Jämförelse av den svampdödande effekten av Aloevera-gel och Triphala: En in vitro-studie Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A

ORIGINAL ARTIKEL

År : 2017 | Volume : 29 | Issue : 2 | Page : 90-94

Sammanställning av svampdödande effekt av Aloevera gel och Triphala: En in vitro-studie
Supreet Jain1, Sheetal Mujoo2, Minal Daga3, Salona Kalra4, Ravleen Nagi1, Afshan Laheji5
1 Department of Oral Medicine and Radiology, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, India
2 Department of Oral Medicine and Radiology, College of Dentistry, Jazan University, Saudiarabien
3 Department of Conservative Dentistry and Endodontics, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, Indien
4 Department of Oral Medicine and Radiology, Triveni Institute of Dental Sciences Hospital and Research Centre, Bilaspur, Chhattisgarh, Indien
5 Department of Oral and Maxillofacial Pathology, Daswani Dental College, Kota, Rajasthan, Indien

Korrespondensadress:
Supreet Jain
Department of Oral Medicine and Radiology, New Horizon Dental College and Research Institute, Sakri, Bilaspur, Chhattisgarh
India

Källa: Stöd: Ingen, Intressekonflikt: Inga

Check

DOI: 10.4103/jiaomr.JIAOMR_167_16

Sammanfattning

Syfte: Syftet med föreliggande studie var att fastställa och jämföra de svampdödande och hämmande aktiviteterna hos olika koncentrationer av Aloevera-gel och Triphala mot oral Candiada albicans. Material och metoder: Svamparna (C. albicans) isolerades från 10 patienter med pseudomembranös candidiasis och patienter med protesstomatit och överfördes till Sabourauds buljong, som senare inkuberades i Sabourauds dextrosagar (SDA). Den antimykotiska aktiviteten hos Aloevera-gelen och Triphala testades med hjälp av skivdiffusionsmetoden, och den minsta hämmande koncentrationen bestämdes med hjälp av mikrodilutionsmetoden i buljong. Resultat: Medelvärdet för hämmande zon för Aloevera var 3,35 ± 0,59 mm och 1,06 ± 0,41 mm vid 100 % respektive 50 %. För Triphala var det 4,19 ± 0,57 mm och 1,79 ± 0,43 mm vid 100 % respektive 50 % (P-värde < 0,001). Hämningszonen för 100 % Triphala visade ett högre värde än för Aloevera vid samma koncentration (P = 0,004). Liknande resultat erhölls vid 50 % koncentration av Triphala och Aloevera (P = 0,004). Minsta hämmande koncentration av Aloevera-gel och Triphala mot C. albicans var 25 % respektive 12,5 %. Slutsats: Aloevera-gel och Triphala visade båda svampdödande egenskaper vid högre koncentrationer och kan användas som ett lovande komplement till svampdödande medel.

Nyckelord: Antifungal, culture, natural

How to cite this article:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Comparison of antifungal effect of Aloevera gel and Triphala: An in vitro study. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017;29:90-4

How to cite this URL:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Comparison of antifungal effect of Aloevera gel and Triphala: An in vitro study. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017 ;29:90-4. Available from: https://www.jiaomr.in/text.asp?2017/29/2/90/217911

Introduktion

Candida är ett släkte av jästsvampar och är den vanligaste orsaken till orala svampinfektioner. De flesta arter av Candida är ofarliga kommensaler eller endosymbionter hos värddjur, inklusive människor, men när immunförsvaret är nedsatt eller när slemhinnebarriärerna är störda kan de invadera och orsaka sjukdom. Candida albicans är den vanligaste isolerade arten och är ansvarig för oral tröst, pseudomembranös candidiasis.
Kostnaden, biverkningarna och den ökade resistensen mot kommersiellt tillgängliga svampdödande läkemedel har lett till att forskarna har utforskat naturliga naturläkemedel mot svampinfektioner.
Traditionellt använda medicinalväxter är en rik källa till antimikrobiella medel och är lättillgängliga i landsbygdsområden. De är relativt sett billigare än modern medicin. Sekundära metabolitprodukter som produceras av medicinalväxter är en viktig källa till många farmaceutiska läkemedel.
Aloevera är en kaktusliknande växt som tillhör familjen Liliacea. Aloevera-gel är en slemhinnig färglös gel som utsöndras av de parenkymatösa cellerna i färska Aloevera-blad. Den innehåller 98-99 % vatten och 1-2 % aktiva föreningar som aloin, aloe-emodin, aloemannan, flavonoider, aloesin, steroler, aminosyror och vitaminer. Triphala betyder tre frukter och är ett indiskt ayurvediskt preparat som består av Terminali chebula, T. Belerica och Phyllantus embelica i förhållandet 1:1:1. Dess fytokemiska beståndsdelar är tannin, gallussyra, ellaginsyra, fenol och glykosider. Både Aloevera och Triphala har antibakteriella, antioxidativa, svampdödande, antiinflammatoriska och immunmodulerande egenskaper.,,, Effekterna av Aloevera- och Triphalaextrakt på oral Candida-infektion har studerats av mycket få forskare i Indien. Syftet med studien var att bestämma de svampdödande och hämmande aktiviteterna hos olika koncentrationer av Aloevera-gel och Triphala mot C. albicans.

Material och metoder

Studien genomfördes på avdelningen för mikrobiologi, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur. Etiskt godkännande togs från den institutionella etiska kommittén. Informerat samtycke togs från alla patienter. Candida-svabben togs från de patienter som led av pseudomembranös candidiasis med hjälp av protesstomatit och överfördes till Sabourauds buljong . Alla Candida-isolat bekräftades med hjälp av bakterietest och sporgroningstest. Detta isolerade Candida-prov inkuberades i Sabouraud’s dextrose agar SDA (HIMEDIA laboratories, Mumbai) vid 4°C.

Figur 1: Candida tillväxt i Sabouraud’s buljong Klicka här för att se

Förberedelse av Aloevera-extraktet
Tjockt epidermis av färska Aloevera-blad avlägsnades och den fasta slemhinniga gelen samlades upp i en steril behållare . Tio millimeter av gelen blandades i 100 ml 1 % dimetylsulfoxid (DMSO) och förvarades vid 4°C. DMSO (≤1 %) har en obetydlig effekt på svampens tillväxt och användes därför som lösningsmedel.

Figur 2: Extraktion av Aloevera-gel från färska blad i steril platta Klicka här för att se

Förberedelse av Triphala-extraktet
Hundra gram Triphala churna (Dabur Triphala churna) blandades i 100 ml vatten för att göra en vattenlösning . Denna lösning kokades sedan i 45 minuter. Senare kyldes den och filtrerades. Detta filtrat användes för att kontrollera dess svampdödande effekt. Antimykotisk egenskap hos Aloevera gel och Triphala påvisades med hjälp av skivdiffusionsmetoden.

Figur 3: Triphala churna Klicka här för att visa

Aktivering av Candida albicans
Loopful svampsporer ströks ut på potato dextrose agar (PDA)-platta och inkuberades vid 37°C i 24 timmar före testet. Alla plattor (n = 10) förvarades vid 4 °C för vidare användning.
Skivdiffusionsmetod
Åtta millimeters brunnar borrades i varje platta (n = 10 för Candida) med aktiverad C. albicans, med en 8 mm borrare i utsädesagar i vilken 100 %, 50 %, 25 % och 12,5 % Aloevera-gelextrakt hälldes. För Triphala borrades 8 mm stora brunnar i olika plattor (n = 10 för Triphala) med aktiverad C. albicans med en 8 mm borrare i agar med utsäde i vilken 100 %, 50 %, 25 % och 12,5 % Triphalaextrakt hälldes. Efter att det normaliserats till rumstemperatur inkuberades plattorna vid 37 °C i 24 timmar. Inhibitionszonen mättes och registrerades .

Figur 4: (a) Inhibitionszon vid 100 % koncentration av Triphala. (b) Hämningszon vid 50 % koncentration av triphala. (c) Hämningszon vid 100 % koncentration av Aloevera. (d) Hämningszon vid 50 % koncentration av Aloevera Klicka här för att se

Minimal hämmande koncentration
Minimal hämmande koncentration (MIC) gjordes med hjälp av mikrobrothutspädningsmetoden. Den högsta utspädning som inte gav någon enda svampkoloni togs som MIC. Aloeveraextrakt blandades med 1 % DMSO för att erhålla olika koncentrationer av stocken, dvs. 100 %, 50 %, 25 %, 12,5 % och 6,25 %. På samma sätt erhölls olika koncentrationer av Triphala genom att blanda extrakt med destillerat vatten. Lika stora volymer av de olika koncentrationerna av varje extrakt och blandades i mikrorör (Sabouraud dextrose broth) för att få fram 0,5 ml lösning. Rören inkuberades vid 37 °C i 24 timmar. Senare subkulturerades testutspädningen på SDA och inkuberades i 24 timmar för att kontrollera svamptillväxt .

Figur 5: Minsta hämmande koncentration för Triphala och Aloevera Klicka här för att visa

Statistisk analys
Data sammanställdes i MS Office Excel. Den statistiska analysen gjordes med hjälp av programpaketet SPSS version 21 (SPSS Statistics for Windows, Version 21.0. Chicago: SPSS Inc.). Variansanalys (ANOVA) test utfördes för jämförelser inom och mellan grupper. Post hoc-test (Tukey HSD) utfördes också för att jämföra olika koncentrationer av Aloevera, Triphala och båda. Resultaten mättes som medelvärde ± SD. P-värde mindre än <0,05 ansågs vara statistiskt signifikant och <0,001 som mycket signifikant.

Resultat

De insamlade Candida-proverna analyserades med Gram-färgning, vilket visade på förekomst av kluster av pseudohyphae som tydde på C. albicans-arter. Medelvärdet för hämmande zon för Aloevera var 3,35 ± 0,59 mm och 1,06 ± 0,41 mm vid 100 % respektive 50 %. För Triphala var det 4,19 ± 0,57 mm och 1,79 ± 0,43 mm vid 100 % respektive 50 %. Både Triphala och Aloevera-gel visade svampdödande egenskaper vid högre koncentrationer (100 % och 50 % koncentration, P-värde < 0,001).

Tabell 1: Medelvärde av hämmande zon för Aloevera och Triphala vid olika koncentrationer Klicka här för att se

Det observerades en mycket signifikant skillnad mellan 100 % och 50 % Aloevera (P< 0,001, t = 19,17). Liknande resultat observerades för 100 % och 50 % Triphala (P< 0,001, t = 31,58) . När ANOVA utfördes var frihetsgraden mellan Aloevera och Triphala 3 och inom grupperna (100 % vs. 50 %) var den 36 . Vid Post hoc-testet visade hämmande zon för 100 % Triphala ett högre värde än Aloevera vid samma koncentration (P = 0,004). Liknande resultat erhölls vid 50 % koncentration av Triphala och Aloevera (P = 0,000). Vid lägre koncentrationer (25 % och 12,5 %) fanns ingen effekt mot Candida. MIC för Aloevera-gel och Triphala mot C. albicans var 25 % respektive 12,5 %.

Tabell 2: Studenternas t-test för att visa jämförelse inom gruppen Klicka här för att se

Tabell 3: ANOVA-test som visar frihetsgrader mellan grupperna och inom gruppen Klicka här för att se

Tabell 4: Post hoc Test (Tukey HSD) som visar jämförelser inom grupperna Klicka här för att se

Diskussion

Uppkomsten av multiresistenta (MDR) bakterier och svampar och de höga kostnaderna för läkemedel har gjort det nödvändigt att utveckla alternativa läkemedel från naturliga och andra källor. Medicinalväxter, som används sedan urminnes tider i ayurveda, skulle kunna vara ett av dessa alternativ eftersom de är billiga, säkra och effektiva mot många mikrober. Många forskare har kontrollerat den antibakteriella effekten av Aloevera och Triphala.,,,, Mycket få studier har genomförts för att kontrollera den svampdödande effekten av dessa växter mot oral candidainfektion. ,,,,,, Den nuvarande studien genomfördes för att bestämma den svampdödande och hämmande aktiviteten av olika koncentrationer av Aloevera-gel och Triphala mot C. albicans. I den aktuella studien visade både Triphala och Aloevera en antikandidell egenskap vid 100 % och 50 % koncentrationer. Inga signifikanta förändringar sågs vid lägre koncentrationer (25 % och 12,5 %).

Sheta et al. använde 0,5 % DMSO och destillerat vatten som lösningsmedel och blandade Triphala (suspension) för att få en slutkoncentration på 100 mg/ml. De fann att zonen av hämning för Triphala mot Candida var 12 mm när vatten användes som lösningsmedel och 20 mm när DMSO användes som lösningsmedel. Författarna har också kontrollerat svampdödande egenskaper för DMSO och funnit att det inte har någon svampdödande effekt. De kokade inte vattensuspensionen, vilket kan vara orsaken till bättre resultat än vår studie. Randhawa föreslog att DMSO ökar cellens permeabilitet genom att binda till cellmembranen, vilket ger upphov till en synergistisk effekt med antikandidella läkemedel. I det presenterade fallet användes vatten som lösningsmedel för Triphala. El-Mekkawey et al. fann att T. chebula kan hämma Candida-arter (inklusive klotrimazolresistenta C. albicans). Malhotra et al. fann i sin in vitro-studie att kolonibildande enheter (CFU) av C. albicans sjönk till noll efter 10 minuter vid användning av 6 % Triphala munvatten.
Khaing fann att etanoliskt extrakt av Aloevera inte har någon antikandidell effekt. En liknande studie av Kaur et al. visade att Aloevera var effektivt mot C. albicans. De föreslog att ett positivt resultat i deras studie kunde bero på att förfarandet för gelextraktion hade ändrats, dvs. de extraherade gelen vid rumstemperatur medan en tidigare studie extraherade gelen vid 90 °C. Därför kan den aktiva komponenten ha gått förlorad i det etanoliska extraktet om extraktionen gjordes vid högre temperatur.
En studie av Stanley et al. fann att zonen av hämning för Aloevera mot C. albicans var 4 mm och MIC var 50 %, vilket liknade den nuvarande studien. Shireen et al. fann att den svampdödande egenskapen hos Aloevera är dosberoende. De tog Aloeverasaft (1000, 500, 250, 100 μg) från färska blad och blandade den med 10 ml etanol. Hämningszonen var 14 mm mot C. albicans vid koncentrationen 1000 μg, vilket var jämförbart med amfotericin B. Chainani et al. använde etanoliskt extrakt av Triphala och fann att det visade en antikandidell effekt vid koncentrationen 5 % och högre. Triphala visade bättre resultat jämfört med Aloevera, med större hämmande zon i både 100 % och 50 % koncentration. Dessutom hämmar Triphala Candida-tillväxten vid lägre koncentration (12,5 %) jämfört med Aloevera (50 %).
Den antimikrobiella effekten av Aloevera tillskrivs den naturliga komponenten som kallas antrakinoner (emodin, aloetiksyra, aloin, antracen, anthranol, barbaloin, krysofansyra, eterisk olja, ester av cinnaminsyra, isobarbaloin och resistannol)., Det renade aloeproteinet på 14 kDa från Aloeveras bladgel uppvisade en potent svampdödande aktivitet mot C. albicans.Den svampdödande effekten av Triphala beror på dess två komponenter.

Vi har funnit att både Triphala och Aloevera har uppvisat en svampdödande aktivitet mot C. albicans. Mekanismen för dessa växtbaserade medels verkan på mikrober är dock ännu inte klarlagd. Vidare krävs fler studier på olika svampbelastningar och olika koncentrationer av både Triphala och Aloevera för att kontrollera deras potens mot olika Candida-arter.

Slutsats

Ökning av svamppatogener, begränsade terapeutiska alternativ, biverkningar av terapeutiska läkemedel och framväxten av MDR utgör tillsammans en börda för patienter med nedsatt immunitet. C. albicans är den vanligaste opportunistiska infektionen i munhålan och isoleras ofta från vävnadsprover från drabbade patienter. I traditionell medicin har växtprodukter använts sedan urminnes tider. Eftersom de är lätta att få tag på och har en mindre toxisk effekt har man försökt utveckla terapeutiska alternativ med hjälp av molekyler från växtkällor. Denna studie är också ett liknande försök att kontrollera de svampdödande effekterna av Triphala och Aloevera. I denna studie visade sig Aloevera och Triphala visa svampdödande aktivitet.
Begränsningar
Denna studie genomfördes in vitro och omfattade en liten provstorlek. I framtiden bör fler försök utföras på större populationer (in vivo) för att bevisa den svampdödande effekten av Aloevera och Triphala mot C. albicans för att karaktärisera verkningsmekanismen för ytterligare översättning till klinisk användning och övervinna utmaningarna med svampterapi.
Finansiellt stöd och sponsring
Noll.
Intressekonflikter
Det finns inga intressekonflikter.

	Rathod M, Das N, Dhale D. Antimykotisk aktivitet hos två medicinalväxter mot svampen Candida albicans. Int J Pharma Bio Science 2015;6:701-6.
	Martins C, Silva D, Neres A, Magalha T, Watanabe G, Modolo L, et al. Curcumin as a promising antifungal of clinical interest. J Antimicrob Chemother 2009;63:337-9.
	Fani M, Kohanteb J. Inhibitory activity of Aloe vera gel on some clinically isolated cariogenic and periodontopathic bacteria. J Oral Sci 2012;54:15-21.
	Vogler BK, Ernst E. Aloe vera: En systematisk genomgång av dess kliniska effektivitet. Br J Gen Pract 1994;9:823-8.
	Ahmad I, Mehmood Z, Mohammad F. Screening of some Indian medicinal plants for their antimicrobial properties. J Ethnopharmacol 1998;62:183-93.
	Wadhwan R, Sharma S, Solanki G, Solanki R. Role of triphala in dentistry: En genomgång. Int J Preclinical Pharmaceutical Res 2014;2:95-9.
	Kammoun M, Miladi S, Ali YB, Damak M, Gargouri Y, Bezzine S.In vitro-studie av PLA2-hämning och antioxidativa aktiviteter hos Aloe vera bladhudextrakt. Lipids Health Dis 2011;10:30.
	Shetty PJ, Hegde V, Gomes L. Anticandidal efficacy of denture cleansing tablet, Triphala, Aloe vera, and Cashew leaf on complete dentures of institutionalized elderly. J Ayurveda Integr Med 2014;5:11-4.
	Randhawa MA, Aljabre SHM. Dimetylsulfoxid (DMSO) har en additiv effekt och ändrar minimala hämmande koncentrationer av svampdödande läkemedel. J Rawalpindi Med College 2007;11:54-60.
	Harringtom A, McCourtney K, Nowowiejski D, Limaye A. Differentiering av Candida albicans jäst direkt från blododlingar med hjälp av gramfärgningsmorfologi. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2007;26:325-9.
	El-Mekkawey M, Merelhy M. Inhibitoriska effekter av egyptisk folkmedicin på omvänt transkriptas av humant immunbristvirus (HIV). Chem Pharm Bull 1995;43:641-8.
	Sheta MM, Kikani KM, Kavithia P, Thakkar J, Rangnani T. Study of antimicrobial activity of Triphala and its individual components. Int J Herb Med 2016;4:41-3.
	Malhotra A, Malhotra I, Solanki R, Khangwal M, Kumar D. Utvärdering av antibakteriella och svampdödande egenskaper hos örtbaserad munsköljning- En prospektiv studie. Int J Enhanced Res Med Dent Care 2015;2:33-7.
	Khaing TA. Utvärdering av den svampdödande och antioxidativa aktiviteten hos bladextraktet av Aloe vera (Aloe barbadensis Miller). World Acad Sci Engineer Tech 2011;5:3-23.
	Kaur H, Goyal RR, Bhattacharya A, Gupta R, Lal NK, Arora B, et al. Antimykotisk aktivitet av fytoextrakt av Piper Longum, Aloevera och Withania somnifera mot den humana svampen Candida albicans, en opportunistisk patogen. DU J Undergrad Res Innov 2015;1:107-15.
	Stanley MC, Ifeanyi OE, Eziokwu OG. Antimikrobiella effekter av Aloevera på vissa mänskliga patogener. Int J Curr Microbiol App Sci 2014;3:1022-8.
	Shireen F, Manipal S, Prabhu D. Antifungal activity of aloevera:In vitro study. SRM J Res Dent Sci 2015;6:92-5.
	Chainani S, Siddana S, Reddy CV, Thippeswamy M, Maurya M, Rudraswami S. Antimikrobiell aktivitet av Triphala på Lactobacilli och candida albicans: En in vitro-studie. J Orofac Sci 2015;7:104-7.
	Pandey R, Mishra A. Antibacterial activities of crude extract of Aloe barbedensis to clinically isolated bacterial pathogens. Appl Biochem Biotechnol 2010;160:1356-61.

Figurer

, , , , ,
.