Patologiska förändringar orsakade av Anoplocephala perfoliata i den ileocekaliska korsningen hos hästar
Trettioen hästar av blandad ras, i åldrarna 15 månader till 13 år, som regelbundet sändes till slakterier, valdes slumpmässigt ut för denna studie. De omfattade 11 parasitfria djur (kontrollgrupp) och 20 hästar som drabbats av spontan A. perfoliata-infektion. Hos alla hästar togs ileocecal junction upp inom 30 minuter efter döden. Därefter sköljdes tarmproverna i rinnande vatten och placerades omedelbart i 10 % neutralt buffrat formalin. Under tiden räknades, registrerades, sköljdes i rinnande vatten och konserverades i en 10-procentig formalinlösning vuxna bandmaskar som var fästade vid den ileocecaliska korsningen. De insamlade bandmaskarna lades i laktofenollösning och monterades sedan på objektglas för att identifieras med hjälp av morfologiska parametrar (Euzeby 1981). Baserat på antalet registrerade bandmaskar delades de utvalda 31 hästarna in i fyra grupper: grupp ”N” med 0 bandmaskar, grupp ”A” med 1 till 20 bandmaskar, grupp ”B” med bandmaskar mellan 20 och 100 och grupp ”C” med mer än 100 bandmaskar.
Från varje prov färgades 5 µm tjocka paraffininbäddade snitt med hematoxylin-eosin och kresylviolett. Histologisk undersökning utfördes för att utvärdera följande parametrar: lymfomonocytär och eosinofil inflammatorisk infiltration i mucosa/submucosa, atrofi/fusion av tarmvilli, erosiva/ulcerativa lesioner, degenerativa förändringar av gobletceller och hyperplasi av tarmens lymfatiska folliklar. En poäng tilldelades individuellt för varje vald parameter: 0, inga lesioner, 1, lindriga lesioner, 2, måttliga lesioner och 3, uttalade lesioner. På grundval av den totala summan av de registrerade poängen graderades slemhinne- och submukosaskadorna enligt följande: 0 (inga förändringar) med 0-2 poäng, I (milda förändringar) med 3-7 poäng, II (måttliga förändringar) med 8-12 poäng och III (markerade förändringar) med 13-15 poäng.
I den ileocekala övergången kvantifierades tjockleken på de cirkulära och longitudinella muskelskikten med hjälp av bildanalys (NIS-Elements Br-2) för att identifiera hypertrofiska tillstånd. För varje prov bedömdes den histopatologiska undersökningen av ENS genom morfometrisk utvärdering för att bedöma den genomsnittliga linjära tätheten för myenteriska ganglier, antalet neuronala celler och den genomsnittliga procentandelen kromatolytiska/nekrotiska neuronala celler i tre 3 cm långa seriella sektioner.
En allmän linjär modell (GLM) användes för att verifiera ett signifikant samband mellan parasitbördan och den histopatologiska klassificeringen av slemhinne- och submukosala lesioner. En envägs variansanalys (ANOVA) följt av Tukey’s Multiple Comparison test användes för att upptäcka signifikanta skillnader mellan antalet myenteriska ganglier, antalet neuronala celler, andelen kromatolytiska/nekrotiska neuroner, tjockleken på muskelskikten och den grupp som identifierades baserat på antalet registrerade bandmaskar. Fem procent var den antagna signifikansnivån. Statistisk analys utfördes med hjälp av programvaran R 2.7 version (GNU GENERAL PUBLIC LICENSE, Free Software Foundation, Inc., Boston, USA).