Modificări patologice cauzate de Anoplocephala perfoliata în joncțiunea ileocecală a ecvideului
Treizeci și unu de cai de rasă mixtă, cu vârste cuprinse între 15 luni și 13 ani, trimiși în mod regulat la abatoare, au fost selectați aleatoriu pentru acest studiu. Aceștia au inclus 11 animale fără paraziți (grupul de control) și 20 de cai afectați de o infecție spontană cu A. perfoliata. La toți caii, joncțiunea ileocecală a fost prelevată în termen de 30 de minute de la moarte. Ulterior, probele intestinale au fost clătite în apă curentă și plasate imediat în formol tamponat neutru 10%. Între timp, teniile adulte atașate la joncțiunea ileocecală au fost numărate direct, înregistrate, clătite în apă curentă și conservate într-o soluție de formol 10%. Tenia colectată a fost pusă în soluție de lactofenol și apoi montată pe lame pentru a fi identificată cu ajutorul parametrilor morfologici (Euzeby 1981). Pe baza numărului de tenii înregistrate, cei 31 de cai selectați au fost împărțiți în patru grupe: grupa „N”, cu 0 tenii; grupa „A”, cu 1 până la 20 de tenii; grupa „B”, cu tenii cuprinse între 20 și 100; și grupa „C”, cu mai mult de 100 de tenii.
De la fiecare probă, secțiuni de 5 µm grosime, încorporate în parafină, au fost colorate cu hematoxilină-eozină și violet de cresil. Investigația histologică a fost efectuată pentru a evalua următorii parametri: infiltrație inflamatorie limfomonocitară și eozinofilă în mucoasă/submucoasă, atrofie/fuziune a vilozităților intestinale, leziuni erozive/ulcerative, modificări degenerative ale celulelor caliciale și hiperplazie a foliculilor limfatici intestinali. Fiecărui parametru selectat i s-a atribuit un scor individual: 0, absența leziunilor; 1, leziuni ușoare; 2, leziuni moderate; și 3, leziuni marcate. Prin urmare, pe baza sumei totale a scorurilor înregistrate, leziunile mucoasei și submucoasei au fost clasificate după cum urmează: 0 (nicio modificare) cu 0-2 puncte; I (modificări ușoare) cu 3-7 puncte, II (modificări moderate) cu 8-12 puncte și III (modificări marcate) cu 13-15 puncte.
La nivelul joncțiunii ileocecale, grosimile straturilor musculare circulare și longitudinale au fost cuantificate prin analiză de imagine (NIS-Elements Br-2) pentru a identifica condițiile hipertrofice. Pentru fiecare probă, investigația histopatologică a ENS a fost evaluată prin evaluare morfometrică pentru a evalua densitatea liniară medie pentru ganglionii mioenterici, numărul de celule neuronale și procentul mediu de celule neuronale cromatolitice/necrotice în trei secțiuni seriale de 3 cm.
Un model liniar general (GLM) a fost utilizat pentru a verifica o corelație semnificativă între încărcătura parazitară și clasificarea histopatologică a leziunilor mucoase și submucoase. Pentru a detecta diferențele semnificative între numărul de ganglioni mioenterici, numărul de celule neuronale, procentul de neuroni cromatolitici/necrotici, grosimea straturilor musculare și grupul identificat pe baza numărului de tenii înregistrate, s-a utilizat o analiză a varianței (ANOVA) cu o singură direcție urmată de testul de comparație multiplă Tukey. Nivelul de semnificație presupus a fost de 5 %. Analiza statistică a fost efectuată cu ajutorul software-ului R versiunea 2.7 (GNU GENERAL PUBLIC LICENCE, Free Software Foundation, Inc., Boston, SUA).
.