrat (figura 2). Mai multe diluții în serie ale serului pacientului sunt incubate cu un preparat subțire de celule hepatice de șobolan. ANA prezent în ser se leagă de nucleele hepatocitelor de șobolan. Apoi, se adaugă un anticorp secundar marcat cu flourescent pentru a evidenția anticorpii pacientului (adică ANA) complexați cu antigenele nucleare ale acestuia (figura 2).

Figura 2A. Schema de detectare a anticorpilor flourescenți indirecți a titlurilor ANA din serul canin (nu este desenată la scară).

Figura 2B. Rezultatul pozitiv al testului cu imunofluorescență localizată la nuclei.

În concluzie, titrurile serice RF și ANA pot fi utile în diagnosticul tulburărilor autoimune. Este important faptul că atât titrul seric RF, cât și titrul ANA ar trebui să fie rezervate pacienților cu simptome clinice compatibile cu poliartrita reumatoidă și, respectiv, cu lupusul eritematos sistemic. Bolile infecțioase, alte tulburări autoimune și afecțiunile neoplazice trebuie să fie excluse în mod eficient înainte de efectuarea acestor teste și mai ales înainte de a interpreta rezultatele pozitive. Laboratorul de imunologie clinică KSVDL oferă în prezent servicii comerciale validate de detectare a titrurilor serice RF și ANA pentru canini. Pentru testare se solicită aproximativ 1-3 ml de ser, separat de cheagul de sânge și plasat într-un tub nou cu capac roșu. Odată separat, serul trebuie păstrat la frigider și expediat cu un pachet rece în termen de 1-2 zile de la colectare. Pentru întrebări suplimentare cu privire la oricare dintre aceste teste, vă rugăm să contactați KSVDL Client Care la 1-866-512-5650 sau 785-532-5650.

Tabel 1. Abordarea diagnostică a poliartritei canine

Tabelul 2: Criterii de diagnostic propuse pentru LES canin

.