Amphotropa och VSV-G-pseudotypade retrovirala vektorer transducerar mänskliga hematopoietiska progenitorceller med liknande effektivitet

En begränsning för retroviral genöverföring till hematopoietiska stamceller är den låga nivån av amphotropa virusreceptor. I den här studien undersökte vi om retrovirala vektorer pseudotypade med G-proteinet från vesikulärt stomatitvirus (VSV) kan övervinna denna begränsning. Mänskliga progenitorceller som renats med hjälp av magnetiska pärlor och cellsortering transducerades med en amfotropisk eller VSV-G-pseudotypad retroviral vektor som innehöll den trunkerade mänskliga receptorn för nervtillväxtfaktor som markörgen. Cellerna förstimulerades med flt-3-ligand, stamcellsfaktor och interleukin-3 och transducerades på fibronectin. Uttrycket av markörgenerna analyserades med flödescytometri. Transduktionseffektiviteten hos amfotropiskt och VSV-G-pseudotypt virus för CD34+-celler skiljde sig inte nämnvärt åt. Genöverföring till CD34+CD38-celler, som är berikade på mer omogna progenitorer, begränsades inte och överföringseffektiviteten för denna delmängd var också likartad för båda pseudotyperna. Tillsatsen av fibronectin förbättrade genöverföringen med den amfotropiska vektorn avsevärt (5- till 19,3-faldigt, medelvärde 12,6), medan effekten på VSV-G-pseudotypen var mycket mindre uttalad (1- till 3,9-faldigt, medelvärde 2,1, P = 0,04). Sammanfattningsvis uppnåddes höga nivåer av genöverföring till mänskliga hematopoietiska progenitorer med ett optimerat transduktionsprotokoll, och transduktionseffektiviteten kunde inte förbättras ytterligare genom användning av VSV-G-pseudotyper. Bone Marrow Transplantation (2000) 25, Suppl. 2, S75-S79.