NanoHybrids – Conjugarea anticorpilor pentru nanoparticule de aur

Sondele de nanoparticule de aur conjugate cu anticorpi permit studierea și vizualizarea proceselor celulare și moleculare in vitro și in vivo; un instrument esențial atât pentru cercetătorii din științele de bază, cât și pentru clinicieni.
Mulți cercetători cheltuiesc timp și energie excesivă pentru a sintetiza ei înșiși acești conjugați, cu grade diferite de succes și rezultate inconsistente. Cei mai mulți constată că, în timp ce realizează singuri aceste conjugări, suferă de o atașare inconsecventă a anticorpilor la particule și de o eficiență de marcare celulară nereproductibilă.
Soluționarea primei probleme de atașare inconsecventă a anticorpului la particulă necesită atât:
(1) crearea unei legături stabile între particulă și anticorp și
(2) caracterizarea adecvată a atașării anticorpului.

Pentru a crea o legătură stabilă, anticorpii trebuie să fie legați covalent de suprafață. Schema de mai jos prezintă mai multe metode diferite de conjugare a anticorpilor.

Metoda de adsorbție fizică este cea mai puțin stabilă. Ea se bazează pe afinitatea anumitor grupe funcționale de pe proteine, cum ar fi aminele și tiolii, de a fi atrase prin interacțiuni necovalente la suprafața particulelor. Într-un mediu in vivo sau chiar în mediile celulare, anticorpii care sunt adsorbiți fizic pot fi ușor deplasați.
De aceea, metoda de conjugare covalentă este cel mai utilizat regim. Aceasta asigură o legătură stabilă între nanoparticula de aur și anticorpul și pot fi utilizate mai multe chimicale diferite, cum ar fi N-hidroxizuccinimida (NHS) cuplată cu 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC). Cu toate acestea, deși această metodă produce o atașare stabilă, ea trebuie totuși caracterizată.

Conjugare direcțională pentru o mai bună eficiență

Caracterizarea nanoparticulelor de aur conjugate cu anticorpi implică, de obicei, estimarea raportului anticorp/particule prin compararea măsurătorilor de fluorescență ale particulelor conjugate cu anticorpi marcați cu fluorofori cu standardele cunoscute de anticorpi marcați cu fluorofori. Măsurarea în sine poate fi complicată de stingerea fluoroforului la suprafața nanoparticulelor metalice. În plus, cercetătorii trebuie, de asemenea, să pregătească anticorpul conjugat cu fluoroforul și standardele sale.

NanoHybrids poate utiliza o metodă de conjugare direcțională care ameliorează multe dintre aceste probleme.
Pentru a permite atașarea direcțională, un capăt al unei molecule reticulante heterobifuncționale este legat de regiunea Fc a anticorpului. Celălalt capăt al linkerului se leagă direct de suprafața nanoparticulei de aur, asigurând o legătură direcțională între anticorp și particulă. Folosind această metodă, se realizează o legătură stabilă între particulă și anticorp, lăsând în același timp regiunea variabilă (Fv), sau situsul de interacțiune cu antigenul, fără obstacole sterile și disponibilă pentru legare.
Natura direcțională a atașamentului face ca caracterizarea raportului anticorp/particulă să fie mai consistentă și, de asemenea, îmbunătățește eficiența marcării celulelor și direcționarea moleculară. Eficiența de marcare poate fi crescută de 7 până la 10 ori folosind o metodă de atașare direcțională față de cea non-direcțională. Utilizarea nanoparticulelor de aur conjugate direcțional poate genera economii semnificative de costuri, poate spori productivitatea și poate accelera descoperirea științifică.

Servicii personalizate de conjugare a anticorpilor

Potențiam să conjugăm nanoparticulele noastre de aur cu anticorpi, proteine sau orice alte moeități la alegerea dumneavoastră. De asemenea, oferim asistență tehnică pentru cercetătorii care doresc să achiziționeze nanoparticulele noastre de aur și să lucreze la conjugări. Contactați-ne astăzi pentru cerințele dumneavoastră de conjugare personalizată.

.