Vectori retrovirali amfotropici și VSV-G-pseudotipici transduc celulele progenitoare hematopoietice umane cu o eficiență similară

O restricție a transferului de gene retrovirale în celulele stem hematopoietice este nivelul scăzut al receptorului virusului amfotropic. În studiul de față, am examinat dacă vectorii retrovirali pseudotipizați cu proteina G a virusului stomatitei veziculare (VSV) pot depăși această restricție. Celulele progenitoare umane purificate prin bile magnetice și sortare celulară au fost transpuse cu un vector retroviral amfotropic sau pseudotipat VSV-G care conținea receptorul trunchiat al factorului de creștere nervoasă uman ca genă marker. Celulele au fost prestimulate cu ligand flt-3, factor de celule stem și interleukină-3 și au fost transducute pe fibronectină. Expresia genelor marker a fost analizată prin citometrie în flux. Eficiența de transducție a virusului amfotropic și a virusului VSV-G-pseudotip pentru celulele CD34+ nu a fost semnificativ diferită. Transferul de gene în celulele CD34+CD38-, care sunt îmbogățite în progenitori mai imaturi, nu a fost restricționat, iar eficiențele de transfer pentru acest subset au fost, de asemenea, similare pentru ambele pseudotipuri. Adăugarea de fibronectină a îmbunătățit considerabil transferul de gene cu vectorul amfotropic (de la 5 la 19,3 ori, media 12,6), în timp ce efectul asupra pseudotipului VSV-G a fost mult mai puțin pronunțat (de la 1 la 3,9 ori, media 2,1, P = 0,04). În concluzie, s-au obținut niveluri ridicate de transfer de gene către progenitorii hematopoietici umani cu un protocol de transducție optimizat, iar eficiența transducției nu a putut fi îmbunătățită în continuare prin utilizarea VSV-G-pseudotipuri. Bone Marrow Transplantation (2000) 25 , Suppl. 2, S75-S79.

.