Az Aloevera gél és a Triphala gombaellenes hatásának összehasonlítása: An in vitro study Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A

ORIGINAL ARTICLE

Year : 2017 | Volume : 29 | Issue : 2 | Page : 90-94

Az Aloevera gél és a Triphala gombaellenes hatásának összehasonlítása: An in vitro study
Supreet Jain1, Sheetal Mujoo2, Minal Daga3, Salona Kalra4, Ravleen Nagi1, Afshan Laheji5
1 Department of Oral Medicine and Radiology, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, India
2 Department of Oral Medicine and Radiology, College of Dentistry, Jazan University, Saudi Arabia
3 Konzervatív Fogászat és Endodontia Tanszék, New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur, Chhattisgarh, India
4 Szájsebészeti és Radiológiai Tanszék, Triveni Institute of Dental Sciences Hospital and Research Centre, Bilaspur, Chhattisgarh, India
5 Oral and Maxillofacial Pathology Department, Daswani Dental College, Kota, Rajasthan, India

Levelezési cím:
Supreet Jain
Department of Oral Medicine and Radiology, New Horizon Dental College and Research Institute, Sakri, Bilaspur, Chhattisgarh
India

Supreet Jain
Szájsebészeti és Radiológiai Tanszék, New Horizon Dental College and Research Institute, Sakri, Bilaspur, Chhattisgarh
India

Támogatás forrása: Nincs, összeférhetetlenség: Nincs

Check

DOI: 10.4103/jiaomr.JIAOMR_167_16

Abstract

Cél: Jelen vizsgálat célja az Aloevera gél és a Triphala különböző koncentrációinak gombaölő és gátló hatásának meghatározása és összehasonlítása volt a Candiada albicans orális fertőzéssel szemben. Anyagok és módszerek: A gombákat (C. albicans) 10 pszeudomembranózus candidiasisban szenvedő betegből és műfogsor stomatitisben szenvedő betegből izoláltuk, majd Sabouraud-lébe vittük át, amelyet később Sabouraud-dextróz agarban (SDA) inkubáltunk. Az Aloevera gél és a Triphala gombaellenes aktivitását korongdiffúziós módszerrel vizsgálták, a minimális gátló koncentrációt pedig broth mikrodilúciós módszerrel határozták meg. Eredmények: Az Aloevera gátlási zónájának átlagértéke 3,35 ± 0,59 mm, illetve 1,06 ± 0,41 mm volt 100%-os és 50%-os gátlási zóna esetén. A Triphala esetében 4,19 ± 0,57 mm és 1,79 ± 0,43 mm volt 100% és 50% esetén (P-érték < 0,001). A 100%-os Triphala gátlási zónája magasabb értéket mutatott, mint az Aloeveráé ugyanabban a koncentrációban (P = 0,004). Hasonló eredményeket kaptunk a Triphala és az Aloevera 50%-os koncentrációjánál is (P = 0,004). Az Aloevera gél és a Triphala minimális gátló koncentrációja a C. albicans ellen 25%, illetve 12,5% volt. Következtetés: Az Aloevera gél és a Triphala magasabb koncentrációban is gombaellenes tulajdonságot mutatott, és ígéretes kiegészítője lehet a gombaellenes szereknek.

Kulcsszavak: Antifungal, culture, natural

How to cite this article:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Comparison of antifungal effect of Aloevera gel and Triphala: An in vitro study. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017;29:90-4

How to cite this URL:
Jain S, Mujoo S, Daga M, Kalra S, Nagi R, Laheji A. Comparison of antifungal effect of Aloevera gel and Triphala: An in vitro study. J Indian Acad Oral Med Radiol 2017 ;29:90-4. Elérhető: https://www.jiaomr.in/text.asp?2017/29/2/90/217911

Bevezetés

A Candida az élesztőgombák nemzetségébe tartozik, és a szájüregi gombás fertőzések leggyakoribb oka. A Candida fajok többsége ártalmatlan komensál vagy endoszimbionta a gazdaszervezetekben, beleértve az embert is; azonban, ha az immunrendszer legyengül, vagy ha a nyálkahártya gátjai sérülnek, behatolhatnak és betegséget okozhatnak. A Candida albicans a leggyakrabban izolált faj, és felelős a szájpenészért, a pseudomembranosus candidiasisért.
A költségek, a mellékhatások és a kereskedelmi forgalomban kapható gombaellenes gyógyszerekkel szembeni növekvő rezisztencia arra késztette a kutatókat, hogy a gombás fertőzések elleni természetes gyógynövényeket kutassák., A hagyományosan használt gyógynövények gazdag forrásai az antimikrobiális hatóanyagoknak, és vidéken könnyen elérhetők. Viszonylag olcsóbbak, mint a modern gyógyszerek. A gyógynövények által termelt másodlagos anyagcseretermékek számos gyógyszerhatóanyag fontos forrása.
Aloevera egy kaktuszszerű növény, amely a Liliacea családba tartozik. Az Aloevera gél egy nyálkás színtelen gél, amelyet a friss Aloevera levelek parenchymatikus sejtjei választanak ki. 98-99% vizet és 1-2% aktív vegyületeket tartalmaz, mint például aloin, aloe-emodin, aloemannan, flavonoidok, aloesin, szterolok, aminosavak és vitaminok. A Triphala három gyümölcsöt jelent, egy indiai ayurvédikus készítmény, amely Terminali chebulát, T. Belericát és Phyllantus embelicát tartalmaz 1:1:1:1 arányban, fitokémiai összetevői a tannin, galluszsav, ellagsav, fenol és glikozidok. Mind az Aloevera, mind a Triphala antibakteriális, antioxidáns, gombaellenes, gyulladáscsökkentő és immunmoduláló tulajdonságokkal rendelkezik.,, Az Aloevera és Triphala kivonatok hatását a szájüregi Candida fertőzésre nagyon kevés kutató tanulmányozta Indiában. A vizsgálat célja az volt, hogy meghatározzuk az Aloevera gél és a Triphala különböző koncentrációinak gombaellenes és gátló hatását a C. albicans ellen.

Anyagok és módszerek

A vizsgálatot a New Horizon Dental College and Research Institute, Bilaspur Mikrobiológiai Tanszékén végeztük. Az etikai engedélyt az intézményi etikai bizottságtól kaptuk. Minden betegtől tájékozott beleegyezést kértek. A pszeudomembranózus candidiasisban szenvedő betegektől Candida-tampont vettek a műfogsor stomatitisével, és Sabouraud-lébe vitték át. Az összes Candida-izolátumot csíracsőpróbával és spóracsírázási teszttel igazolták. Ezt az izolált Candida-mintát Sabouraud’s dextróz agar SDA-ban (HIMEDIA laboratories, Mumbai) inkubáltuk 4°C-on.

1. ábra: Candida növekedés Sabouraud táptalajon Click here to view

Az Aloevera kivonat előállítása
A friss Aloevera levél vastag hámrétegét eltávolítottuk, és a szilárd nyálkás gélt steril tartályba gyűjtöttük . Tíz milliméter gélt 100 ml 1%-os dimetil-szulfoxidban (DMSO) kevertünk össze, és 4°C-on tartottuk. A DMSO (≤1%) jelentéktelen hatással van a gombák növekedésére, ezért oldószerként használtuk.

2. ábra: Az Aloevera gél kivonása friss levelekből steril tányérban Click here to view

A Triphala kivonat előállítása
Egyszáz gramm Triphala churna (Dabur Triphala churna) 100 ml vízben elkeverve vizes oldatot készítettünk . Ezután ezt az oldatot 45 percig forraljuk. Később lehűtötték és leszűrték. Ezt a szűrletet használtuk fel a gombaellenes hatás ellenőrzésére. Az Aloevera gél és a Triphala gombaellenes tulajdonságát korongdiffúziós módszerrel mutatták ki.

3. ábra: Triphala churna Click here to view

A Candida albicans aktiválása
A gomba spórákat burgonya dextróz agar (PDA) lemezre szórták és 37°C-on inkubálták 24 órán keresztül a vizsgálat előtt. Minden lemezt (n = 10) 4°C-on tartottunk a további felhasználásig.
Diffúziós módszer
A C. albicans-t aktiváló lemezeken (n = 10 a Candida esetében) 8 mm-es fúróval nyolc milliméteres mélyedéseket fúrtunk a magokkal bevetett agarba, amelybe 100%, 50%, 25% és 12,5% Aloevera gél kivonatot öntöttünk. Hasonlóképpen, a Triphala esetében 8 mm-es lyukakat fúrtunk a különböző, aktivált C. albicans-t tartalmazó lemezeken (n = 10 a Triphala esetében), 8 mm-es fúróval magozott agarban, amelybe 100%, 50%, 25%, 25%, 12,5% Triphala kivonatot öntöttünk. Miután szobahőmérsékletre normalizáltuk, a lemezeket 37°C-on inkubáltuk 24 órán keresztül. A gátlási zónát megmértük és feljegyeztük .

4. ábra: (a) Gátlási zóna a Triphala 100%-os koncentrációjánál. (b) Gátlási zóna a Triphala 50%-os koncentrációjánál. (c) Gátlási zóna az Aloevera 100%-os koncentrációjánál. (d) Gátlási zóna az Aloevera 50%-os koncentrációjánál Click here to view

Minimális gátló koncentráció
A minimális gátló koncentrációt (MIC) a mikrohígításos módszerrel határoztuk meg. A legnagyobb hígítást, amely egyetlen gombakolóniát sem eredményezett, tekintették MIC-nek. Az Aloevera-kivonatokat 1%-os DMSO-val kevertük, hogy különböző koncentrációjú törzsoldatot kapjunk: 100%, 50%, 25%, 12,5% és 6,25%. Hasonlóképpen, a Triphala különböző koncentrációit a kivonat desztillált vízzel való keverésével nyertük. Az egyes kivonatok különböző koncentrációinak azonos térfogatát mikrocsövekben (Sabouraud-dextróz tápoldat) kevertük össze, hogy 0,5 ml oldatot kapjunk. A csöveket 37°C-on 24 órán át inkubáltuk. Később a teszthígítást SDA-n szubkultúráztuk és 24 órán át inkubáltuk, hogy ellenőrizzük a gombák növekedését .

5. ábra: A Triphala és az Aloevera minimális gátló koncentrációja A megtekintéshez kattintson ide

Statisztikai elemzés
Az adatokat MS Office Excel programban állítottuk össze. A statisztikai elemzés az SPSS 21-es verziójú szoftvercsomag segítségével történt (SPSS Statistics for Windows, Version 21.0. Chicago: SPSS Inc.). A csoporton belüli és a csoportok közötti összehasonlításokhoz varianciaanalízis (ANOVA) tesztet végeztünk. Post hoc tesztet (Tukey HSD) is végeztünk az Aloevera, Triphala és mindkettő különböző koncentrációinak összehasonlítására. Az eredményeket átlag ± SD-ben mértük. A <0,05-nél kisebb P-értéket statisztikailag szignifikánsnak, <0,001-et pedig nagymértékben szignifikánsnak tekintettük.

Eredmény

A gyűjtött Candida-mintákat Gram-festéssel elemeztük, amely C. albicans fajra utaló pszeudohifa-klaszterek jelenlétét mutatta ki. Az Aloevera esetében a gátlási zóna átlagértéke 3,35 ± 0,59 mm, illetve 1,06 ± 0,41 mm volt 100%-os és 50%-os gátlás mellett. A Triphala esetében ez az érték 4,19 ± 0,57 mm és 1,79 ± 0,43 mm volt 100% és 50% mellett. Mind a Triphala, mind az Aloevera gél magasabb koncentrációban (100% és 50% koncentráció, P érték < 0,001) gombaellenes tulajdonságot mutatott.

1. táblázat: Az Aloevera és a Triphala gél gátlási zónájának átlagértéke különböző koncentrációban Click here to view

A 100% és 50% Aloevera között rendkívül jelentős különbség volt megfigyelhető (P< 0,001, t = 19,17). Hasonló eredményeket figyeltek meg a 100% és 50% Triphala esetében (P< 0,001, t = 31,58) . Amikor ANOVA-t végeztek, az Aloevera és Triphala között a szabadságfok 3 volt, a csoportokon belül (100% v/s 50%) pedig 36 . A Post hoc teszt során a 100%-os Triphala gátlási zónája magasabb értéket mutatott, mint az Aloevera ugyanabban a koncentrációban (P = 0,004). Hasonló eredményeket kaptunk a Triphala és az Aloevera 50%-os koncentrációjánál is (P = 0,000) . Alacsonyabb koncentrációban (25% és 12,5%) nem volt hatás a Candida ellen. Az Aloevera gél és a Triphala MIC értéke a C. albicans ellen 25%, illetve 12,5% volt.

2. táblázat: Student’s t-test a csoporton belüli összehasonlítás bemutatására Click here to view

3. táblázat: ANOVA-teszt a csoportok közötti és a csoporton belüli szabadságfokok feltüntetésével Click here to view

4. táblázat: Post hoc teszt (Tukey HSD) a csoportokon belüli összehasonlítást mutatja Click here to view

Discussion

A multidrog-rezisztens (MDR) baktériumok és gombák megjelenése és a gyógyszeres gyógyszerek magas költségei szükségessé tették a természetes és egyéb forrásokból származó alternatív gyógyszerek kifejlesztését. Az ősidők óta az Ayurvédában használt gyógynövények egyike lehet ezeknek az alternatíváknak, mivel olcsók, biztonságosak és számos mikroba ellen hatásosak. Sok kutató ellenőrizte az Aloevera és a Triphala antibakteriális hatását.,,, Nagyon kevés tanulmányt végeztek e növények gombaellenes hatásának ellenőrzésére a szájüregi candidialis fertőzés ellen.,,,,,, A jelen tanulmányt az Aloevera gél és a Triphala különböző koncentrációinak gombaellenes és gátló hatásának meghatározására végezték a C. albicans ellen. A jelen vizsgálatban mind a Triphala, mind az Aloevera antikandidális tulajdonságot mutatott 100%-os és 50%-os koncentrációban. Alacsonyabb koncentrációban (25% és 12,5%) nem tapasztaltak jelentős változásokat.

Sheta és munkatársai 0,5% DMSO-t és desztillált vizet használtak oldószerként, és a Triphala-t (szuszpenzió) 100 mg/ml végső koncentrációhoz keverték. Azt találták, hogy a Triphala gátlási zónája a Candida ellen 12 mm volt, amikor vizet használtak oldószerként, és 20 mm, amikor DMSO-t használtak oldószerként. A szerzők a DMSO gombaellenes tulajdonságát is ellenőrizték, és megállapították, hogy nincs gombaellenes hatása. Ők nem forralják a vizes szuszpenziót, ami a mi vizsgálatunknál jobb eredmények oka lehet. Randhawa felvetette, hogy a DMSO a sejtmembránhoz kötődve növeli a sejtek áteresztőképességét, így szinergista hatást okoz az antikandidális gyógyszerekkel. A bemutatott esetben a Triphala oldószereként vizet használtunk. El-Mekkawey és munkatársai megállapították, hogy a T. chebula gátolhatja a Candida fajokat (beleértve a klotrimazol-rezisztens C. albicans-t is). Malhotra és munkatársai in vitro vizsgálatukban azt találták, hogy a C. albicans kolóniaképző egységei (CFU-k) 10 perc után nullára csökkentek 6%-os Triphala szájvíz használatával.
Khaing megállapította, hogy az Aloevera etanolos kivonatának nincs antikandidális hatása. Kaur és munkatársai hasonló vizsgálatában az Aloevera hatásosnak bizonyult a C. albicans ellen. Felvetették, hogy a vizsgálatukban elért pozitív eredmény a géles extrakciós eljárás megváltoztatása miatt lehetett, azaz ők szobahőmérsékleten extrahálták a gélt, míg egy korábbi vizsgálatban 90°C-on extrahálták a gélt. Ezért az aktív komponens elveszhetett az etanolos kivonatban, ha az extrakciót magasabb hőmérsékleten végezték.
A Stanley és munkatársai által végzett vizsgálat szerint az Aloevera gátlási zónája a C. albicans ellen 4 mm és a MIC 50% volt, ami hasonló volt a jelen vizsgálathoz. Shireen et al. megállapította, hogy az Aloevera gombaellenes tulajdonsága dózisfüggő. Friss levelekből vették az Aloevera levét (1000, 500, 250, 100 μg), és 10 ml etanollal keverték össze. A gátlási zóna 14 mm volt a C. albicans ellen 1000 μg koncentrációban, ami összehasonlítható volt az amphotericin B-vel. Chainani és munkatársai Triphala etanolos kivonatát használták, és megállapították, hogy 5%-os és magasabb koncentrációban antikandidális hatást mutatott. A Triphala jobb eredményeket mutatott az Aloeverával összehasonlítva, nagyobb gátlási zónával mind 100%-os, mind 50%-os koncentrációban. Ezenkívül a Triphala alacsonyabb koncentrációban (12,5%) gátolja a Candida növekedését, mint az Aloevera (50%).
Az Aloevera antimikrobiális hatását az antrakinonoknak nevezett természetes összetevőnek tulajdonítják (emodin, aloetic acid, aloin, antracene, anthranol, barbaloin, chrysophanic acid, ethereal oil, cinnamic acid ester, isobarbaloin és resistannol)., Az Aloevera levélgélből származó tisztított 14 kDa aloe fehérje erős gombaölő hatást mutatott a C. albicans ellen.A Triphala gombaölő hatása két komponensének köszönhető .

Megállapítottuk, hogy mind a Triphala, mind az Aloevera gombaölő hatást mutatott a C. albicans ellen. Azonban ezeknek a növényi hatóanyagoknak a mikrobákra gyakorolt hatásmechanizmusát még nem értjük. Továbbá további vizsgálatokra van szükség különböző gombaterheléseken és mind a Triphala, mind az Aloevera különböző koncentrációin, hogy ellenőrizzük a különböző Candida fajok elleni hatékonyságukat.

Következtetés

A gombás kórokozók számának növekedése, a korlátozott terápiás lehetőségek, a terápiás gyógyszerek mellékhatásai és az MDR megjelenése együttesen terhet ró a legyengült immunitású betegekre. A C. albicans a szájüreg leggyakoribb opportunista fertőzése, amelyet gyakran izolálnak az érintett betegek szövetmintáiból. A hagyományos gyógyászatban ősidők óta használnak növényi termékeket. Könnyű hozzáférhetőségük és kevésbé toxikus hatásuk miatt erőfeszítéseket tettek a növényi forrásokból származó molekulák felhasználásával történő terápiás lehetőségek kifejlesztésére. Ez a tanulmány is egy hasonló törekvés a Triphala és az Aloevera gombaellenes hatásainak ellenőrzésére. Ebben a vizsgálatban az Aloevera és a Triphala gombaellenes aktivitást mutatott.
Korlátozások
A jelen vizsgálatot in vitro végezték, és kis mintát vontak be. A jövőben több vizsgálatot kell végezni nagyobb populáción (in vivo) az Aloevera és a Triphala gombaellenes hatékonyságának bizonyítására a C. albicans ellen, a hatásmechanizmus jellemzésére a klinikai alkalmazásba való további átültetés és a gombaterápiák kihívásainak leküzdése érdekében.
Finanszírozási támogatás és szponzorálás
Nincs.
Érdekütközéses összeférhetetlenség
Nincs összeférhetetlenség.

	Rathod M, Das N, Dhale D. Két gyógynövény gombaellenes aktivitása Candida albicans gombával szemben. Int J Pharma Bio Science 2015;6:701-6.
	Martins C, Silva D, Neres A, Magalha T, Watanabe G, Modolo L, et al. Curcumin as a promising antifungal of clinical interest. J Antimicrob Chemother 2009;63:337-9.
	Fani M, Kohanteb J. Az Aloe vera gél gátló hatása néhány klinikailag izolált kariogén és parodontopátiás baktériumra. J Oral Sci 2012;54:15-21.
	Vogler BK, Ernst E. Aloe vera: A systematic review of its clinical effectiveness. Br J Gen Pract 1994;9:823-8.
	Ahmad I, Mehmood Z, Mohammad F. Screening of some Indian medicinal plants for their antimicrobial properties. J Ethnopharmacol 1998;62:183-93.
	Wadhwan R, Sharma S, Solanki G, Solanki R. A triphala szerepe a fogászatban: A review. Int J Preclinical Pharmaceutical Res 2014;2:95-9.
	Kammoun M, Miladi S, Ali YB, Damak M, Gargouri Y, Bezzine S. In vitro study of the PLA2 inhibition and antioxidant activities of Aloe vera leaf skin extracts. Lipids Health Dis 2011;10:30.
	Shetty PJ, Hegde V, Gomes L. Antikandidális hatékonysága a műfogsor tisztító tablettának, Triphalának, Aloe verának és Cashew levélnek intézményi idősek teljes fogsorán. J Ayurveda Integr Med 2014;5:11-4.
	Randhawa MA, Aljabre SHM. A dimetil-szulfoxid (DMSO) additív hatású és megváltoztatja a gombaellenes gyógyszerek minimális gátló koncentrációját. J Rawalpindi Med College 2007;11:54-60.
	Harringtom A, McCourtney K, Nowowiejski D, Limaye A. A Candida albicans élesztőgombák differenciálása közvetlenül vértenyészetből gramfestéses morfológiával. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2007;26:325-9.
	El-Mekkawey M, Merelhy M. Az egyiptomi népi gyógyászat gátló hatása a humán immunhiányos vírus (HIV) reverz transzkriptázára. Chem Pharm Bull 1995;43:641-8.
	Sheta MM, Kikani KM, Kavithia P, Thakkar J, Rangnani T. Study of antimicrobial activity of Triphala and its individual components. Int J Herb Med 2016;4:41-3.
	Malhotra A, Malhotra I, Solanki R, Khangwal M, Kumar D. Evaluation of antibacterial and antifungal properties of herbal mouthwash- A prospective study. Int J Enhanced Res Med Dent Care 2015;2:33-7.
	Khaing TA. Az Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) levélkivonatának gombaellenes és antioxidáns hatásainak értékelése. World Acad Sci Engineer Tech 2011;5:3-23.
	Kaur H, Goyal RR, Bhattacharya A, Gupta R, Lal NK, Arora B, et al. Antifungal activity of phyto-extracts of Piper Longum, Aloevera, and Withania somnifera against human fungal opportunistic pathogen Candida albicans. DU J Undergrad Res Innov 2015;1:107-15.
	Stanley MC, Ifeanyi OE, Eziokwu OG. Az Aloevera antimikrobiális hatásai néhány humán patogénre. Int J Curr Curr Microbiol App Sci 2014;3:1022-8.
	Shireen F, Manipal S, Prabhu D. Antifungal activity of aloevera:In vitro study. SRM J Res Dent Sci 2015;6:92-5.
	Chainani S, Siddana S, Reddy CV, Thippeswamy M, Maurya M, Rudraswami S. A Triphala antimikrobiális aktivitása a Lactobacillusokra és a candida albicansra: Egy in vitro vizsgálat. J Orofac Sci 2015;7:104-7.
	Pandey R, Mishra A. Antibacterial activities of crude extract of Aloe barbedensis to clinically isolated bacterial pathogens. Appl Biochem Biotechnol 2010;160:1356-61.

Ábrák

, , , , ,
.