Serviciul de analiză a izomerilor de biliverdin (BV)

Biliverdinul este un pigment verde format ca un produs secundar al descompunerii hemoglobinei. Este format din patru inele de pirrol conectate liniar (un tetrapirrol). Biliverdina se formează atunci când grupul heme din hemoglobină este scindat la nivelul punții sale alfa-metilenice. Biliverdina rezultată este apoi redusă la bilirubină, un pigment galben, de către enzima biliverdin reductază. Schimbarea culorii unei vânătăi de la violet intens la galben în timp este un indicator grafic al acestei reacții. Biosintetizat din hemoglobină este un precursor al bilirubinei. Aceasta apare în bila amfibiilor și a păsărilor, dar nu în bila umană normală sau în serul uman.

Hemul este cel mai bine cunoscut ca un constituent al hemoglobinei, care este eliberat în asociere cu descompunerea globulelor roșii îmbătrânite. Hemul este, de asemenea, conținut într-o gamă largă de enzime a căror turnover duce, de asemenea, la eliberarea de heme liber. Hemul liber poate fi toxic, astfel încât natura a dezvoltat o familie de enzime hemo-oxigenaze pentru a degrada hema, iar blocarea acestora duce la o excreție mult mai mare de hema nemetabolizat în bilă. Aceste enzime scindă inelul de heme pentru a forma biliverdin, fier și un fragment cu 1 carbon sub formă de monoxid de carbon. CO este din ce în ce mai apreciat ca fiind un neurotransmițător, iar fierul, el însuși toxic, este excretat din celule printr-o pompă recent caracterizată. Biliverdina ar părea a fi un produs final adecvat al căii, fiind ușor de excretat în bilă pentru a intra în intestin și a părăsi organismul prin fecale. Într-adevăr, la păsări, reptile și amfibieni, biliverdina este produsul final predominant al degradării hemului. Din motive care până acum au părut obscure, la mamifere, biliverdina suferă un metabolism suplimentar, fiind redusă de biliverdin reductaza (BVR) la bilirubină, o etapă care consumă resursa energetică nicotinamidă adenină dinucleotidă fosfat (NADPH).

Figura 1. Reacțiile enzimatice ale hemeoxigenazei și biliverdin reductazei.

Biliverdinii sunt derivați formal din heme prin îndepărtarea oxidativă a unei punți de metină și pierderea atomului de fier. Natura asimetrică a hemului IX duce la posibilitatea existenței a patru izomeri diferiți de biliverdin, fiecare corespunzând îndepărtării unei punți metinice diferite și numiți în consecință. Astfel, izomerii Ixα, IXβ, IXγ și IXδ ilustrați în schema I corespund, respectiv, îndepărtării punților α, β, γ și δ ale mezoemului. O astfel de izomerie este importantă în studiul metabolismului hemului și al bilinei.

Figura 2. Structurile a patru izomeri de biliverdine (Ixα, IXβ, IXγ și IXδ).

Biliverdina posedă proprietăți antimutagene și antioxidante semnificative și, prin urmare, poate îndeplini o funcție fiziologică utilă. S-a demonstrat că biliverdina și bilirubina sunt agenți puternici de îndepărtare a radicalilor peroxilici. De asemenea, s-a demonstrat că acestea inhibă efectele hidrocarburilor aromatice policiclice, ale aminelor heterociclice și ale oxidanților – toate acestea fiind mutagene. Unele studii au constatat că persoanele cu niveluri mai ridicate de concentrație de bilirubină și biliverdin în organism au o frecvență mai mică a cancerului și a bolilor cardiovasculare. S-a sugerat că biliverdina – precum și mulți alți pigmenți tetrapirrolici – ar putea funcționa ca un inhibitor al proteazei HIV-1, precum și că ar avea efecte benefice în cazul astmului, deși sunt necesare cercetări suplimentare pentru a confirma aceste rezultate. În prezent, nu există implicații practice pentru utilizarea biliverdinului în tratamentul vreunei boli.

La mamifere, transformarea biliverdinului de către biliverdin reductaza este rapidă. Astfel, biliverdina este o specie cu durată de viață scurtă și, în comparație cu bilirubina, este prezentă în ser în concentrații relativ scăzute. Concentrațiile serice crescute de biliverdin (hiperbiliverdinemie sau icter verde) la om sunt rare și sunt cauzate în principal de mutații în genele enzimelor metabolice. Biliverdina nu a fost inclusă în testele standard de diagnosticare; cu toate acestea, mai multe studii au sugerat administrarea de biliverdina în terapie datorită activității sale antioxidante și antiinflamatorii. O astfel de administrare ar putea crește cererea pentru un test de biliverdin în viitor. Pe de altă parte, există deja o nevoie de un test de diagnosticare a biliverdinului în medicina veterinară. Păsările și reptilele au o activitate redusă a biliverdin-reductazei și produc cantități foarte mici de bilirubină. Concentrațiile crescute de biliverdin în ser, bilă sau excremente pot indica o anemie datorată unei intoxicații sau infecții sau unor probleme hepatice sau obstrucție biliară. Biliverdinuria este aproape întotdeauna semnul unei boli hepatice și apare din cauza unei acumulări serice de biliverdin care depășește pragul renal. Biliverdina este, prin urmare, un analit alternativ în diagnosticarea bolilor păsărilor și reptilelor, pentru care valorile de referință nu au fost încă stabilite. În plus, biliverdina este, de asemenea, un pigment important al cojii de ouă la mai multe specii. Studiile de colorare a ouălor necesită, de asemenea, o analiză a biliverdinului pentru a determina conținutul de biliverdin din cojile de ouă.

Există astfel o nevoie clară de o metodă eficientă, simplă și rentabilă pentru determinarea biliverdinului. Creative Proteomics oferă un sistem cromatografic unidimensional în strat subțire care a utilizat pentru rezoluția izomerilor IXα, IXβ, IXγ și IXδ ai biliverdinului, iar fiecare izomer este identificat fără ambiguitate.

Rezumat

• Identificarea și cuantificarea izomerilor de biliverdin (BV)

Cerințe de eșantionare

• Volumetrie normală: 100ul de plasmă; 50mg de țesut; 2e7 celule
• Volumetrie minimă: 50uL de plasmă; 30mg de țesut; 5e6 celule

Raport

• Un raport tehnic detaliat va fi furnizat la finalul întregului proiect, incluzând procedura experimentală, parametrii instrumentului.
• Analiții sunt raportați ca uM sau ug/mg (țesut), iar CV-urile sunt în general<10%.
• Numele analiților, abrevierea, formula, greutatea moleculară și CAS# vor fi, de asemenea, incluse în raport.

Cu set integrat de separare, sisteme de caracterizare, identificare și cuantificare caracterizate de o excelentă robustețe & reproductibilitate, înaltă și ultrasensibilitate, Creative Proteomics oferă servicii metabolomice fiabile, rapide și eficiente din punct de vedere al costurilor, orientate spre izomerii de biliverdin (BV).

Cum se plasează o comandă: