DETEKTION AF ANTI-NEUTROPHIL ANTIBODIES

Neutrofile antistoffer kan forårsage en række lidelser, herunder neonatal immunneutropeni, autoimmun neutropeni, immunneutropeni efter knoglemarvstransplantation, lægemiddelinduceret immunneutropeni og transfusionsrelateret akut lungeskade. Der findes i øjeblikket ikke én enkelt teknik, der defekterer alle klinisk relevante neutrofile antistoffer. En kombination af granulocyt-agglutinations- og immunofluorescensprøver er i øjeblikket den mest effektive metode til påvisning. På grund af den autolytiske tendens hos opbevarede neutrofiler skal der anvendes friske, omhyggeligt isolerede neutrofiler som testceller. Testneutrofilerne bør typebestemmes for de neutrofile antigener NA1, NA2, NB1, SH og 5b. Hvis det ikke er muligt at bestemme alloantistofspecificiteten ud fra reaktionsmønsteret med typede testceller, bør serummet testes i et antigenspecifikt assay baseret på monoklonalt antistofspecifik immobilisering af granulocytter (MAIGA-assay). For at undgå besværlig celleisolering til alloantistofidentifikation har vi etableret stabile pattedyrcellelinjer, der udtrykker de neutrofile antigener NA1, NA2 og SH. Ca. 30 % af de neutrofile autoantistoffer viser præferentiel binding til NA1-antigenet, og de påvises bedst ved brug af neutrofiler fra NA1-homozygote donorer eller NA1-eksprimerende pattedyrceller. Autoantistoffer påvises kun i 74 % af sera i den første runde af antistofscreeningen. På den anden side kan en positiv direkte antistoftest af patientens neutrofiler ikke betragtes som et bevis for tilstedeværelsen af autoantistoffer, fordi patientens neutrofiler normalt er aktiveret med øget ekspression af komplement og Fcyreceptorer, hvilket resulterer i uspecifik IgG-binding. Derfor er testning af patientens sera med intervaller for ubundne neutrofile antistoffer fortsat den bedste metode til påvisning af autoantistoffer.